納米al2o3對斑馬魚肝基因表達(dá)的影響【開題報(bào)告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報(bào)告</b></p><p><b>　　生物技術(shù)</b></p><p>　　納米Al2O3對斑馬魚肝基因表達(dá)的影響</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　納米材料的生物安全性問題之所以受到科學(xué)家們的關(guān)注，是因?yàn)榧{米材料特殊的物理化

2、學(xué)性質(zhì)可能會導(dǎo)致它們在生物體內(nèi)的生理行為與常規(guī)物質(zhì)不同，在環(huán)境中的行為也可能與常規(guī)物質(zhì)不一樣。目前納米材料的生物效應(yīng)、環(huán)境效應(yīng)以及毒性和安全性的研究才剛剛起步，科學(xué)家們只對納米TiO2、SiO2、碳納米管、富勒烯和納米鐵粉等少數(shù)幾種納米材料的生物效應(yīng)進(jìn)行了初步研究。結(jié)果均表明這幾種納米材料對生命體有一定的毒性作用。如用吸入法和注入法將納米TiO2導(dǎo)入小鼠、大鼠和豚鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)TiO2能誘發(fā)肺部炎癥，并在肺部嚴(yán)重沉積，難以清除；在紫外光的

3、作用下，納米TiO2 能加強(qiáng)Gfsk-S1魚細(xì)胞中的DNA的損傷等。但是，納米材料的毒性及其作用機(jī)理還遠(yuǎn)遠(yuǎn)未被充分揭示，金屬納米顆粒是其中的一種類型，工業(yè)上大量生產(chǎn)的金屬納米粒子對生物及環(huán)境的效應(yīng)還是未知數(shù)，目前國內(nèi)外對金屬納米顆粒的生物學(xué)效應(yīng)研究較少，有報(bào)道表明納米A12O3粉可小鼠使血清LDH活性明顯增高；而納米ZnO對雌性小鼠的肝、腎和心肌有輕度毒性；Fe2O3納米粒子在一定范圍內(nèi)可抑制HepG2細(xì)胞增值，高劑量導(dǎo)致細(xì)胞線粒體膜電

4、位下降，且細(xì)胞凋亡率顯著增高。在對小鼠的研究</p><p>　　斑馬魚是一種小型熱帶淡水魚，生存能力強(qiáng)，遺傳背景清楚，物種穩(wěn)定，繁殖力強(qiáng)，胚胎透明，易于觀察，基于自身的這些優(yōu)點(diǎn)最早是作為胚胎發(fā)育生物學(xué)和遺傳學(xué)的實(shí)驗(yàn)動物模型。自20世紀(jì)70年代末期，國外開始運(yùn)用斑馬魚進(jìn)行化學(xué)物的急性毒性研究， 現(xiàn)在斑馬魚(Brachydanio rerio)是國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）推薦使用的標(biāo)準(zhǔn)化魚類毒性試驗(yàn)動物。</p

5、><p>　　本課題正是基于這一點(diǎn)，選取斑馬魚作為實(shí)驗(yàn)動物，研究納米Al2O3對斑馬魚生理代謝的影響及其相關(guān)基因表達(dá)的研究,為該領(lǐng)域的研究提供參考，積累數(shù)據(jù)，更為深入了解納米Al2O3的毒性及其機(jī)制提供基礎(chǔ)依據(jù)。</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　基本內(nèi)容</b></p><

6、p>　　1. 從轉(zhuǎn)錄水平研究納米Al2O3對魚的生物學(xué)效應(yīng)，包括RNA含量的測定；</p><p>　　2. 從分子水平研究納米Al2O3對魚的生物學(xué)效應(yīng)，如hsp70等基因的表達(dá)。</p><p><b>　　擬解決的主要問題</b></p><p>　　1. 斑馬魚魚肝RNA的提取及含量的測定；</p><p>

7、;　　2. 檢測熱應(yīng)激蛋白70（hsp70），金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子（mtf1），多藥耐藥基因（mdr)、 Na+-K+-ATP(nka)等基因的表達(dá)。</p><p>　　三、研究的方法與技術(shù)路線：</p><p><b>　　研究方法：</b></p><p>　　運(yùn)用RT-PCR技術(shù)，檢測熱應(yīng)激蛋白70（hsp70），金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子（mtf1

8、），多藥耐藥基因（mdr)、Na+-K+-ATP(nka)等基因在納米A12O3脅迫下的表達(dá)；</p><p><b>　　研究技術(shù)路線：</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進(jìn)度：</p><p>　　2009年10、11月 ： 納米A12O3 處理斑馬魚；</p><p>　　斑馬魚肝臟RNA提??；<

9、;/p><p>　　2010年3月至今： RT-PCR 檢測hsp70、mtf1、actin等基因的表達(dá)水平；</p><p>　　分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果（目前該部分工作已經(jīng)接近尾聲）。 </p><p><b>　　五、主要參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1] 湯宏波. 納米材料在生態(tài)環(huán)境方面的應(yīng)用及潛在危害[J].

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