中藥學(xué)畢業(yè)論文(含文獻(xiàn)綜述)復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級(jí) 中藥學(xué)(中藥分析與鑒定方向)

2、 </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　誠(chéng) 信 聲 明</b></p&g

3、t;<p>　　我聲明，所呈交的畢業(yè)論文是本人在老師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我查證，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。我承諾，論文中的所有內(nèi)容均真實(shí)、可信。</p><p>　　畢業(yè)論文作者（簽名）： </p><p>　　年

4、 月 日</p><p><b>　　目 錄</b></p><p><b>　　摘要Ⅰ-Ⅱ</b></p><p><b>　　1 前言1</b></p><p>　　2 材料與儀器2</p><p><b>　　

5、2.1 儀器2</b></p><p><b>　　2.2 試藥2</b></p><p><b>　　3 方法3</b></p><p><b>　　3.1定性鑒別3</b></p><p><b>　　3.2含量測(cè)定9</b>&l

6、t;/p><p><b>　　4 討論17</b></p><p>　　4.1 定性鑒別結(jié)果17</p><p>　　4.2 定量鑒別結(jié)果17</p><p><b>　　5 結(jié)論18</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)19</b><

7、;/p><p><b>　　綜 述21</b></p><p><b>　　致 謝29</b></p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究</p><p>　　摘要：目的 提高復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用薄層色譜鑒別法對(duì)成分中的當(dāng)黑面神、苦參、蛇床子、白鮮皮、地膚子進(jìn)行定性鑒別，用高

8、效液相色譜法測(cè)定黑面神中表兒茶素和苦參中苦參堿的含量。結(jié)果 在選定的薄層色譜條件下,色譜斑點(diǎn)清楚,分離效果好,無干擾；表兒茶素含量在0.0084～0.0336g·l-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=1.000,測(cè)定的平均回收率為97.7%，RSD1.4%（n=6）；苦參堿含量在0.0147～0.0588g·l-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.999,測(cè)定的平均回收率為97.6%，RSD1.5%（n=6）。結(jié)論 建立的

9、定性、定量方法較簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好。</p><p>　　關(guān)鍵詞：復(fù)方黑面神軟膏；薄層鑒別；高效液相色譜法</p><p>　　Study on the quality standards of compound Breynia fruticosa ointment</p><p>　　Abstract: Objective: To improve the

10、quality standards of compound Breynia fruticosa ointment. Methods: The Breynia fruticosa, Sophora flavescens,Fructus Cnidii, CORTEX DICTAMNI and Fructus Kochiae Scopariae radix were qualitatively identified by TLC. The c

11、ontent of L-Epicatechin in Breynia fruticosa and the content of matrine in Sophora flaves cens were determined byusing HPLC. Results: The spots on TLC plates were clear without interference in the blank reference.t The

12、linearity range of Epica</p><p>　　Keywords：Compound Breynia fruticosa Ointment，TLC，HPLC</p><p><b>　　1 前言</b></p><p>　　隨著社會(huì)的發(fā)展進(jìn)步，大氣環(huán)境、工業(yè)污染等多種因素的影響，導(dǎo)致人類皮膚病的患病率逐漸升高，所以關(guān)于其用藥

13、情況也在逐漸受到人們的關(guān)注。我們國(guó)家中醫(yī)藥里對(duì)皮膚病有著很多豐富的治療經(jīng)驗(yàn)和文字記載?！陡＝ㄋ幬镏尽吩唬骸昂诿嫔袢~，百部各60g。水煎沖明礬適量，洗患處治漆過敏，濕疹；黑面神鮮葉適量，搗爛絞汁，調(diào)雄黃末涂患處治帶狀皰疹。”《全國(guó)中草藥匯編》曰：“黑面葉適量，煮水坐盆或陰道沖洗，每日1次，治陰道炎、外陰瘙癢?！?lt;/p><p>　　在現(xiàn)代臨床應(yīng)用中，神礬散（黑面神100g、白礬30g）祛風(fēng)清熱、消腫解毒、燥濕止癢，

14、用于治療接觸性皮炎、皮膚瘙癢、濕疹等皮膚病[1]。劉仲霞等[2]運(yùn)用懸液定量殺菌試驗(yàn)方法對(duì)四種抗菌洗液殺菌效果進(jìn)行隨機(jī)抽樣檢測(cè)，結(jié)果顯示，純中草藥制劑舒斂爽抗菌洗液（由黑面神、百部、荊芥、苦參、蛇床子、防風(fēng)、地膚子和梔子組成）作用于金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和淋病球菌5min，殺菌率可達(dá)100%。林挺等人[3]對(duì)醋酸去炎松霜與中藥三七洗劑（黑面神、苦參、七大姑、蛇床子、野菊花、三亞苦、荊芥各30g，白鮮皮20g，布渣葉6g）治療嬰兒急性濕

15、疹的療效進(jìn)行了對(duì)比研究，證實(shí)中藥三七洗劑治療嬰兒急性濕疹效果顯著。李東海等人[4]運(yùn)用復(fù)方二藤洗劑（由黑面神、虎杖、三亞苦、大飛楊、忍冬藤、南蛇藤等組成）外洗治療掌跖膿皰病38例。</p><p>　　廣東省由于所處的地理位置和氣候適合各類病菌的生存和繁衍，因此會(huì)成為多類皮膚病高發(fā)區(qū)。作為皮膚病高發(fā)的地域，在長(zhǎng)期和皮膚病斗爭(zhēng)的過程中，廣東民間傳統(tǒng)中醫(yī)積累了大量寶貴經(jīng)驗(yàn)。很多中藥處方在防治皮膚病的過程中發(fā)揮了重要作

16、用。如90年代運(yùn)用自擬處方（黑面神、蛇床子、三亞苦、苦參、七大姑、荊芥、野菊花等各30g，白蘚皮20g，布渣葉6g）醫(yī)治面部激素依賴性皮炎，每次水煎煮后外洗，每日3~4次。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比較療效明顯增強(qiáng)。</p><p>　　近幾年來廣東地區(qū)皮膚病患者的人數(shù)在逐年增多，皮膚病的主要用藥如抗病毒藥、抗真菌藥、抗變態(tài)反應(yīng)藥等具有較顯著的副作用。中藥在變應(yīng)性接觸性皮炎的治療中顯示出一定優(yōu)勢(shì)。但價(jià)格低廉、含中藥有效

17、成分的皮膚外用藥種類卻很少。因此開發(fā)出使用方便、安全有效且價(jià)格便宜的中藥制劑有著迫切的市場(chǎng)需求。</p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏由黑面神、苦參、蛇床子、白鮮皮和五味子五味中藥組成，具有消炎和止癢的功效，對(duì)各類皮膚病有較好的治療作用。本課題的前期藥理實(shí)驗(yàn)已證實(shí)[5]，君藥黑面神全株水提液具有顯著的抗炎止癢作用、免疫抑制作用、抗皮膚Ⅰ型超敏反應(yīng)作用。</p><p>　　為了較好地控制復(fù)方

18、黑面神軟膏的質(zhì)量，文中對(duì)成品中黑面神等每味藥進(jìn)</p><p>　　行薄層色譜鑒別，并建立HPLC法測(cè)定成品君藥黑面神中表兒茶素和臣藥苦參中</p><p>　　苦參堿的含量,方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好。所探索的技術(shù)路線符合現(xiàn)代技術(shù)要求，可為黑面神其他劑型的開發(fā)研究提供借鑒。</p><p><b>　　2 材料與儀器</b></p&

19、gt;<p><b>　　2.1 儀器</b></p><p>　　Agilent 1100 series高效液相色譜儀；BS224S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司 d=0.0001g）；jj200型電子天平（常熟市雙杰測(cè)試儀廠）；電子JA-1203天平（上海天平儀器廠 d=0.001g）；DK-8D電熱恒溫三孔水槽（上海躍進(jìn)醫(yī)療械器有限公司）；UV-2550型紫外-

20、可見分光光度儀（日本島津）；KQ3200E醫(yī)用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；HH-S4數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市醫(yī)療儀器廠）；RE-2000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水真空泵（鞏義市英峪華中儀器廠）；東方一A型直熱式電熱恒溫干燥箱（廣州東方電熱干燥設(shè)備廠）；Good see-Ⅰ薄層色譜攝影儀（上海科哲生化科技有限公司）。</p><p><b>　　2.2 試藥<

21、/b></p><p>　　黑面神枝葉購(gòu)自廣州至信藥業(yè)有限公司，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)生鑒定教研室黃海波教授鑒定為大戟科黑面神屬植物Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥嫩枝葉，表兒茶素對(duì)照品（批號(hào)：110878-200102),苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：0805-9804），苦參對(duì)照藥材（批號(hào)：121019-201407），蛇床子對(duì)照品（批號(hào)：110822-200305），蛇床子對(duì)照藥藥材（批

22、號(hào)：121030-200405），白鮮皮對(duì)照藥材（批號(hào)：978-9301）地膚子對(duì)照藥材（批號(hào)：121148-200803）均為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。甲醇，色譜純；水為屈臣氏蒸餾水,磷酸為分析純。</p><p><b>　　3 方法</b></p><p><b>　　3.1定性鑒別</b></p><p>　?。?/p>

23、1）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，再加甲醇20mL,放置1h,濾過,濾液濃縮至5mL,作為黑面神供試品溶液。另外取黑面神對(duì)照藥材同法制成對(duì)照藥材溶液以及同法制成陰性樣品溶液。再取表兒茶素對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，最后吸取上述四種溶液各10μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（1:2:0.2:0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以25%磷鉬酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試

24、品溶液在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。</p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，加濃氨試液0.3mL，加三氯甲烷25mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL溶解，作為苦參供試品溶液；另取苦參對(duì)照藥材同法制成對(duì)照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的苦參陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。最后取苦參對(duì)照品適量，加乙醇制成0.2mg/mL的溶

25、液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述溶液各4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-氨水（5.2:0.7:0.6）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良的碘化鉍鉀試液，熱風(fēng)吹干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同的橙色斑點(diǎn)。 </p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏3g，加乙醇50mL超聲處理5分鐘，放置，取上清液作為供試品溶液，另取蛇

26、床子對(duì)照藥材4g加水100mL煮沸30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?mL同法制成對(duì)照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的蛇床子陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照品溶液，最后取蛇床子對(duì)照品溶液，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各6uL分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:3:2)為展開劑，展開，取

27、出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。</p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏4g，加甲醇30mL超聲處理20min，濾過，濾液加中性氧化鋁（100-200目）1.5g振搖2min濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液，取與供試品相應(yīng)量的白鮮皮陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液，另取

28、白鮮皮對(duì)照藥材1g加水40mL煮沸并保持微沸30min脫脂棉濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解作為對(duì)照藥材溶液，取上述3種溶液各5μL分別點(diǎn)于同一用0.5%氫氧化鈉溶液制成的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-濃氨水（20:20:1）的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，以10%的硫酸乙醇溶液顯色，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。</p><p&g

29、t;　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，加乙醇40mL，鹽酸3mL，加熱回流2h，靜置，傾出上清液，清液濃縮至約5mL，加水20mL，混勻，置分液漏斗中，加石油醚（60-90℃）振搖提取2次，每次約20mL，合并醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?mL使溶解，作為供試品溶液。另取地膚子對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的地膚子陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。照薄層層析法（《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版1部附錄

30、VI B）試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿（20:8:5）為展開劑，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無干擾。</p><p>　　3.1.1 黑面神的薄層鑒別</p><p>　　參照金芥麥配方顆粒的質(zhì)量[8]進(jìn)行方法的建立。本次將展開劑定為

31、甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（1:2:0.2:0.1），顯色劑為25%磷鉬酸乙醇溶液并與顯色劑用10%硫酸乙醇作比較。供試品按上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與表兒茶素對(duì)照品特征成分斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)性好，斑點(diǎn)所得Rf值適中，斑點(diǎn)清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對(duì)照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。</p><p>　　對(duì)在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果進(jìn)行比較，結(jié)果表明對(duì)薄層色譜效果影響不大。薄層色譜

32、圖見圖1~4。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖1 黑面神薄層鑒別色譜圖 圖2 黑面神薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。?5%磷鉬酸乙醇，T=23℃,RH=56%）

33、 （10%硫酸乙醇，T=23℃,RH=56%）</p><p>　　樣品：1.表兒茶素對(duì)照品； 2.黑面神對(duì)照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺黑面神陰性樣品溶液</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3

34、 4 5 6 </p><p>　　圖3 黑面神薄層鑒別色譜圖 圖4 黑面神薄層色譜鑒別圖</p><p>　?。?5%磷鉬酸乙醇，T=23℃，RH=38%） （25%磷鉬酸乙醇，T=16℃，RH=56%)</p><p>　　樣品：1.表兒茶素對(duì)照品； 2.黑面神對(duì)照藥材； 3-

35、5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺黑面神陰性樣品溶液</p><p>　　圖1,2為不同顯色劑下的黑面神薄層鑒別；圖1,3,4為對(duì)樣品進(jìn)行方法學(xué)考察。由圖1,2對(duì)比可得，樣品在10%硫酸乙醇下顯色的斑點(diǎn)相比較而言較不明顯，而在不同溫度和濕度的差別性不大。</p><p>　　3.1.2 苦參的薄層鑒別</p><p>　　在本次薄層

36、色譜中。展開劑定為乙酸乙酯-乙醇-氨水（5.2:0.7:0.6），顯色劑為改良碘化鉍鉀和碘化鉍鉀試液作比較。按正文方法處理后，供試品色譜中，供試品與苦參堿對(duì)照品顯相同染色的斑點(diǎn)且對(duì)應(yīng)性好，斑點(diǎn)Rf值較好。陰性樣品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無干擾。薄層色譜圖見圖5~6。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2

37、 3 4 5 6 </p><p>　　圖5苦參薄層鑒別色譜圖 圖6 苦參薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。ǜ牧嫉饣G鉀試液，T=18℃,RH=65%） （碘化鉍鉀試液，T=18℃,RH=65%）</p><p>　　樣品：1.苦參堿對(duì)照品； 2.苦參對(duì)

38、照藥材； 3-5.供試品溶液； </p><p>　　6.缺苦參陰性樣品溶液</p><p>　　圖5,6為苦參在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對(duì)照品相應(yīng)位置上的斑點(diǎn)均清晰，差別性不大，對(duì)比兩種顯色劑下的結(jié)果，碘化鉍鉀試液顯色的薄層相比于改良碘化鉍鉀試液顯色的薄層中，有一個(gè)斑點(diǎn)缺失，可能是由于此斑點(diǎn)顏色過淺，被碘化鉍鉀顏色掩蓋，總體影響不大。</p><

39、p>　　3.1.3 蛇床子的薄層鑒別</p><p>　　參照《中國(guó)藥典》2010年版一部[9]進(jìn)行方法的建立，其中將展開劑訂為甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:3:2)，然后按正文方法對(duì)樣品進(jìn)行處理，展開后，色譜圖中供試品斑點(diǎn)與對(duì)照品斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)清晰，且斑點(diǎn)Rf值較好。而陰性液相色譜中，在與供試品和對(duì)照品相應(yīng)的位置上無干擾。</p><p>　　對(duì)在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果

40、進(jìn)行比較，結(jié)果表明對(duì)薄層色譜效果影響不大。薄層色譜圖見圖7~9。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖7蛇床子薄層鑒別色譜圖 圖8 蛇床子薄層鑒別色譜圖</p><p>　　（紫

41、外線365nm下，T=22℃,RH=49%） （紫外線365nm下，T=17℃,RH=49%）</p><p>　　樣品：1.蛇床子素對(duì)照品； 2.蛇床子對(duì)照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺蛇床子陰性樣品溶液</p><p>　　1 2 3 4 5 6</p><p&g

42、t;　　圖9蛇床子薄層鑒別色譜圖</p><p>　　（紫外線365nm下，T=22℃,RH=63%）</p><p>　　樣品：1.蛇床子素對(duì)照品； 2.蛇床子對(duì)照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺蛇床子陰性樣品溶液</p><p>　　圖7~9為蛇床子樣品在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對(duì)照品相應(yīng)位置上

43、的斑點(diǎn)均清晰，差別性不大，對(duì)在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果進(jìn)行比較，結(jié)果表明對(duì)薄層色譜效果影響不大。</p><p>　　3.1.4 白鮮皮的薄層鑒別</p><p>　　參照白山片的薄層色譜鑒別方法[10]研究進(jìn)行方法的建立。本次對(duì)比展開劑環(huán)己烷-丙酮-濃氨水（20:20:1）的上層液與展開劑石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯（10:1）的展開效果，顯色劑為10%的硫酸乙醇溶

44、液顯色。供試品按上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與對(duì)照藥材特征成分斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)性較好，斑點(diǎn)所得Rf值適中，斑點(diǎn)清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對(duì)照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。如圖10~11。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p

45、>　　圖10 色譜圖（環(huán)己烷-丙酮-濃氨水） 圖11 色譜圖（石油醚-乙酸乙酯）</p><p>　?。?0%硫酸乙醇，T=21℃，RH=57% ） （10%硫酸乙醇，T=21℃，RH=57%）</p><p>　　樣品：1-2.白鮮皮對(duì)照藥材； 3-4.供試品溶液； 5-6.缺白鮮皮陰性樣品溶液</p><p>　　圖10~1

46、1為白鮮皮樣品在不同展開劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對(duì)照品的斑點(diǎn)均能較好的對(duì)應(yīng)上，差別性不大，但在環(huán)己烷-丙酮-濃氨水下展開得到的斑點(diǎn)較為清晰。 </p><p>　　3.1.5 地膚子的薄層鑒別</p><p>　　參照歸芍止癢顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[11]進(jìn)行方法的建立。本次將展開劑定為環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿（20:8:5），顯色劑為磷鉬酸試液并與顯色劑用10%硫酸乙醇作比較。供試品按

47、上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與表兒茶素對(duì)照品特征成分斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)性好，斑點(diǎn)所得Rf值適中，斑點(diǎn)清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對(duì)照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。如圖12~15。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>

48、　　圖12 地膚子薄層鑒別色譜圖 圖13 地膚子薄層鑒別色譜圖</p><p>　　（磷鉬酸試液，T=20℃，RH=56%) (10%硫酸乙醇，T=20℃，RH=56%）</p><p>　　樣品：1-2.地膚子對(duì)照藥材； 3-4.供試品 5-6.缺地膚子陰性樣品溶液</p><p>　　1

49、 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖14 地膚子薄層鑒別色譜圖 圖15 地膚子薄層鑒別色譜圖 </p><p>　　（磷鉬酸試液，T=20℃，RH=37%) （10%硫酸乙醇，T=20℃，RH=37

50、%）</p><p>　　樣品：1-2.地膚子對(duì)照藥材； 3-4.供試品 5-6.缺地膚子陰性樣品溶液</p><p>　　圖11,12為地膚子在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對(duì)照品相應(yīng)位置上的斑點(diǎn)均清晰，差別性不大。而通過12,13和14,15的對(duì)比，在濕度較低時(shí)，斑點(diǎn)顯色較淺，其它影響不大。</p><p><b>　　3.2 含

51、量測(cè)定</b></p><p>　　黑面神為復(fù)方黑面神軟膏中的主藥，具有“清濕熱、化瘀滯”以及抑菌、抗病毒、抗炎等的功效，用于濕疹、蕁麻疹、皮膚瘙癢、過敏性皮炎、漆過敏、陰道炎、外陰瘙癢、帶狀皰疹等多種皮膚病的治療。其中復(fù)方軟膏中的主要化學(xué)成分為表兒茶素和苦參堿。近年來，對(duì)苦參堿的含量測(cè)定方法的研究很多，如高效液相色譜法（HPLC)，高效毛細(xì)管電泳法（HPCE)，薄層掃描法(TLCS),酸堿滴定法等[

52、12]。其中TLCS一般采用硅膠G薄層板、雙波長(zhǎng)掃描法，具有取樣量少，操作簡(jiǎn)單 分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，但測(cè)定的靈敏度和準(zhǔn)確度有待提高；HPEC法具有選擇性高，分離效率高，速度快及樣品前處理簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)?？鄥A的堿性較強(qiáng)，極性較大，在采用HPCL法分析時(shí)，往往因?yàn)槲教珡?qiáng)而造成峰形不理想，但分離效果好。相對(duì)于苦參堿含量的測(cè)定，表兒茶素含量的測(cè)定方面的研究較少，一般采用高效液相色譜法（HPLC）和毛細(xì)管電泳法[13]進(jìn)行測(cè)定,毛細(xì)管電泳技術(shù)是一種

53、近年來發(fā)展很快的分離分析技術(shù)，具有高效、進(jìn)樣體積小、快速和抗污染能力強(qiáng)的特點(diǎn)，有關(guān)其應(yīng)用已經(jīng)做過多次報(bào)道。</p><p>　　現(xiàn)參照王英晶[7]運(yùn)用HPLC測(cè)定黑面神中表兒茶素含量的方法，對(duì)研制出的復(fù)方黑面神軟膏進(jìn)行含量測(cè)定，建立方中指標(biāo)成分表兒茶素和苦參堿的含量測(cè)定方法，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，此方法可行。</p><p>　　3.2.1 色譜條件 </p><p>　　

54、Boston Green ODS C18色譜柱（4.6mm×250mm,5um）流動(dòng)相甲醇-0.1%磷酸溶液，梯度洗脫（程序見表1），流速1.0mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)220nm和280nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μL。在此條件下供試品溶液中苦參堿和表兒茶素的峰與相鄰峰能達(dá)到基線分離，其保留時(shí)間為10.026min和48.333min。理論塔板數(shù)按苦參堿峰計(jì)算應(yīng)不低于4000，表兒茶素峰應(yīng)不低于3600。</

55、p><p><b>　　表1 梯度洗脫程序</b></p><p>　　圖16 苦參堿對(duì)照品液相色譜圖</p><p>　　圖17 苦參堿樣品液相色譜圖</p><p>　　圖18缺苦參堿陰性樣品液相色譜圖</p><p>　　圖19 表兒茶素對(duì)照品液相色譜圖</p><p>

56、　　圖20 表兒茶素樣品液相色譜圖</p><p>　　圖21 缺表兒茶素陰性樣品液相色譜圖</p><p>　　3.2.2 溶液的制備</p><p>　　3.2.2.1對(duì)照品溶液的制備 </p><p>　　精密稱取表兒茶素對(duì)照品8.4mg，加50%甲醇制成每1mL含0.84mg的溶液，搖勻，即得；精密稱取苦參堿對(duì)照品14.7mg，加甲

57、醇制成每1mL含1.47mg的溶液，搖勻，即得。</p><p>　　3.2.2.2供試品溶液的制備 </p><p>　　黑面神供試品溶液的制備：取本品約2g，精密稱定，用50%甲醇20mL溶解轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶，超聲20min，50%甲醇定容，搖勻，過0.45µm濾膜，取續(xù)濾液。</p><p>　　苦參供試品溶液的制備: 取本品約2g，精密稱定，置

58、具塞錐形瓶中，加入濃氨試液1mL充分浸潤(rùn)膏體后，精密加入三氯甲烷20mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率140W，頻率42kHz）30min，放冷，離心，取上清液5mL，減壓回收至干，殘?jiān)?0%甲醇溶解轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，即得。</p><p>　　3.2.2.3陰性溶液的制備 </p><p>　　按照處方量制備不含黑面神的陰性樣品和不含苦參的陰性樣品，

59、按照制備供試品的制備方法制備陰性對(duì)照溶液，即得。</p><p>　　3.2.2.4HPLC測(cè)定 </p><p>　　分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液20uL注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算表兒茶素和苦參堿的含量，陰性樣品溶液在于對(duì)照品色譜峰相同保留時(shí)間處無色譜峰出現(xiàn)，證明無陰性干擾。色譜圖見圖16~21。 </p><p>　　3.2.3

60、含量測(cè)定的方法學(xué)考察</p><p>　　3.2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 </p><p>　　分別精密吸取3.2.2.1中苦參堿和表兒茶素對(duì)照品溶液0.1，0.2，0.5，1，2，4mL置5mL量瓶中，苦參堿用甲醇稀釋至刻度，表兒茶素用50%甲醇稀釋至刻度，在3.2.1條件下進(jìn)樣分析。以進(jìn)樣濃度（g·L-1）為橫坐標(biāo)（X），以峰面積為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程分別為苦參

61、堿Y=1714.9X-3.8355（r=0.9999），表兒茶素Y=13346X+11.632（r=1.0000）。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見圖22~23</p><p>　　圖22 表兒茶素對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　圖23 苦參堿對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　3.2.3.2精密度試驗(yàn) </p><p>　　精密吸取同一濃度的對(duì)照品溶液

62、，在3.2.1條件下進(jìn)樣6次，測(cè)得苦參堿和表兒茶素含量，結(jié)果顯示RSD分別為0.57%和0.46%。表明實(shí)驗(yàn)儀器精密度良好。</p><p>　　3.2.3.3穩(wěn)定性試驗(yàn) </p><p>　　取同一份供試品溶液，在室溫下放置0、2、4、8、12、24、48小時(shí)后分別進(jìn)樣，依法測(cè)定，結(jié)果見表2和表3，軟膏中表兒茶素的平均含量為1.444，RSD為1.1%（n=7）；軟膏中苦參堿的平均含

63、量為2.458，RSD為2.0%（n=7）。結(jié)果表明：供試品溶液在48小時(shí)內(nèi)測(cè)定結(jié)果基本穩(wěn)定。</p><p>　　表2 復(fù)方黑面神軟膏穩(wěn)定性考察（表兒茶素）</p><p>　　表3 復(fù)方黑面神軟膏穩(wěn)定性考察（苦參堿）</p><p>　　3.2.3.4重復(fù)性試驗(yàn) </p><p>　　取同一復(fù)方軟膏中的樣品約5g，精密稱定，各6份，按

64、正文3.2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依法測(cè)定，結(jié)果見表4，5。復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素的平均含量為1.433mg/盒，RSD為2.5%（n=6）；軟膏中苦參堿的平均含量為2.433mg/盒，RSD為1.0%（n=6）。結(jié)果表明該方法有良好的重現(xiàn)性。</p><p>　　表4 復(fù)方黑面神軟膏重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（表兒茶素）</p><p>　　表5 復(fù)方黑面神軟膏重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（苦參堿）&l

65、t;/p><p>　　3.2.3.5加樣回收率試驗(yàn) </p><p>　　取已知含量的同一軟膏中的樣品約5g，精密稱定，各6份，分兩組，分別精密加入表兒茶素對(duì)照品溶液0.350mg和苦參堿對(duì)照品溶液0.600mg，按正文3.2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表6，7。復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素平均回收率為97.7%，RSD為1.4%（n=6）；復(fù)方黑面神軟膏中苦參

66、堿平均回收率為97.6%，RSD為1.5%（n=6）。結(jié)果表明表兒茶素和苦參堿的加樣回收試驗(yàn)良好，符合定量分析要求。</p><p>　　表6 復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果</p><p>　　表7 復(fù)方黑面神軟膏中苦參堿回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果</p><p>　　3.2.3.6樣品含量測(cè)定 </p><p>　　取復(fù)方黑面神軟膏的樣品3

67、批，按正文3.2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依法測(cè)定，計(jì)算供試品中表兒茶素和苦參堿的含量，結(jié)果見表8，9。</p><p>　　表8 復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素的含量測(cè)定結(jié)果</p><p>　　表9 復(fù)方黑面神軟膏中苦參堿的含量測(cè)定結(jié)果</p><p><b>　　4 討論</b></p><p>　　4.1 定性鑒

68、別結(jié)果</p><p>　　黑面神中薄層色譜鑒別參考文獻(xiàn)較少,實(shí)驗(yàn)難度較大。根據(jù)于健東[12]等薄層色譜法鑒別兒茶中兒茶素和表兒茶素文獻(xiàn)，用正丁醇-醋酸-水（3:2:1)為展開劑，5%硫酸乙醇溶液為顯色劑105℃加熱顯色時(shí)，得到黑面神中表兒茶素的薄層色譜斑點(diǎn)不清晰且拖尾嚴(yán)重。后用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:20:0.5）為展開劑，10%硫酸乙醇試液為顯色劑時(shí)，發(fā)現(xiàn)展開距離太短，斑點(diǎn)模糊。經(jīng)過多次試驗(yàn)摸

69、索最終確定使用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:30:0.5）為展開劑，25%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑，在110℃加熱顯色，所得結(jié)果斑點(diǎn)清晰分離度好。</p><p>　　其余4味藥參考文獻(xiàn)較多，在參照相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)后鑒別效果理想，苦參、蛇床子、白鮮皮、地膚子均獲得很好的分離效果，薄層斑點(diǎn)清晰，且陰性無干擾。</p><p>　　4.2 定量鑒別結(jié)果</p><

70、;p>　　4.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇</p><p>　　經(jīng)查詢2010版《中國(guó)藥典》和大量苦參堿含量測(cè)定的相關(guān)文獻(xiàn)，HPLC測(cè)定苦參堿含量時(shí)，所選用的波長(zhǎng)為220nm，測(cè)定表兒茶素時(shí)選用的波長(zhǎng)為280nm；王英晶在測(cè)量表兒茶素時(shí)，曾選用波長(zhǎng)230nm，本實(shí)驗(yàn)過程中，對(duì)比了230nm和280nm波長(zhǎng)下表兒茶素的峰值，在280nm下的效果較少，因此選用280nm作為表兒茶素的檢測(cè)波長(zhǎng)。</p>

71、<p>　　4.2.2 流動(dòng)相的選擇</p><p>　　經(jīng)查詢2010版《中國(guó)藥典》，苦參堿的測(cè)定是用氨基鍵合硅膠為填充劑，流動(dòng)相為乙腈-無水乙醇-3%磷酸溶液(80:10:10)；但本次使用的色譜柱為C18柱，用藥典的流動(dòng)相在C18柱子上測(cè)定時(shí)，出現(xiàn)色譜峰分離度不好，出峰時(shí)間早的問題。考慮到最終要測(cè)定復(fù)方軟膏中的兩種成分，所以嘗試摸索出一個(gè)流動(dòng)相能在不同波長(zhǎng)下測(cè)得兩種成分。經(jīng)摸索，選用王英晶測(cè)定表兒

72、茶素含量時(shí)的流動(dòng)相（甲醇-0.1%磷酸溶液）進(jìn)行梯度洗脫，苦參堿的出峰時(shí)間為10.02min左右，峰型較好，且分離度也高。所以最終選用此流動(dòng)相來測(cè)定軟膏中表兒茶素和苦參堿的含量。3.2.3 表兒茶素，苦參堿在同一液相色譜的條件下，經(jīng)考察，在范圍內(nèi)的線性關(guān)系都良好，r都大于0.9998，得到的精密度，重復(fù)性和穩(wěn)定性都很好，平均回收率在90%-110%之間，RSD分別為1.4%，1.5%。由此可得，以表兒茶素和苦參堿為指標(biāo)成分，可以很好的控

73、制本品軟膏質(zhì)量。</p><p><b>　　5 結(jié)論 </b></p><p>　　在本次實(shí)驗(yàn)中，所建立的高效液相色譜法，操作流程比較簡(jiǎn)單，測(cè)量的結(jié)果比較準(zhǔn)確且靈敏度較高，從而產(chǎn)品的質(zhì)量可以得到穩(wěn)定的控制，也為復(fù)方黑面神軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制提供一定的依據(jù)。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p>

74、<p>　　[1] 姚啟華．神礬散的制備與用法[J]．中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,1997,4(6):28．</p><p>　　[2] 劉仲霞,林紅,蘇偉東．四種抗菌洗液殺菌效果的比較[J]．中國(guó)消毒學(xué)雜志,</p><p>　　2009,26(2):149-150．</p><p>　　[3] 林挺,徐潔明．中藥洗劑治療嬰兒濕疹的療效觀察[J]．實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志

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76、<p>　　24(07)：618-622．</p><p>　　[6] Martine Morrison, Roel van der Heijden, Peter Heeringa, Eric Kaijzel, Lars</p><p>　　Verschuren, Rune Blomhoff, Teake Kooistra, Robert Kleemann．Epicatechin

77、</p><p>　　attenuates atherosclerosis and exerts anti-inflammatory effects on diet-induced</p><p>　　human-CRP and NFkB in vivo[J]．Atherosclerosis, 2014(233):149-156. </p><p>　　[7] 王

78、英晶,彭偉文,梅全喜．黑面神枝葉中表兒茶素的含量測(cè)定及水提工藝優(yōu)</p><p>　　化[J]．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014.20(9):93-96.</p><p>　　[8] 袁建平,呂艷,黃興富等．金芥麥配方顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[J]．中國(guó)藥師,2012，</p><p>　　15(5):643-644. </p><p>　　[9] 國(guó)家藥

79、典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版</p><p>　　社2010:296.</p><p>　　[10] 王春桃,符洪．白山片的薄層色譜鑒別方法研究[J]．中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2008,8</p><p>　　(6):1036-1037.</p><p>　　[11] 林以慈,何昭斌,孫虹等．歸芍止癢顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研

80、究[J]．中華中醫(yī)藥學(xué)刊,</p><p>　　2014,32(9):2182-2184.</p><p>　　[12] 蔣珍藕．苦參堿的提取工藝及測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J]．中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2005,</p><p>　　11(8):91-94.</p><p>　　[13] 袁倬斌,李向軍．毛細(xì)管電泳安培檢測(cè)法測(cè)定兒茶中的兒茶素,表兒茶素[J]

81、．</p><p>　　分析實(shí)驗(yàn)室,2003,22:109-113.</p><p>　　[14] 毛丹,陳鈳,王柯等．HPLC法測(cè)定苦參軟膏中苦參堿、槐定堿[J]．中成藥,</p><p>　　2011,33(9):1531-1534.</p><p>　　[15] 高劍鋒,易以木,邱娟．HPLC法測(cè)定復(fù)方兒茶軟膏中兒茶素和表兒茶素含量&l

82、t;/p><p>　　[J]．藥物分析雜志,2007,27(7):1105-1107.</p><p><b>　　綜 述</b></p><p>　　黑面神和苦參的研究進(jìn)展</p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏由君藥黑面神，臣藥苦參和佐藥蛇床子、白鮮皮和五味子五味中藥組成，是具有消炎止癢功效外用制劑，用于多種皮膚病的治療。

83、近年來，對(duì)黑面神和苦參的藥理作用和臨床應(yīng)用有較多的報(bào)道，為了給復(fù)方黑面神軟膏的進(jìn)一步開發(fā)利用提供一些科學(xué)依據(jù)和提高臨床用藥的準(zhǔn)確性，本文將對(duì)其復(fù)方中的君藥和臣藥的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展做一概述。</p><p><b>　　1 黑面神</b></p><p>　　黑面神為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥嫩枝

84、葉,又名青凡木，分布于廣東、廣西、海南 、福建、云南、浙江、貴州等地，為廣東常用地產(chǎn)藥材，具有活血解毒、清熱祛濕的功效。 主要用于濕疹，纏腰火丹，腹痛吐瀉，皮炎，漆瘡，產(chǎn)后乳汁不通，風(fēng)濕痹痛，陰癢等癥的治療[1]。</p><p><b>　　1.1 化學(xué)成分</b></p><p>　　相關(guān)文獻(xiàn)表明黑面神的葉子含有鞣質(zhì)、三萜和酚類，種子含有脂肪油。M.Ilyas[2

85、]首次在Breynia rhamnoides中檢測(cè)到含有植物甾醇，包括膽甾醇、萊子甾醇和豆甾醇等化合物。</p><p>　　浮光苗[3]對(duì)黑面神的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。通過化學(xué)方法和波譜學(xué)方法(MS、IR、UV等)鑒定了其中的16個(gè)化合物，分別是aviculin、木栓醇、無羈萜、5-羥基- 7，8，4-三甲氧基黃酮、表兒茶素等。另外，毛華麗[4]系統(tǒng)地對(duì)黑面神干燥地上部分進(jìn)行了的化學(xué)成分研究，分離鑒定了15

86、個(gè)化合物，其中包括熊果酸、咖啡酸、豆甾醇、香草醛、原兒茶醛、異佛爾酮等。</p><p><b>　　1.2 藥理作用</b></p><p>　　1.2.1 抗炎作用</p><p>　　根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，黑面神枝葉的水提物具有一定的抗炎作用。彭偉文等[5]通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)及腹腔注射醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高實(shí)驗(yàn)，并觀察黑面

87、神枝葉的水提物通過灌胃給藥對(duì)炎癥反應(yīng)的影響，結(jié)果數(shù)據(jù)表明黑面神的水提物高、低劑量組對(duì)二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹及由醋酸引起的組織毛細(xì)血管的通透性均具有極顯著的抑制作用，從而表明了黑面神的水提液具有明顯的抗急性炎癥的作用。另外，將在小鼠右耳正反兩側(cè)涂上黑面神枝葉的水提物，通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)，觀察黑面神外用給藥對(duì)炎癥反應(yīng)的影響。結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，黑面神高、低劑量組、皮炎平對(duì)照組與空白對(duì)照組比較，對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹度在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均具有顯

88、著性差異(P﹤0.01) ，表明黑面神的水提物外用給藥時(shí)對(duì)急性炎性腫脹具有明顯抑制作用，但不顯示劑量依賴性。 </p><p>　　1.2.2 抗病毒作用</p><p>　　孟正木等[6]研究雞血藤、赤芍、芡實(shí)、白背葉、何首烏、三加皮、腎蕨和青凡木等8種中草藥提取物對(duì)單純皰疹病毒1型、水皰性口炎病毒、流感病毒 A 型、腺病毒3型及艾滋病毒逆轉(zhuǎn)錄酶活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，青凡木( 黑面神) 對(duì)腺

89、病毒、水皰性口炎病毒顯示較低的CPIE，表明有強(qiáng)的抗病毒活性，但其細(xì)胞毒性大，ST≤1。</p><p>　　1.2.3 抑菌作用</p><p>　　有文獻(xiàn)報(bào)道[7]，將6只健康狗分為治療組和對(duì)照組，靜脈注入4億綠膿桿菌造成綠膿桿菌敗血癥。治療組每天每公斤體質(zhì)量靜脈注射24毫升5%黑面神注射液,7天為一個(gè)療程，對(duì)照組不予治療處理。實(shí)驗(yàn)期間每天抽血培養(yǎng)。結(jié)果顯示，治療組用藥后平均5~7天

90、細(xì)菌培養(yǎng)轉(zhuǎn)為陰性，對(duì)照組10天后抽血培養(yǎng)仍有綠膿桿菌生長(zhǎng)，表明黑面神有較好的抑菌作用。另?yè)?jù)報(bào)道[8]，1:1200黑面神的流浸膏稀釋液在試管內(nèi)對(duì)綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌和甲型鏈球菌均有很強(qiáng)的抑菌作用，可能與其所含鞣質(zhì)有關(guān)，還有待進(jìn)一步研究。</p><p>　　1.2.4 抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用</p><p>　　彭偉文等[9]給小鼠灌胃黑面神水提物，采用尾靜脈

91、注射低分子右旋糖酐誘發(fā)小鼠陣發(fā)性皮膚瘙癢，記錄小鼠30min內(nèi)的陣發(fā)性皮膚瘙癢發(fā)作次數(shù)及時(shí)間，以組胺使小鼠毛細(xì)血管通透性增高觀察藥物對(duì)通透性的影響，從而探討黑面神水提物抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用。結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，黑面神水提物各劑量組均能明顯抑制陣發(fā)性皮膚瘙癢發(fā)作次數(shù)，降低持續(xù)時(shí)間，顯著抑制小鼠毛細(xì)血管通透性，表明黑面神水提物可通過抑制組胺的釋放發(fā)揮抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用。</p><p><b>　　1.3

92、臨床應(yīng)用</b></p><p>　　祖國(guó)中醫(yī)藥對(duì)黑面神的臨床應(yīng)用有著一定的文字記載，其臨床應(yīng)用主要包括治療各類皮膚病、治療慢性支氣管炎、治療各類咬傷等。</p><p>　　《全國(guó)中草藥匯編》記載:“黑面葉( 鮮)30g,東風(fēng)橘、芒果葉各15g，紅糖9g。水煎服，每日1劑治療慢性支氣管炎?！爆F(xiàn)代臨床應(yīng)用中，黑面神合劑新復(fù)方[7]治療慢性氣管炎262例，服藥后在短期內(nèi)臨床癥狀緩

93、解迅速，療效穩(wěn)定，復(fù)發(fā)率低，是治療慢性氣管炎療效較好的方劑且沒有明顯副作用?！陡＝ㄋ幬镏尽酚涊d:“黑面神葉、百部各60g。水煎沖明礬適量，洗患處治漆過敏，濕疹?！毕嚓P(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，神礬散對(duì)于接觸性皮炎、皮膚瘙癢證、腳氣病、凍瘡、濕熱隱疹等癥有效，對(duì)于接觸漆或紅花油引起的皮膚過敏有特效[10]?！稄V西民間常用中草藥》載曰：“青凡木葉、黃糖各適量，搗爛，敷患處?！薄稁X南草藥志》載曰：“黑面神葉、蛇總管、黑骨走馬，搗爛取汁，再用洗米水將藥煎湯1小

94、碗，加入藥汁和服，藥渣外敷傷口周圍治蛇咬傷?！?lt;/p><p><b>　　2 苦參</b></p><p>　　苦參為豆科植物苦參SophoraflavescensAit.的干燥根。春、秋二季采挖，除去根頭和小支根，洗凈，干燥，或趁鮮切片，干燥。性味歸經(jīng)：苦，寒。歸心、大腸、胃、肝、膀胱經(jīng)。功能主治：清熱燥濕，殺蟲，利尿。用于便血，黃疸尿閉，熱痢，濕疹，濕瘡，皮膚瘙

95、癢，赤白帶下，陰腫陰癢，疥癬麻風(fēng)，外治滴蟲性陰道炎[11]。</p><p>　　2.1化學(xué)成分[12]</p><p>　　目前，研究表明苦參中分離經(jīng)鑒定的化學(xué)成分主要有兩大類：生物堿類,黃酮類化合物。</p><p>　　從苦參根、葉、莖和花中共分離出23種生物堿，大多數(shù)為喹嗪生物堿，主要有苦參堿、槐果堿、氧苦參堿、臭豆堿、槐安堿、槐定堿別苦參堿等。從苦參總黃酮

96、部分分離和鑒定了約60余個(gè)黃酮類化合物，其中苦參中的黃酮類化合物大多為二氫黃酮、二氫黃酮醇。顯示活性的主要有苦參酮、苦參醇、槐黃醇、苦參啶、高麗槐素、去甲苦參、苦參啶醇和黃腐酚等。從苦參中還分離出植物血凝素、揮發(fā)油、脂肪酸、大豆甾醇B、大黃酚、胞嘧啶、sophoradione等化學(xué)成分。</p><p><b>　　2.2藥理作用</b></p><p><b&

97、gt;　　2.2.1抗炎作用</b></p><p>　　譚元生等[13]研究發(fā)現(xiàn)復(fù)方苦參洗液對(duì)二甲苯和角叉菜膠所致的炎性腫脹具明顯抑制作用,并具有較好增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能和止癢作用。另外，劉瑋等[14]以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立模型 ,觀察以中藥苦參醇提液研制的女性護(hù)理液的抗炎、止癢作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)以苦參醇提液和三氯羥基二苯醚復(fù)配，其抗炎和止癢作用均接近地塞米松磷酸鈉注射液，間接表明苦參具有抗炎作用。焦霞等[15]建

98、立小鼠哮喘模型 ,觀察氧化苦參堿對(duì)哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中炎性細(xì)胞、肺組織病理的改變，檢測(cè)肺組織IL -4mRNA表達(dá)的變化，從而探討氧化苦參堿治療哮喘的抗炎作用機(jī)制及其對(duì)白細(xì)胞介素 -4 (IL -4mRNA )表達(dá)的影響。結(jié)果顯示氧化苦參堿可顯著減輕哮喘小鼠氣道及肺組織中嗜酸性細(xì)胞的浸潤(rùn) ,抑制哮喘小鼠肺組織中IL -4mRNA的表達(dá)水平。表明氧化苦參堿對(duì)哮喘小鼠有明顯的抗氣道變應(yīng)性炎癥及抑制IL -4mRNA表達(dá)的作用。

99、0;</p><p><b>　　2.2.2抗菌作用</b></p><p>　　根據(jù)國(guó)內(nèi)學(xué)者所做的的體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，苦參對(duì)多種病原體有抗菌抑菌作用。如今已知苦參堿、氧化苦參堿、三葉豆檀甙、槐定堿、高麗槐素是抗菌的活性成分?？鄥?duì)痢疾桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和乙型鏈球菌有明顯抑制作用。楊潔等[16]用中藥抑菌方法,對(duì)苦參提取物進(jìn)行208株表皮葡萄菌的最低

100、抑菌濃度(MIC)測(cè)定。結(jié)果顯示,苦參提取物對(duì)208株表皮葡萄球菌中的110株耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)和98株甲氧西林敏感表皮葡萄球(MSSE)的MIC90分別為1185μg/mL和286μg/mL,表明苦參提取物對(duì)208株表皮葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑菌作用。陳亞軍[17]用其治療慢性乙肝患者40例并與對(duì)照組40例療效進(jìn)行比較,結(jié)果HBeAg轉(zhuǎn)陰率為35%,HBV_DNA轉(zhuǎn)陰率為38%,明顯優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05),表明苦

101、參素具有良好的抗病毒作用。</p><p>　　2.2.3抗過敏作用</p><p>　　金四立等[18]采用被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)檢測(cè)血清IgE水平;間接空斑形成細(xì)胞法檢測(cè)抗體形成細(xì)胞;間接免疫熒光法檢測(cè)淋巴結(jié)TH/Ts比值。結(jié)果顯示苦參對(duì)小鼠血清IgE、抗體形成細(xì)胞及TH/Ts比值均無明顯影響。結(jié)果表明苦參具有抗過敏作用。</p><p><b>　　2.3

102、臨床應(yīng)用</b></p><p><b>　　2.3.1治療濕疹</b></p><p>　　目前國(guó)內(nèi)有學(xué)者對(duì)各型濕疹患者進(jìn)行了研究。徐國(guó)紅[19]分別給治療組和對(duì)照組注射主要含氧化苦參堿的苦參素注射液和葡萄糖酸鈣，結(jié)果表明苦參素注射液對(duì)各型濕疹均有明顯療效，對(duì)急性、亞急性患者尤為顯著，并且與對(duì)照組有顯著性差異。</p><p>

103、　　2.3.2治療肺結(jié)核</p><p>　　李云華等[20]對(duì)82例HBVM陽性肺結(jié)核患者分成治療組42例,在常規(guī)抗癆治療的同時(shí),給予苦參素膠囊200 mg,每日三次口服。對(duì)照組40例,只給予常規(guī)抗癆治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)照組肺結(jié)核患者在治療2、4個(gè)月時(shí)肝功能異常率和治療組相比有顯著性差異。結(jié)果表明苦參素對(duì)HBVM陽性肺結(jié)核患者的肝功能有明顯的保護(hù)作用。 </p><p>　　2.3

104、.3治療銀屑病</p><p>　　苦參堿有抗炎和調(diào)節(jié)免疫的作用，并且可以抑制角朊細(xì)胞的增殖，皮膚角朊細(xì)胞異常增殖和分化是銀屑病的主要病理特征。景衛(wèi)霞等[21]將138例尋常型銀屑病患者隨機(jī)分為阿維A組和聯(lián)合組。阿維A組60例,給予口服阿維A膠囊，聯(lián)合組78例,在阿維A組治療基礎(chǔ)上聯(lián)用苦參堿葡萄糖注射液，兩組療程均為8周。結(jié)果聯(lián)合組療效明顯優(yōu)于阿維A組(P<0.05),不良反應(yīng)率也明顯低于阿維A組(P<

105、;0.05),且不良反應(yīng)程度也較阿維A組輕。表明苦參堿葡萄糖注射液聯(lián)合阿維A膠囊治療尋常型銀屑病療效確切,較單用阿維A膠囊組可明顯提高療效,且降低不良反應(yīng)發(fā)生率和減輕不良反應(yīng)程度。 </p><p><b>　　3結(jié)語</b></p><p>　　近幾年，國(guó)內(nèi)外對(duì)苦參的研究開發(fā)十分活躍，雖然對(duì)黑面神藥理作用及臨床應(yīng)用的研究報(bào)道也日益增多但相比其他中藥還算很少

106、。黑面神為廣東地產(chǎn)藥材，資源豐富、應(yīng)用廣泛。在民間和臨床上廣泛運(yùn)用黑面神治療皮炎、濕疹等各類皮膚病，療效較好，具有較大的藥用研究?jī)r(jià)值。通過對(duì)黑面神和臣苦參的化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用等幾方面研究的概述，為初步研制出的治療皮膚病的外用新藥復(fù)方黑面神軟膏在臨床應(yīng)用上提供一些科學(xué)依據(jù)。今后可在目前研究的基礎(chǔ)上，不斷吸收現(xiàn)代科技成果和中醫(yī)藥理論的成果，利用黑面神研發(fā)更有效的劑型，使其更好服務(wù)于人。</p><p>&l

107、t;b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 《廣東中藥志》編輯委員會(huì),廣東中藥志(第一卷)[M]．廣州：廣東科技出版</p><p>　　社,1990:362.</p><p>　　[2] M.Ilyas, Ranijana Verma, Parveen Jarnal．Chemical investigation of the lea

108、ves of</p><p>　　Breynias rhamnoids[J]．Indian Chem, Soc.1978,LV.964.</p><p>　　[3] 浮光苗．狼毒類活性成分研究和黑面神資源化學(xué)研究[D]．南京：中國(guó)藥科大</p><p><b>　　學(xué)，2003.</b></p><p>　　[4] 毛華

109、麗．黑面神化學(xué)成分的分離及結(jié)構(gòu)鑒定[D]．浙江：浙江工業(yè)大學(xué)，2009.</p><p>　　[5] 彭偉文,譚泳怡,梅全喜,等．黑面神水提物抗炎作用實(shí)驗(yàn)研究[J]．今日藥學(xué),</p><p>　　2012,22(3):145-147.</p><p>　　[6] 孟正木．八種中草藥的抗病毒活性研究［J］．中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1995,26(1):</p>