河北民族師范學(xué)院畢業(yè)論文

1、<p><b>　　河北民族師范學(xué)院</b></p><p><b>　　畢業(yè)論文</b></p><p>　　論文題目：淺探不同培養(yǎng)液中固定化小球藻在的生長(zhǎng)情況</p><p><b>　　作 者：</b></p><p><b>　　指導(dǎo)教師：&l

2、t;/b></p><p><b>　　所在系部：</b></p><p><b>　　專 業(yè)：</b></p><p><b>　　年級(jí)班級(jí)：</b></p><p><b>　　完成時(shí)間：</b></p><p>&

3、lt;b>　　目 錄</b></p><p>　　題目．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4</p><p>　　中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4</p&

4、gt;<p>　　1藥品的配制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4</p><p>　　2固定化小球藻．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5</p><p>　　3固定化小球藻的培養(yǎng)．．．．．．．．．．．．．

5、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5</p><p>　　4固定化小球藻在不同營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中的生長(zhǎng)情況．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5</p><p>　　5實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5 </p&g

6、t;<p>　　(1)固定化小球藻在培養(yǎng)過程中PH的變化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5</p><p>　　(2)不同培養(yǎng)液對(duì)固定化小球藻生長(zhǎng)的影響．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6</p><p>　　(3)固定化小球藻在各培養(yǎng)液中葉綠素a和葉綠素b含量的變化．．．．．．．．．．．．．

7、．．．．．．．7</p><p>　　6固定化小球藻培養(yǎng)液中藻密度的測(cè)定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8</p><p>　　結(jié)論．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8</p><p>　　注釋．．．．．．．．．

8、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．</p><p>　　參考文獻(xiàn)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8</p><p>　　致謝．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

9、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9</p><p>　　淺探固定化小球藻在不同培養(yǎng)液中的生長(zhǎng)情況</p><p>　　摘 要： 用海藻酸鈉固定化小球藻，將經(jīng)固定化的小球藻分別放在不同培養(yǎng)液中，在陽光充足的地方進(jìn)行培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)液的顏色，渾濁度，定期測(cè)定培養(yǎng)液的PH值，藻密度，葉綠素含量等。通過對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比分析，確定在實(shí)驗(yàn)中的五種培養(yǎng)液中海藻肥培養(yǎng)液最適合

10、固定化小球藻的生長(zhǎng)。</p><p>　　關(guān)鍵詞： 固定化小球藻 不同培養(yǎng) 生長(zhǎng) 藻密度</p><p><b>　　前 言</b></p><p>　　小球藻（俗稱為綠藻）是五億四千年前就已經(jīng)在地球上繁衍的一種單細(xì)胞的綠色微藻類，不管是生態(tài)環(huán)境的巨變還是自然災(zāi)害的侵襲，都沒能毀滅它，其穩(wěn)定的基因始終沒有改變。生息在淡水中的小球藻被稱為“

11、罐裝的太陽”，含有豐富的葉綠體，它借助陽光，水和二氧化碳以每隔20小時(shí)分裂出四個(gè)細(xì)胞的旺盛繁殖能力，不停地將太陽能轉(zhuǎn)換成蘊(yùn)含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)成分的藻體，并在增值中釋放大量的氧，其光合能力高于其它植物十倍以上。小球藻的藻體細(xì)胞內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)，維生素，礦物質(zhì)，食物纖維，核酸及葉綠體等，其產(chǎn)品能全面提供給人類健康及疾病康復(fù)期間所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及微量元素，具有增強(qiáng)人體免疫力，防止病毒增殖，抑制癌細(xì)胞增殖抑制血糖上升，降低血清膽固醇含量，排除毒素，

12、迅速修復(fù)機(jī)體的損傷等功能，因此，小球藻是一種很好的天然營(yíng)養(yǎng)健康品，廣泛應(yīng)用于食品，醫(yī)療保健，美容等各個(gè)領(lǐng)域。</p><p>　　小球藻的培養(yǎng)方式主要是自養(yǎng)培養(yǎng)和異養(yǎng)培養(yǎng)。自養(yǎng)培養(yǎng)主要是指利用光能將無機(jī)碳轉(zhuǎn)化為有機(jī)碳水化合物的過程，光照可以采用太陽光或人工光源，無機(jī)碳源主要包括碳酸鹽或CO2，其最適培養(yǎng)溫度為25—35℃，最適PH 6.5—7.5，最適光照強(qiáng)度2000——50001ux,除此之外還需要在培

13、養(yǎng)基中提供氮源，磷源，鎂源和鐵及微量元素等。其異養(yǎng)培養(yǎng)即小球藻利用糖，有機(jī)酸和醇類等60多種有機(jī)碳源，由于更多的能量用于呼吸代謝，限制了細(xì)胞物質(zhì)的合成，但可以使小球藻的脂肪的含量明顯地增加，有利于其中脂類轉(zhuǎn)化生物柴油。</p><p>　　小球藻的固定化培養(yǎng)即將小球藻溶液與海藻酸鈉混合在純凈CaCl2溶液的作用下形成固體小球。此包埋制得的小球體有較好的機(jī)械性能和防破壞能力,而周圍營(yíng)養(yǎng)源可與其內(nèi)的藻體進(jìn)行正常接觸，

14、保證藻體正常生長(zhǎng)的需要。為了探討固定化小球藻的生長(zhǎng)條件，我們首先培養(yǎng)小球藻，進(jìn)行固定化，然后將其培養(yǎng)在不同的液體營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中，并定期對(duì)培養(yǎng)液的PH值，渾濁度，藻密度，吸光度等進(jìn)行檢測(cè)，便可將得到固定化小球藻在不同的環(huán)境條件下生長(zhǎng)情況及一系列生長(zhǎng)規(guī)律而為固定化小球藻的培養(yǎng)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。</p><p><b>　　1 藥品的配制</b></p><p>　　(1) 4%的

15、海藻酸鈉溶液200ml </p><p>　　(2) 5%的CaCl2溶液2000ml(分別裝在5個(gè)燒杯中，每個(gè)燒杯約250ml)</p><p>　　(3) 培養(yǎng)液的配制</p><p>　?、?1號(hào)  SE 溶液  （藥品加蒸餾水）</p><p>　?、?2號(hào) 土壤浸出液 用水浴加熱土壤浸出液大約70℃三十分鐘，二十

16、四小時(shí)后重復(fù)加熱一次，過濾浸出液。</p><p>　?、?號(hào) 硝酸鈉60mg/L,尿素1.8mg/L,磷酸二氫鉀2mg/L。</p><p>　?、?號(hào) 復(fù)合肥溶液 </p><p><b>　?、?號(hào) 海藻肥 </b></p><p>　　將配置好的溶液和實(shí)驗(yàn)用具放入高壓蒸汽滅菌過內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。</

17、p><p><b>　　2 固定化小球藻</b></p><p>　　(1)在超凈工作臺(tái)打開的情況下打開紫外燈對(duì)工作臺(tái)滅菌處理約20分鐘，并用沾有醫(yī)用酒精的棉球擦拭雙手和工作臺(tái)面（起滅菌效果）。</p><p>　　(2)將經(jīng)過滅菌處理過的海藻酸鈉溶液和CaCl2溶液取出，從錐形瓶中取出15ml海藻酸鈉溶液與綠藻溶液置于小燒杯中，用干凈的注射器抽取

18、混合溶液再放出，重復(fù)幾次此動(dòng)作使液體盡量充分地混合均勻，再將帶有針頭的注射器吸取大約5毫升的混合液，慢慢的一滴滴的滴向CaCl2溶液中，可看到有固體透明球體生成，重復(fù)此過程直到將混合液用盡。</p><p>　　(3)分別在五個(gè)燒杯中重復(fù)步驟（2）得到五組固定化小球藻 靜置大約2小時(shí)后分別向燒杯中加入無菌蒸餾水使其分別稀釋一倍，最后將大燒杯放入冰箱內(nèi)靜止過夜。</p><p>　　3 固定

19、化小球藻的培養(yǎng)</p><p>　　將經(jīng)過冰箱靜置的五組小球藻分別取出放入各個(gè)裝有滅菌過的培養(yǎng)液的錐形瓶?jī)?nèi)，蓋上牛皮紙放在陽光充足的陽臺(tái)上使其自然生長(zhǎng) 并定期對(duì)其生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察，對(duì)球體成分和培養(yǎng)液檢測(cè)。</p><p>　　4 固定化小球藻在不同營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中的生長(zhǎng)情況</p><p>　　(1)培養(yǎng)液的PH值檢測(cè) 定期用玻璃棒蘸取培養(yǎng)液，滴在PH試紙上檢測(cè)其PH值

20、。</p><p>　　(2)固定化小球藻的葉綠素含量 分別從五組實(shí)驗(yàn)中取固體小球0.2克，吸干水分放置試管內(nèi)用平頭玻璃棒將其搗碎，再分別向試管中加入95%的乙醇約5ml并用封口膜將試管封嚴(yán)，浸泡大約兩小時(shí)，取其上清液在分光光度計(jì)下測(cè)定其吸光度值（分別測(cè)定其在波長(zhǎng)為649nm和665nm處的吸光度值A(chǔ)649,A665）,以此來計(jì)算葉綠素a，葉綠素b和總的葉綠素含量（mg/L）{其中C葉綠素a =13.95A66

21、5-6.88A649 C葉綠素b=24.96A649-7.32A665 總?cè)~綠素濃度（mg/L）=C葉綠素a+ C葉綠素b}。</p><p>　　(3)培養(yǎng)液中的藻密度的測(cè)定 取一定量的培養(yǎng)液，測(cè)其在650nm處的光吸收值，即為其藻密度，表示培養(yǎng)液中的藻體數(shù)量的多少。</p><p>　　5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與分析 （根據(jù)下列四副圖中數(shù)據(jù)得出試驗(yàn)結(jié)果） &

22、lt;/p><p>　　(1)固定化小球藻在培養(yǎng)過程中PH的變化 根據(jù)試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果（圖1）可以得出：2，4號(hào)培養(yǎng)組中的培養(yǎng)液在不同培養(yǎng)時(shí)期其PH值的變化幅度較?。s0.1—0.2），1，3號(hào)培養(yǎng)組中的培養(yǎng)液在培養(yǎng)過程中其PH變化幅度較大約（0.5-0.6），5組中培養(yǎng)液的PH值保持不變而1，2，3，4組總體來看，在培養(yǎng)的中后期其PH值呈減小趨勢(shì)。由此分析可以得出5組的培養(yǎng)其化學(xué)穩(wěn)定性比前四種較好。</p>

23、;<p>　　圖1各培養(yǎng)組在不同培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)培養(yǎng)液的PH值</p><p>　　(2)不同培養(yǎng)液對(duì)固定化小球藻生長(zhǎng)的影響</p><p>　　觀察實(shí)驗(yàn)組中在培養(yǎng)過程中不同培養(yǎng)時(shí)期的總?cè)~綠素含量的變化可得：①在培養(yǎng)的初期第1，2，3，組中的單位質(zhì)量的小球藻中的總?cè)~綠素含量呈下降趨勢(shì)，而第1，5組中的葉綠素的含量呈現(xiàn)緩慢增加的趨勢(shì)。由此特點(diǎn)可以分析得到在固定化培養(yǎng)的初期，由于小球藻剛

24、轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)環(huán)境中，需要對(duì)新環(huán)境有一定時(shí)間的適應(yīng)，因此體內(nèi)的葉綠素的合成較緩慢。</p><p>　?、谠俦容^中后期的測(cè)定結(jié)果可得1，2，3，5組中的葉綠體含量呈增高趨勢(shì)而4組中的數(shù)值則呈減小趨勢(shì)，即在4組中其營(yíng)養(yǎng)液開始影響小球藻的葉綠素的合成而不適合其生長(zhǎng)。</p><p>　　③最后縱觀全圖分析，在整個(gè)的培養(yǎng)過程中5組的總?cè)~綠體含量自始至終呈不斷地增加的趨勢(shì)，且總含量增加迅速，明顯，因

25、此可分析的5組的培養(yǎng)其內(nèi)的藻體能較快的適應(yīng)周圍的新營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，且能較快的合成葉綠素，較適合藻體的生長(zhǎng)。</p><p>　　圖2 各培養(yǎng)組不同時(shí)長(zhǎng)單位質(zhì)量小球體中總?cè)~綠素的含量（mg/L）</p><p>　　(3)固定化小球藻在各培養(yǎng)液中葉綠素a和葉綠素b含量的變化</p><p>　　測(cè)定固定化小球藻在各培養(yǎng)液中葉綠素a和葉綠素b含量，結(jié)果見圖3，發(fā)現(xiàn)：①在培養(yǎng)

26、到中期的時(shí)候1，2，3組試驗(yàn)中的單位質(zhì)量的固定化小球其葉綠素a的含量小于葉綠素b的含量 ，4，5兩組試驗(yàn)中葉綠素b的含量小于葉綠素a的含量，則在此時(shí)小球藻體內(nèi)的葉綠素a的合成較葉綠素b的合成少，4，5組中葉綠素b的含量小于葉綠素a的含量，在5組中其相差量較大，即此時(shí)期內(nèi)的葉綠素b的合成速率遠(yuǎn)大于葉綠素a 的合成速率：②縱觀全圖可發(fā)現(xiàn)1，4，5中葉綠素a和葉綠素b 含量較大，其各個(gè)含量差別較明顯，2，3組中的含量小，差別較小。</p

27、><p>　　圖3 當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間在30天時(shí)各個(gè)培養(yǎng)組中的單位質(zhì)量的小球藻內(nèi)含的葉綠素a和葉綠素b的含量</p><p>　　表1各培養(yǎng)組不同時(shí)長(zhǎng)單位質(zhì)量小球體中葉綠素a的含量（mg/L）</p><p>　　表2 各培養(yǎng)組不同時(shí)長(zhǎng)單位質(zhì)量小球體中葉綠素b的含量（mg/L）</p><p>　　固定化小球藻培養(yǎng)液中藻密度的測(cè)定</p>

28、<p>　　取培養(yǎng)43天的固定化小球藻培養(yǎng)液，在650nm測(cè)定光吸收，結(jié)果見表5，培養(yǎng)液中的藻密度，第1，3，4號(hào)培養(yǎng)液的藻密度較大，第5號(hào)培養(yǎng)液中的藻密度較小，2號(hào)則最小。即在第1，3，4組中有大量的藻體從固體小球中逸出，穩(wěn)定性較差，而5號(hào)培養(yǎng)液最為穩(wěn)定。 </p><p>　　圖4 各培養(yǎng)組在培養(yǎng)43天后培養(yǎng)液中的藻密度</p><p><b>　　結(jié)

29、論</b></p><p>　　通過對(duì)以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析可以發(fā)現(xiàn)在2組培養(yǎng)中培養(yǎng)的固定化小球藻的生長(zhǎng)速度較慢，不適合其生長(zhǎng)；1組培養(yǎng)的固定化小球藻其PH變化幅度較大，化學(xué)穩(wěn)定性較低，而1，4組中會(huì)出現(xiàn)藻體的外逸而影響其穩(wěn)定培養(yǎng) ；3組中雖其球內(nèi)藻體能穩(wěn)定包裹，但隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加其葉綠素的合成速率大大減慢。5組中的小球藻能較快適應(yīng)此營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，大量，迅速合成葉綠素，且球體內(nèi)的藻體穩(wěn)定性較好，被穩(wěn)定

30、包裹，PH值較穩(wěn)定。因此綜合以上幾組圖像分析結(jié)果可以確定在此5種培養(yǎng)液中海藻肥溶液（即5號(hào)）是最適合于固定化小球藻的生長(zhǎng)培養(yǎng)的。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　劉建文.養(yǎng)生保健的全營(yíng)養(yǎng)素：小球藻.中國(guó)社會(huì)科學(xué)出版社.2008.1 【1】小球藻.彩羽漫天http://baike.baidu.

31、com/view/480332.htm 2010 .11 .12 【2】 </p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　在此論文撰寫過程中，要特別感謝我的導(dǎo)師李X老師的指導(dǎo)與督促，同時(shí)感謝她的諒解與包容。沒有李X老師的幫助也就沒有今天的這篇論文。求學(xué)與與實(shí)驗(yàn)研究歷程是

32、艱苦的，但又是快樂的，是美好的。感謝我的班主任彭XX老師，謝謝他在這三年中為我們?nèi)嗨龅囊磺校磺蠡貓?bào)，無私奉獻(xiàn)的精神我很欽佩，再次向她表示由衷的感謝。在這三年的學(xué)期中我所結(jié)識(shí)的各位生活和學(xué)習(xí)上的摯友讓我得到了人生最大的一筆財(cái)富。在此，也對(duì)他們表示衷心感謝。</p><p>　　謝謝我的父母，沒有他們辛勤的付出也就沒有我的今天，在這一刻，將最崇高的敬意獻(xiàn)給你們！</p><p>　　本