象山港不同營(yíng)養(yǎng)層次魚類攝食的脂肪酸生物標(biāo)志物分析【畢業(yè)設(shè)計(jì)】

1、<p><b>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)</b></p><p><b>　?。?0_ _屆）</b></p><p>　　象山港不同營(yíng)養(yǎng)層次魚類攝食的脂肪酸生物標(biāo)志物分析</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級(jí)

2、 海洋生物資源與環(huán)境 </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p>　　摘要：采用改進(jìn)Bligh-Dyer法，

3、提取鱸魚、半滑舌鰨、龍頭魚、帶魚、黃鯽、海鰻、黑鰓梅童魚、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚、棘頭梅童魚10種象山港不同營(yíng)養(yǎng)層魚類總脂，并進(jìn)行脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜定性定量分析。結(jié)果表明，象山港魚類含有豐富EPA和DHA，EPA含量最高的是鯔魚 （11.05%），最低的是帶魚 （4.40%）； DHA含量最高的為棘頭梅童魚 （28.90%），最低的為鯔魚（6.05%）。通過脂肪酸組成和脂肪酸生物標(biāo)志物的食物鏈溯源分析，基本確定這些魚類的源頭食物鏈。半滑

4、舌鰨、龍頭魚、黃鯽、海鰻、黑鰓梅童魚、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚食用細(xì)菌，10種魚類均食用藍(lán)細(xì)菌、鞭毛藻屬，黃鯽、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚食用陸源高等植物，龍頭魚、帶魚、黃鯽、黑鰓梅童魚食用浮游動(dòng)物；10種魚樣基本上不食用硅藻、綠藻、褐藻，鱸魚、半滑舌鰨、龍頭魚、帶魚、海鰻、黑鰓梅童魚、棘頭梅童魚不食用陸源高等植物，鱸魚、半滑舌鰨、海鰻、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚、棘頭梅童魚不食用浮游動(dòng)物。根據(jù)脂肪酸組成判斷鱸魚、半滑舌鰨、龍頭魚、黑鰓梅童魚、棘頭梅童魚具肉

5、食性；黃鯽、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚具雜食性；帶魚、海鰻具肉食-腐食性。</p><p>　　關(guān)鍵詞：象山港；脂肪酸；生物標(biāo)志；營(yíng)養(yǎng)層 </p><p>　　Abstract: The fatty acid composition of ten different trophic position fishes in Xiangshan Harbor (Lateolabrax japonicas

6、, Cynoglossus semilaevis, Harpodon nehereus, Trichiurus japonicus, Setipinnataty, Muraenesox cinereus, Collichthys niveatu, Mugil cephalus, Synechogobius omunaturus and Collichthys lucidus) were analyzed by means of GC/M

7、S. The result shows that the fishes in Xiangshan Harbor is abundant in EPA and DHA. Mugil cephalus has the highest content of EPA (11.05%), while Trichiurus jap</p><p>　　Key Words: Xiangshan Harbor; Fatty Ac

8、id; Biomarker; Trophic Position</p><p><b>　　目　錄</b></p><p><b>　　1引言1</b></p><p><b>　　2材料與方法1</b></p><p>　　2.1藥品與儀器1</p>

9、<p>　　2.2試驗(yàn)樣品1</p><p>　　2.3樣品分析1</p><p>　　2.4色譜質(zhì)譜條件1</p><p>　　2.5數(shù)據(jù)處理2</p><p>　　2.6脂肪酸生物標(biāo)志物判斷依據(jù)2</p><p><b>　　3結(jié)果3</b></p&g

10、t;<p><b>　　4討論4</b></p><p>　　4.1必需脂肪酸4</p><p>　　4.2脂肪酸標(biāo)志物判斷魚類攝食種類5</p><p>　　4.3以脂肪酸標(biāo)志物判斷魚類攝食食性7</p><p><b>　　5 展望8</b></p&g

11、t;<p>　　致謝錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)8</b></p><p><b>　　附錄</b></p><p><b>　　引言</b></p><p>　　食物聯(lián)系是海洋生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能的基本表達(dá)形式。因此，對(duì)海洋生態(tài)系

12、統(tǒng)的食物網(wǎng)營(yíng)養(yǎng)級(jí)的了解，有助于評(píng)估海洋中物質(zhì)和能量的流動(dòng)過程、海洋生物資源現(xiàn)狀。作為捕食者，魚類在生態(tài)環(huán)境中發(fā)揮重要作用，因此我們需要研究其食性，以此了解其營(yíng)養(yǎng)層次分布關(guān)系[]。</p><p>　　對(duì)象山港魚類食性的研究主要依賴傳統(tǒng)胃含物分析方法[]。但是這種方法存在一定的偶然性，因此往往需要大量的統(tǒng)計(jì)觀察才能消除這種偶然性；而且，它不能區(qū)分對(duì)所攝取食物消化吸收的難易程度，結(jié)果往往偏向于較難消化的食物；此外，對(duì)

13、消化道內(nèi)殘余物的觀察不確切，使得生物在食性確定上存在較大的困難[]。</p><p>　　在過去的二十年中，研究人員已經(jīng)建立利用脂肪酸作為生物標(biāo)志物調(diào)查海洋動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)關(guān)系與海洋生物分布模式[、、]的科學(xué)方法。由于海洋動(dòng)物的脂肪酸主要來自于所攝入的食物，同時(shí)脂肪酸在生物體內(nèi)的代謝過程中比較穩(wěn)定，經(jīng)生物消化吸收后基本結(jié)構(gòu)不變。因此它連接的脂肪酸是標(biāo)志其食物來源的重要標(biāo)志[]，這些脂肪酸從生態(tài)系統(tǒng)的低營(yíng)養(yǎng)級(jí)向高營(yíng)養(yǎng)級(jí)的傳

14、遞過程中，結(jié)構(gòu)基本保持不變，使其成為標(biāo)志生態(tài)系統(tǒng)不同營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間營(yíng)養(yǎng)關(guān)系的良好標(biāo)志物。本實(shí)驗(yàn)擬通過研究20種魚類的白肌脂肪酸組成狀況，探討其營(yíng)養(yǎng)層次關(guān)系。</p><p><b>　　材料與方法</b></p><p><b>　　藥品與儀器</b></p><p>　　QP2010氣相色譜-質(zhì)譜分析儀，AOC-20自動(dòng)進(jìn)樣

15、器（日本SHIMADZU公司），30mm×0.25×0.25μmSPB-50色譜柱（美國(guó)SUPELCO公司）；冷凍干燥機(jī)（美國(guó)LABCONCO公司）；國(guó)產(chǎn)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、超聲清洗機(jī)、漩渦混合儀、低速離心機(jī)、高速分散器、電子天平等。C19:0脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)溶液和14%BF3-CH3OH溶液（美國(guó)ALLTECH公司），色譜純正己烷（美國(guó)TEDIA公司），氯仿、甲醇、氫氧化鉀、鹽酸、正己烷、無水硫酸鈉均為國(guó)產(chǎn)分析純。</p&

16、gt;<p><b>　　試驗(yàn)樣品</b></p><p>　　魚樣2010年12月30日采自象山港海域，共20尾，10種，作兩個(gè)平行。分別如下：鱸魚（Lateolabrax japonicus）、半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）、龍頭魚（Harpodon nehereus）、帶魚（Trichiurus japonicus）、黃鯽（Setipinnata

17、ty）、海鰻（Muraenesox cinereus）、黑鰓梅童魚（Collichthys niveatus）、鯔魚（Mugil cephalus）、斑尾復(fù)鰕虎魚（Synechogobius omunaturus）、棘頭梅童魚（Collichthys lucidus）。取一定量白肌勻漿后，放在冷凍干燥機(jī)上徹底干燥后，-20℃溫度下冷凍保存。</p><p><b>　　樣品分析</b><

18、;/p><p>　　稱取1.0-2.0g左右的魚樣干品，參考改進(jìn)后的Bligh-Dyer法[]提取總脂，按文獻(xiàn)[]中方法將總脂皂化后進(jìn)行脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜定性定量分析。</p><p><b>　　色譜質(zhì)譜條件</b></p><p>　　GC條件： 進(jìn)樣口溫度250℃，載氣為純度為99.999%的高純氦，柱流速0.81 mL/min,柱前壓7

19、3.0 KPa,柱起始溫度150 ℃，保持3.5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，再以5 ℃/min升至280 ℃，保持37 min。分流進(jìn)樣1L，分流比50:1；</p><p>　　MS條件： 離子源選用電子轟擊（electron impact, EI）源，電子能量為70 eV，離子源溫度200 ℃，接口溫度250 ℃，選取全程離子碎片掃描（SCAN）模式，質(zhì)量掃描范圍為40~600，溶劑延遲3.5

20、 min。用化學(xué)電離（Chemical Ionization, CI）源分析時(shí)，反應(yīng)氣為甲烷。</p><p><b>　　數(shù)據(jù)處理</b></p><p>　　在上述分析條件下，每一脂肪酸組分都有各自保留時(shí)間，此保留時(shí)間即為定性依據(jù)之一。從GC-CIMS-TIC圖中各組分的質(zhì)譜，可以初步確定出各組分的分子量；再根據(jù)GC-EIMS-TIC中各組分的離子碎片質(zhì)量譜圖，通

21、過NIST庫并參考脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)譜圖可以定性出所有的脂肪酸。取同種魚樣的兩個(gè)樣品均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。</p><p>　　脂肪酸生物標(biāo)志物判斷依據(jù)</p><p>　　得到魚樣的脂肪酸組成成分后，本文根據(jù)表1來判斷各脂肪酸所指示的食物來源進(jìn)行分析。</p><p>　　表1 用于表征不同食物來源的生物標(biāo)志物脂肪酸及脂肪酸比值</p><p>　　

22、Tab. 1 Fatty acid biomarkers to indicate the food resources in marine system</p><p><b>　　結(jié)果</b></p><p>　　根據(jù)氣相色譜質(zhì)譜總離子圖中各組分的例子碎片質(zhì)量譜圖，通過Nist和Wiley庫檢索并參考脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)，從10種魚中共鑒定出41種脂肪酸（表2）。其中，飽和脂

23、肪酸（SFA）有17種，單不飽和脂肪酸（MUFA）9種，多不飽和脂肪酸（PUFA）15種。十種魚的綜合結(jié)果是：SFA占總脂肪酸的35.22-44.12%，MUFA占15.22-36.19%，PUFA占22.74-41.28%，EPA占4.40-8.06%，DHA占5.16-11.05%。SFA中，含量最多的均為C16:0，占總量的20%以上，C18:0占第二位，其次是C14:0，其他飽和脂肪酸的含量都很低；MUFA中含量最高的是C18:

24、1(n-7)，占總量的8.38-25.32%，其次是C16:1(n-7)和C18:1(n-8)；PUFA中含量最高的是DHA，其次是EPA，C20:4(n-6)等。十種魚類EPA含量均低于DHA。EPA含量最高的是鯔魚（11.05%），最低的是帶魚（4.40%）；DHA含量最高的為棘頭梅童魚（28.90%），最低的為鯔魚（6.05%）。</p><p>　　從表2中可以看出，UFA%均大于SFA%，與舟山漁場(chǎng)、長(zhǎng)

25、江口毗鄰海域所采集的魚類樣本脂肪酸定性定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致[4、]。鱸魚、半滑舌鰨、黃鯽、斑尾復(fù)鰕虎魚和棘頭梅童魚的PUFA大于MUFA，而剩余五種魚的PUFA小于MUFA。10種魚脂肪酸∑n-3/∑n-6的比值均大于3，帶魚與棘頭梅童魚的∑n-3/∑n-6的比值達(dá)到7-9，說明其高活動(dòng)性[]。</p><p>　　表2 象山港主要魚種類的脂肪酸組成</p><p>　　Tab. 2 Fatt

26、y acid composition of ten different trophic level fishes from Xiangshan Harbor</p><p><b>　　續(xù)表2</b></p><p>　　注：a 在本文中，脂肪酸命名采用類似12-M-C15:0格式，其中“12”代表在遠(yuǎn)離羧基的甲基算起的第12個(gè)碳原子上帶有一個(gè)甲基；</p>

27、;<p>　　b 在本文中脂肪酸命名采取類似2-hexyl-C17:0格式，其中“2”代表在遠(yuǎn)離羧基的甲基算起的第2個(gè)碳原子上帶有一個(gè)己基；</p><p>　　c 在本文中脂肪酸命名采取類似3,7,11,15-tetramethyl-C20:0格式，表示在遠(yuǎn)離羧基的甲基算起的第3、7、11、15個(gè)碳原子上各有一個(gè)甲基。</p><p><b>　　討論</b

28、></p><p><b>　　必需脂肪酸</b></p><p>　　金頭鯛（Sparus aurata）饑餓時(shí)體內(nèi)總脂、中性脂和極性脂中不同脂肪酸減少量由多到少依次為n-6>n-9>n-3，而攝食魚體內(nèi)滯留的脂肪酸量由多到少則為n-3>n-9>n-6[]。C20:5(n-3)(EPA)和C22:6(n-3)(DHA)等n-3系列多不飽

29、和脂肪酸是海水魚類的必須脂肪酸[、、]。因?yàn)榇蠖鄶?shù)海水魚類體內(nèi)不存在C20Δ5延長(zhǎng)酶和去飽和酶，所以不能將亞麻酸和亞油酸等短鏈脂肪酸延長(zhǎng)，也不能去飽和生成EPA與DHA。</p><p>　　海水魚n-3系列PUFA中含量最高的為DHA，其次是EPA。其中鱸魚、半滑舌鰨、黃鯽、海鰻、黑鰓梅童魚、斑尾復(fù)鰕虎魚、棘頭梅童魚的DHA含量均達(dá)到15%以上。EPA的含量為3.52-15.84%，其中以斑尾復(fù)鰕虎魚最高，均達(dá)

30、到8%以上。由此可見，象山港魚類含有豐富的EPA和DHA。</p><p>　　n-3脂肪酸為EPA和DHA的統(tǒng)稱，是細(xì)胞和組織的組成成分，參與代謝，調(diào)節(jié)生理機(jī)能。n-3脂肪酸能有效幫助降低膽固醇和甘油三酯的含量[]，促進(jìn)人體內(nèi)飽和脂肪酸代謝，從而起到降低血液粘稠度，增進(jìn)血液循環(huán)，提高組織供氧而消除疲勞。防止脂肪在血管壁沉積，預(yù)防各類心血管疾病，包括腦血栓、腦溢血和高血壓等。除此之外，還有報(bào)道指出，使用魚油會(huì)改變

31、血小板的脂質(zhì)組成和功能，使其富含n-3脂肪酸，延長(zhǎng)出血時(shí)間[]。魚類中富含必須氨基酸，無疑是老幼皆宜的保健佳品。</p><p>　　脂肪酸標(biāo)志物判斷魚類攝食種類</p><p>　　生物脂肪酸成分由食物鏈位置決定，并受各種生物的營(yíng)養(yǎng)關(guān)系影響，故為有效的營(yíng)養(yǎng)生物標(biāo)志（Trophic Biomarker）。Sargent[]指出，由于海水類PUFA在新陳代謝中存在競(jìng)爭(zhēng)性相互作用，因此要總體考

32、慮其自身組織中3種基本脂肪酸（EPA、DHA、AA）之間的比例。一般來說，首先，以細(xì)菌來源為主的脂肪酸其分布特征為碳數(shù)范圍在C8:0-C11:0飽和脂肪酸，主峰碳數(shù)為C9，在色譜圖上以獨(dú)立的峰群出現(xiàn)；其次，浮游生物和細(xì)菌有機(jī)質(zhì)來源為主的脂肪酸有高含量的C12:0-C20:0短鏈飽和脂肪酸[]；另外，C22:0-C34:0來自高等植物。因此脂肪酸的組成可以作為很好的物源輸入指示物。表3列舉了主要用于食物網(wǎng)研究的脂肪酸標(biāo)志物及脂肪酸比值。通

33、過比對(duì)某種魚類的脂肪酸含量組成差異，可以追蹤物質(zhì)在食物網(wǎng)中的傳遞路徑，從而確定其攝食情況，了解其在海洋食物網(wǎng)中的位置。</p><p>　　脂肪酸標(biāo)志發(fā)展30年左右，其中細(xì)菌標(biāo)志尤為被科學(xué)家接受[]。細(xì)菌含有的脂肪酸種類比高等動(dòng)、植物少得多。細(xì)菌脂肪酸的碳原子數(shù)目和高等動(dòng)、植物脂肪酸的碳原子數(shù)目相似，也在12-18個(gè)碳原子之間，但是細(xì)菌中絕大多數(shù)的脂肪酸為飽和脂肪酸，且部分脂肪酸還帶有分支的甲基。不飽和脂肪酸只帶

34、有一個(gè)雙鍵[]。細(xì)菌標(biāo)志物為奇數(shù)C的脂肪酸和脂肪酸分支[]，它們是細(xì)菌細(xì)胞膜的常見脂肪酸。但是，目前存在一些相悖的理論認(rèn)為這些標(biāo)志物對(duì)于指示細(xì)菌的存在無效，也正因?yàn)檫@樣，我們?cè)诓捎眉?xì)菌的脂肪酸標(biāo)志物時(shí)應(yīng)該更加謹(jǐn)慎。比如說，Harvey和Macko[]未發(fā)現(xiàn)來自細(xì)菌的脂肪酸與細(xì)菌碳數(shù)存在相關(guān)性，他們指出細(xì)菌脂肪酸只能用來作為一種量化的工具來衡量細(xì)菌所作出的貢獻(xiàn)值。Wakeham[]也指出海洋中的常見細(xì)菌脂肪酸與浮游生物脂肪酸成分不同，所以

35、細(xì)菌的貢獻(xiàn)不易察覺?；谶@些爭(zhēng)論，細(xì)菌脂肪酸只能用來衡量在一個(gè)研究中細(xì)菌脂肪酸所占的比例與其他樣品的相對(duì)值。</p><p>　　為了量化考慮，本文采用分支的脂肪酸和不分支的奇數(shù)碳脂肪酸貢獻(xiàn)值大于1.5%作為細(xì)菌脂肪酸存在的標(biāo)志的方法[10]。本試驗(yàn)中，此類脂肪酸包括C15:0、12-M-C15:0、15-M-C17:0、7-M-C17:1(n-11)、C17:0、2-hexyl-C17:0、10-M-C19:0

36、、17-M-C19:0和3,7,11,15-tetramethyl-C20:0。</p><p>　　本文所研究的魚樣中（表3），半滑舌鰨、龍頭魚、黃鯽、海鰻、黑鰓梅童魚、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚中此類標(biāo)志物的含量大于1.5%。細(xì)菌提供食物主要通過腐爛的有機(jī)物及其生物體；反之，低細(xì)菌脂肪酸含量表明魚類偏向攝食新鮮餌料。海鰻的標(biāo)志脂肪酸含量最高（表3），說明海鰻部分脂肪酸來自細(xì)菌，且具較高腐食性。唐逸民對(duì)浙江近海海鰻的食

37、性研究指出，海鰻是一種兇猛、食量大、攝食品種廣的魚類，食性組成主要取決于海區(qū)餌料生物品種及其容易獲取程度，我們可以推測(cè)海鰻可能食用一定的腐爛有機(jī)物及其生物體，或可食用腐爛有機(jī)或生物體為食的生物。除此之外，黃鯽與鯔魚的食性還需要更多的樣本量來評(píng)估脂肪酸中是否含有細(xì)菌脂肪酸，因此來判斷是否具有腐食性。</p><p>　　表3 魚樣脂肪酸標(biāo)志物判斷</p><p>　　Tab. 3 Analy

38、sis of fatty acid composition</p><p>　　藍(lán)細(xì)菌脂肪酸的標(biāo)志物為高含量的C16:0和C16:1(n-7)，一些C18:1(n-9)、C18:2(n-6)、C18:3(n-6)、C18:3(n-3)和長(zhǎng)鏈脂肪酸。長(zhǎng)鏈脂肪酸可能來自陸源性高等植物；18:1(n-9)可由C18:0去飽和得到。通過判斷其含有豐富C16:0和C16:1(n-7)，可以確定本文所涉及到的10種魚類脂肪酸

39、中均含有藍(lán)細(xì)菌脂肪酸。</p><p>　　Dalsgarrd等[]認(rèn)為特定的脂肪酸組成可以認(rèn)為海洋生態(tài)系統(tǒng)中硅藻的標(biāo)志物，尤其是C16:1(n-7)/C16:0和∑n-3/∑n-6比值與來自硅藻的脂肪酸含量呈正相關(guān)，另外EPA含量、EPA/DHA比值，C20脂肪酸也都與其相關(guān)，而且硅藻所含的脂肪酸衍生出的脂肪酸含量與C18脂肪酸負(fù)相關(guān)。20個(gè)魚白肌樣品中均含有C20:5n-3，但是所有魚樣中脂肪酸C16:1/C

40、16:0都小于1.6（見表3），∑16/∑18小于1.6，魚白肌樣品EPA/DHA都小于1。C18作為鞭毛藻的脂肪酸標(biāo)志物，含量直接指示鞭毛藻在其食物鏈中的作用。并且，鞭毛藻在食物鏈中越重要，DHA的含量也越高。因此，出現(xiàn)∑16/∑18小于1.6，EPA/DHA小于1的情況，我們不能排除鞭毛藻的影響。另外，高含量的C16:0和C16:1(n-7)是藍(lán)細(xì)菌脂肪酸的生物指示物，C16:0是綠藻生物指示物，所以兩者的比值也受到了干擾。然而除此

41、之外，16:4(n-1)是硅藻重要的脂肪酸標(biāo)志物，因?yàn)檫@是硅藻中常見的脂肪酸，卻在其它浮游植物中很少存在。要想確定魚樣脂肪酸中是否含有硅藻脂肪酸就需要做進(jìn)一步的測(cè)定，并且還需了解象山港的赤</p><p>　　鞭毛藻屬的生物標(biāo)志物包括DHA、C18（特別是C18:2(n-6)）和C22PUFA，并作為C18:1(n-9)的潛在來源。由于所有樣品中都存在DHA、C18:1(n-9)且EPA/DHA小于1，我們可以初

42、步判斷這10種魚類的脂肪酸中有一部分來自鞭毛藻屬。</p><p>　　綠藻的脂肪酸標(biāo)志物指示其含有豐富C16:0，高含量C16PUFA和低含量的C18PUFA。表2顯示，20個(gè)脂肪酸標(biāo)本均含有大量C16:0，但是C16:0同時(shí)也作為藍(lán)細(xì)菌脂肪酸的標(biāo)志物，不能作為衡量的唯一標(biāo)準(zhǔn)。樣本不含高含量的C16PUFA，且C18PUFA也達(dá)到13.05-29.93%（表3），所以要判斷其是否含有綠藻脂肪酸還需要做進(jìn)一步的同

43、位素方法進(jìn)行比較。</p><p>　　褐藻的標(biāo)志脂肪酸為C18:1(n-9)，它可由C16:0延長(zhǎng)形成C18:0去飽和后形成。本文所研究的所以樣品中都含有C18:1(n-9)，但是要想做進(jìn)一步確定是否含有褐藻脂肪酸還需要深入實(shí)驗(yàn)。</p><p>　　紅藻中所含的大量EPA使其標(biāo)志為20:5(n-3)/20:4(n-6)>10，本文魚樣EPA/DHA比例為0.20-1.83%，均不

44、符合紅藻標(biāo)志的標(biāo)準(zhǔn)。我們不能否定硅藻、鞭毛藻的干擾，但從數(shù)據(jù)來看，我們可以基本排除紅藻脂肪酸的貢獻(xiàn)。只有進(jìn)一步的同位素實(shí)驗(yàn)才能確定是否含紅藻脂肪酸。</p><p>　　在研究海洋生態(tài)環(huán)境時(shí)，我們總是傾向于確定陸生植物的貢獻(xiàn)值。長(zhǎng)鏈脂肪酸通常被用來作為陸生植物的標(biāo)志物[、]，但是長(zhǎng)鏈脂肪酸作為標(biāo)志物有局限性，因?yàn)樵谧畲鬁囟确秶鷥?nèi)這些脂肪酸很難從極性柱上洗脫下來。我們只能采用在大多數(shù)陸生植物中含量較高的脂肪酸18:

45、2(n-6)與18:3(n-3)作為陸生的標(biāo)志，并且我們規(guī)定只有標(biāo)志物含量大于2.5%時(shí)，才承認(rèn)陸生植物脂肪酸的貢獻(xiàn)[10]。本文10種魚樣脂肪酸樣品中黃鯽、鯔魚和斑尾復(fù)鰕虎魚符合標(biāo)準(zhǔn)，可初步確定陸生植物對(duì)其脂肪酸的貢獻(xiàn)。</p><p>　　浮游動(dòng)物攝食是高營(yíng)養(yǎng)級(jí)與低營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的重要聯(lián)系，脂肪酸標(biāo)志物也可用來確定浮游動(dòng)物來源對(duì)某種魚來說的重要性。一般來說，植食性和雜食性的浮游動(dòng)物攝食大量長(zhǎng)鏈并帶有蜜蠟脂部分的M

46、UFA[、、]，所以脂肪酸20:1和22:1可以作為浮游動(dòng)物脂肪酸的標(biāo)志物。龍頭魚中既含20:1(n-9)又含有22:1(n-9)，可以確定浮游動(dòng)物的貢獻(xiàn)；帶魚、黃鯽、黑鰓梅童魚、斑尾復(fù)鰕虎魚含有22:1(n-9)，基本上可以確定浮游動(dòng)物脂肪酸的影響，但仍需進(jìn)一步同位素實(shí)驗(yàn)排除干擾。</p><p>　　綜上所述，我們得到分析結(jié)果?？梢曰旧洗_定該種脂肪酸對(duì)魚樣的貢獻(xiàn)的有：半滑舌鰨、龍頭魚、黃鯽、海鰻、黑鰓梅童魚

47、、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚食用細(xì)菌；10種魚類均食用藍(lán)細(xì)菌、鞭毛藻屬；黃鯽、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚食用陸源高等植物；龍頭魚、帶魚、黃鯽、黑鰓梅童魚食用浮游動(dòng)物。通過本文分析可以基本排除魚樣中含有該種脂肪酸的有：10種魚樣基本上不食用硅藻屬、綠藻、褐藻；鱸魚、半滑舌鰨、龍頭魚、帶魚、海鰻、黑鰓梅童魚、棘頭梅童魚不食用陸源高等植物；鱸魚、半滑舌鰨、海鰻、鯔魚、斑尾復(fù)鰕虎魚、棘頭梅童魚不食用浮游動(dòng)物；剩余的脂肪酸分析不明確，可能存在其他脂肪酸的干擾，需

48、要進(jìn)行下一步同位素分析實(shí)驗(yàn)：鱸魚、棘頭梅童魚的是否食用細(xì)菌；10種魚樣是否食用紅藻。</p><p>　　以脂肪酸標(biāo)志物判斷魚類攝食食性</p><p>　　食性的一個(gè)標(biāo)志為PUFA/SFA，但是不同生物PUFA/SFA比例的受很多因素影響，如生活環(huán)境、食物來源[]。有報(bào)道指出在變溫動(dòng)物中，隨著溫度下降生物體內(nèi)的脂肪酸不飽和程度上升[、、]以補(bǔ)償細(xì)胞膜流動(dòng)性和滲透性[]。另一方面，低PUF

49、A/SFA還與高C16:0含量有關(guān)，說明食物中可能含有植物碎屑[]?？傊?，PUFA/SFA比例受多種限制，其應(yīng)用范圍沒有18:1(n-9)/18:1(n-7)可靠。</p><p>　　18:1(n-9)/18:1(n-7)可以指示不同水生生物的肉食性行為。18:1(n-9)由前體C18:0通過Δ9去飽和形成；18:1(n-7)由主要來自浮游植物的C16:1(n-7)延長(zhǎng)產(chǎn)生，所以18:1(n-7)的含量越高，浮

50、游植物或者固著植物在食物來源方面占的比重越大。[、]反之，比例增大說明動(dòng)物食物來源比重來源增大，高比例表明腐食性。因此，這兩個(gè)指示者就反應(yīng)了生物的食性——植食性、肉食性、雜食性、腐食性。另外根據(jù)魚類攝食種類的判斷，我們比較了本文中魚類的食性。由于黃鯽和海鰻體內(nèi)未測(cè)得18:1(n-7)，本文中我們比較了除黃鯽和海鰻之外8種魚類的食性。</p><p>　　18:1(n-9)/18:1(n-7)比例基本上隨著生物攝食

51、中植物來源比例的下降而上升（表4）。</p><p><b>　　表4 魚樣食性判斷</b></p><p>　　Tab. 4 18:1(n-9)/18:1(n-7) ratio in marine species differentiated by their feeding mode</p><p><b>　　5 展望&l

52、t;/b></p><p>　　脂肪酸可作為營(yíng)養(yǎng)傳遞的標(biāo)志物研究生物之間的攝食關(guān)系，因?yàn)楦∮沃参锖透∮蝿?dòng)物具有不同的脂肪酸組成，而且浮游動(dòng)物的脂肪酸組成主要由其攝食餌料的脂肪酸特征決定。對(duì)于食性比較簡(jiǎn)單的魚類來說，脂肪酸的指示能力較好。但是對(duì)于高營(yíng)養(yǎng)級(jí)魚類來說，由于餌料來源的復(fù)雜性和多樣性使得脂肪酸組成判斷攝食等級(jí)的能力相對(duì)較差。所以到目前為止，脂肪酸指示物的方法還無法對(duì)營(yíng)養(yǎng)級(jí)進(jìn)行定量評(píng)估。</p&g

53、t;<p>　　脂肪酸生物指示物工作主要還集中在討論以下幾方面：首先，海洋浮游植物的脂肪酸組成差異主要來自種類差異，但是也受環(huán)境因素影響。其次，海洋動(dòng)物不同發(fā)育階段對(duì)脂肪酸需求不同，脂肪酸組成受性別和生長(zhǎng)時(shí)期影響。最后，赤潮影響細(xì)胞的脂肪酸組成，尤其是不飽和脂肪酸[]。因此，需建立赤潮與脂肪酸組成變化的關(guān)系模型以便更好利用脂肪酸生物指示物研究食物來源。</p><p>　　利用脂肪酸分析魚類食性可有