連作花生紅壤微生物多樣性的研究及微生物制劑對連作花生的影響.pdf

1、花生是南方低丘紅壤區(qū)的主要油料作物和經濟作物,連作使花生單產、總產及其產投比在2-5年內均呈下降趨勢。研究者從不同角度對作物連作的障礙原因進行了分析,多數學者分析認為連作后的土壤微生物區(qū)系變化是引起作物減產的主要原因。本文通過非培養(yǎng)的方法直接從土壤中提取總DNA,用細菌通用引物擴增16S rEINA V3區(qū),用真菌引物擴增18s rDNA,通過DGGE技術分析土壤樣品中的微生物群落結構;利用培養(yǎng)方法從土壤中分離芽孢桿菌,用細菌通用引物擴

2、增16S rDNA,HhaI和XspI聯合酶切,通過RFLP技術分析土壤樣品中的芽孢桿菌群落多樣性.
　　 從細菌DGGE結果發(fā)現:花生連作土壤樣品的條帶數較多,細菌種類均比較豐富;經切膠回收、TA克隆測序后發(fā)現3個土壤樣品的代表類型是芽孢桿菌。然而真菌DGGE結果顯示:花生連作土壤樣品的條帶數都不多,在所有的土壤樣品中真菌種類均不豐富,測序后發(fā)現霉菌普遍存在于連作土壤中。3個連作小區(qū)土樣的微生物群落間具有較高的相似度。

3、　　 枯草芽孢桿菌是目前研究報道較多的一類芽孢桿菌,廣泛存在于壤、湖泊、海洋和動植物的體表,由于其無致病性,并可以分泌多種酶和抗生素,而且還具有良好的發(fā)酵基礎,所以用途十分廣泛。通過培養(yǎng)法對芽孢桿菌計數結果顯示,花生連作土壤芽孢桿菌較豐富,數量從2.00×105～2.25×105cfu/g干土。通過對3個土樣中的芽孢桿菌進行了16S rDNA的PCR-RFLP分析,獲得9個OTUs。多樣性指數分析表明,PCC1的OTUs多樣性最高,P

4、CC3次之,PCC2多樣性最低。16S rDNA測序結果表明花生連作土壤中芽孢桿菌的優(yōu)勢類型有短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、高地芽孢桿菌,分別占總克隆的54％、12%和14%。
　　 為了探索解除花生連作障礙的方法,本試驗對花生連作地進行不同微生物菌劑的施用,觀察不同處理間對花生生育性狀和產量的影響。結果表明,微生物菌劑均能一定程度上增加作物的產量,本試驗分離得來的枯草芽孢桿菌與光合細菌聯合施用的效果最好,比對照提高了32.14%