abo血型鑒定 ppt課件

1、項(xiàng)目二 血型與輸血,任務(wù)一 ABO血型鑒定,第一節(jié) 人類血型,一、血型的概念血型是血液成分的一種遺傳多態(tài)性，是產(chǎn)生抗原抗體的遺傳性狀。二、血型的種類：1、紅細(xì)胞血型: 2、白細(xì)胞血型: HLA抗原,又稱為移植抗原3、血小板血型:,ABO血型系統(tǒng) Rh血型系統(tǒng),三：血型研究的用途①輸血②器官移植 ③新生兒溶血?、苡H子鑒定、法醫(yī)學(xué)等,第二節(jié) ABO血型,一、ABO血型分型

2、 ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面是否含有A、B抗原來分型的。二、ABO血型抗原與血型物質(zhì) A、B、H 抗原1、 血型物質(zhì)：每個(gè)個(gè)體所專有的血型抗原物質(zhì)被稱為血型物質(zhì).2、分泌型與非分泌型 腦脊液中不含血型物質(zhì),,3、測定血型物質(zhì)的臨床意義：①輔助測定ABO血型；②鑒定抗體的性質(zhì)：可中和天然抗體③制備混合血漿④檢查羊水中的血型物質(zhì)，可用于預(yù)測胎兒的ABO血型。,三、ABO血型抗體（一）天然抗體（二）免疫抗

3、體,IgM,IgG,天然抗體與免疫抗體的鑒別,無察覺 有抗原刺激（妊娠、輸血）,大 小,4-25℃ 37℃,易被血型物質(zhì)中和 大多不能被血型物質(zhì)中和,不能

4、 能,鹽水介質(zhì) 酶、抗人球蛋白等,IgM,IgG,四、ABO血型的亞型亞型：屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點(diǎn)數(shù)不盡相同的情況A型 ：A1 A1和A抗原，血清中含有抗B抗體A2 只有A抗原，血清中含抗B和抗A1抗體,五、ABO血型的遺傳A和B為顯性基因，O為隱性基因舉例： A B

5、 AO BO,,,AB,,,AO,,,BO,,,OO,任務(wù)一（第三節(jié)）ABO血型鑒定,一、標(biāo)本的采集檸檬酸鈉抗凝劑二、紅細(xì)胞懸液的配制1、洗滌：2、配制2％～5％的紅細(xì)胞懸液5％紅細(xì)胞懸液＝比容紅細(xì)胞1滴＋生理鹽水1ml2％紅細(xì)胞懸液＝比容紅細(xì)胞1滴＋生理鹽水2ml,三、標(biāo)準(zhǔn)血清要求 1、特異性 2、效價(jià) 3、親和力 4、不含冷凝集素 5、不含補(bǔ)體，無任何污染

6、四、標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液的制備,五、ABO血型鑒定方法正定型：反定型：（一）試管法：（二）玻片法；,用已知抗A、抗B和抗A＋B分型血清來測定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A、B抗原,：,用已知A抗原和B抗原紅細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗A、抗B抗體。,,,（三）注意事項(xiàng)1、嚴(yán)格查對2、操作方法應(yīng)按規(guī)定先加血清，再加紅細(xì)胞懸液，3、試驗(yàn)用器材應(yīng)清潔干燥4、玻片法勿將干涸的紅細(xì)胞聚集誤認(rèn)為凝集5、反定型一般不宜采用玻片法6、試管

7、法離心后應(yīng)先觀察上清有無溶血,對于工作人員1%的錯(cuò)誤，病人就是100%的誤診！！,,,,,,,,,,,,,,前身物質(zhì)(oh),經(jīng)H基因作用,H抗原,,,,經(jīng)A基因作用,,,A抗原,,經(jīng)B基因作用,,,,B抗原,,（一）試管法 1、正定型 取10mm×60mm試管3支，分別標(biāo)明抗A、抗B、抗A＋B，用滴管加入相應(yīng)的抗A、抗B、抗A＋B標(biāo)準(zhǔn)血清各1滴，再加入被檢者5％紅細(xì)胞鹽水懸液1滴，輕輕混勻。 2、反定型

8、取同樣試管3支，分別標(biāo)明A、B、O紅細(xì)胞，用滴管各加入被檢者血清1滴，再分別加入A、B、O型5％標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液1滴，輕輕混勻。 3、立即以RCF177g（1000r/min）離心1分鐘。 4、取出試管，先觀察有無溶血，再輕彈試管，觀察有無紅細(xì)胞凝集，如肉眼不見凝集，應(yīng)將反應(yīng)物傾倒于玻片上，在顯微鏡下用低倍鏡觀察。結(jié)果判斷可見表7－5。,實(shí)驗(yàn)操作,ABO血型鑒定—正定型 試管法：,,,A,B,,標(biāo)記號(hào),,1滴抗

9、B,,1滴RBC懸液,,標(biāo)記號(hào),,1滴抗A,,1滴RBC懸液,1000轉(zhuǎn)/min離心1分鐘，觀察凝集結(jié)果,,,,,ABO血型正反定型結(jié)果判定,標(biāo)準(zhǔn)血清＋ 被檢者血型 標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞＋ 被檢者紅細(xì)胞 被檢者血清抗A 抗B 抗A＋B

10、A細(xì)胞 B細(xì)胞 O細(xì)胞 ＋ － ＋ A型 － ＋ － － ＋ ＋ B型 ＋ － － － － － O型 ＋

11、 ＋ － ＋ ＋ ＋ AB型 － － －,,,,,,（二）玻片法 1、正定型 取清潔玻片或白瓷板，用蠟筆畫出方格或圓圈，依次標(biāo)明抗A、抗B、 抗A＋B，按標(biāo)記用滴管加入相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)血清各1滴，再加入被檢者5％紅細(xì)胞懸液1滴，轉(zhuǎn)動(dòng)玻片混勻。 2、反定型 另取清潔玻片或白瓷板，用蠟筆畫出方

12、格或圓圈，依次標(biāo)明A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞，用滴管加入被檢者血清各1滴，再按標(biāo)記加入5％標(biāo)準(zhǔn)A、B、O紅細(xì)胞懸液1滴。轉(zhuǎn)動(dòng)玻片混勻。 3、不斷轉(zhuǎn)動(dòng)玻片或白瓷板，使血清與細(xì)胞充分混合，室溫下（20℃～24℃）10～15分鐘，觀察有無凝集和溶血。如用玻片試驗(yàn)，必要時(shí)可用顯微鏡在低倍鏡下觀察。紅細(xì)胞凝集判斷標(biāo)準(zhǔn)圖7－2。,,,,,,,,,實(shí)驗(yàn)操作,ABO血型鑒定—正定型 玻片法：,,,,A,B,,,各加一滴紅細(xì)胞,,,抗B

13、,抗A,轉(zhuǎn)動(dòng)玻片，15分鐘后觀察結(jié)果,,,實(shí)驗(yàn)十六 ABO血型鑒定RH血型鑒定,,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、熟練掌握ABO血型鑒定方法。2、熟悉RH血型鑒定的方法及結(jié)果判定。,實(shí)驗(yàn)器材、試劑,［器材］毛細(xì)血管采血用具、離心機(jī)、試管、玻片［試劑］1、生理鹽水2、標(biāo)準(zhǔn)血清3、抗D抗體,實(shí)驗(yàn)安排,兩人一組互取標(biāo)本，配制5%紅細(xì)胞懸液1、單號(hào)：ABO血型鑒定正定型：玻片法2、雙號(hào)：ABO血型鑒定正定型：試管法3、每人進(jìn)行Rh血型鑒定,,提

14、問,玻片法血型測定的方法及結(jié)果判讀,實(shí)驗(yàn)操作,兩人一組毛細(xì)血管采血 1、配制5%紅細(xì)胞懸液： 末梢采血1滴+10滴生理鹽水 2、ABO血型鑒定—正定型 玻片法：,,,,A,B,,,各加一滴紅細(xì)胞,,,抗B,抗A,轉(zhuǎn)動(dòng)玻片，15分鐘后觀察結(jié)果,實(shí)驗(yàn)操作,ABO血型鑒定—正定型 玻片法：,,,,A,B,,,各加一滴紅細(xì)胞,,,抗B,抗A,轉(zhuǎn)動(dòng)玻片，15分鐘后觀察結(jié)果,實(shí)驗(yàn)操作,3、ABO

15、血型鑒定—正定型 試管法：,,,A,B,,標(biāo)記號(hào),,1滴抗B,,1滴RBC懸液,,標(biāo)記號(hào),,1滴抗A,,1滴RBC懸液,1000轉(zhuǎn)/min離心1分鐘，觀察凝集結(jié)果,,,,,實(shí)驗(yàn)操作,4、Rh血型鑒定:,,,----1滴紅細(xì)胞懸液,1滴抗D----,,,37℃水浴30分鐘,,,Rh陽性,,,,Rh陰性,,,,,,結(jié)果報(bào)告,ABO血型的報(bào)告方式： ABO血型 型Rh血型的報(bào)告方式： Rh血

16、型：陰性 Rh血型：陽性,注意事項(xiàng),要有及高的責(zé)任心，避免發(fā)生血型鑒定錯(cuò)誤對于工作人員1%的錯(cuò)誤，病人就是100%的誤診！！,作業(yè),完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告P248 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與安排 一：1、2、3P252 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與安排 一：1、2、3報(bào)告今日血型測定結(jié)果,格式如下 ： 姓名： ABO血型：