復方甘草酸苷膠囊引起小鼠低鉀血癥的最低濃度的實驗設計

1、目錄/Contents,,,,選題依據,復方甘草酸苷膠囊的主要成分為甘草酸苷、甘氨酸、DL－蛋氨酸，可用于治療慢性肝病、改善肝功能異常，治療濕疹、皮膚炎、斑禿等，作用頗為廣泛。近年來，甘草酸類制劑引起人體的不良反應的報道層出不窮。,,甘草的藥理作用有腎上腺皮質激素樣作用,過量的甘草會影響水、電解質的代謝，促進水鈉潴留，排鉀增多，過多血鉀流失引起的低血鉀癥,可導致心律失常,肌肉無力等。考慮到甘草酸類制劑在我國使用的廣泛性、藥物的易得性以及

2、低鉀血癥潛在的巨大風險，積極研究甘草酸引起人體／動物低鉀血癥的最低濃度能協(xié)助人們合理用藥，減輕甘草酸類藥物帶來的風險。 本實驗給單一性別成年小鼠灌服不同濃度的復方甘草酸膠囊溶液，通過心電圖觀察小鼠低鉀血癥的情況，同時計算甘草酸溶液引起小鼠低鉀血癥的最低濃度。,,國內外研究進展,復方甘草酸苷膠囊屬于甘草酸類制劑。該類藥物在肝病治療領域具有廣前景，并用于胃及十二指腸潰病、阿狄森氏病、咳喘、慢性皮膚病及食物中毒等的治療，近年來

3、也用于治療流行性出血熱、變態(tài)反應性皮膚病和某些自身免疫性疾病,并具有抑制SABS病毒的作用。 隨著該類制劑在臨床應用的日益廣泛，對其不良反應的認識也越來越深入，現綜述如下。,,（一）腎上腺皮質激素樣副作用 腎上腺皮質激素樣副作用是甘草酸類制劑最常見的不良反應，約占78%。主要表現為水、鈉留或低鉀血癥、高血壓、假性醛固酮增多癥等。（二）過敏反應 據報道，甘草酸類制劑所引起的過敏反應主要表現為皮膚

4、過敏、發(fā)熱，甚至過敏性休克，其中以皮膚蕁麻疹型藥疹最為常見，值得注意的是以上過敏反應多為注射用制劑引起。（三）消化系統(tǒng)反應 最常見的胃腸道反應主要有惡心、腹瀉、嘔吐等，其中腹瀉較為多見，多在1～3天內發(fā)生，一般不影響療效。其與水楊酸衍生物合用時，可誘發(fā)或加重消化道潰瘍。（四）生殖系統(tǒng)反應 甘草酸類制劑可引起男性陽痿，睪丸、陰莖萎縮，可能甘草酸類制劑具有雌激素類樣作用。,,（五）神經、精神系統(tǒng)反應

5、 甘草酸類制劑的糖皮質激素樣作用對中樞有興奮作用，個別病人可誘發(fā)精神病，有癇病史的兒童容易誘發(fā)癲癇。另復方甘草酸類制劑有的含有阿片，久服可具有成癮依賴性。（六）其他內分泌樣反應 甘草酸類制劑可引起內分泌功能素亂、失調，主要表現為泌乳及糖皮質激素樣作用所致不良反應。此作用可能與甘草的雌激素樣作用有關，需在臨床中繼續(xù)觀察和注意。甘草酸具有糖皮質激素樣作用，可導致血糖升高，與降糖藥如胰島素、甲磺丁脲、降糖尿等聯(lián)用，可產生拮

6、抗抑制作用，降低療效，不利于糖尿病的治療，甚至加重病情。（七）其它反應 甘草酸類制劑還可誘發(fā)肝性腹水及肝昏迷，長期大劑量服用還可引起心動過速、持續(xù)性呃逆、黑毛舌等特殊癥狀。,,創(chuàng)新性及意義,本次實驗希望通過復方甘草酸膠囊引起低鉀血癥的一系列數據，提醒民眾對含甘草制劑所致低鉀血癥的重視程度?；颊哂绕涫窃袐D、高血 壓患者、兒童及年老體虛患者應在醫(yī)師指導下規(guī)范用藥,以保 證用藥安全。,,臨床醫(yī)護人員在使用甘草酸類制劑時,應密切

7、觀察,發(fā)現異常及時停藥,并采取相應的治療措施，注意以下幾點：①嚴格掌握適應癥，不可濫用。對高血壓、糖尿病、精神病、心力衰竭患者以及某些心腎疾病患者禁用，避免加重病情。②嚴格掌劑量，依病情的變化及個體差異而定，禁止超劑量服用。建議使用甘草酸類制劑應避免大劑量、長療程應用。③有過敏史者應用時，應嚴密觀察。④需要長期應用時，應囑患者定期進行必要的檢查，在醫(yī)師指導下用藥，以確保用藥安全、有效。⑤選用α體甘草酸類制劑，避免因藥物構型差異引起的藥物

8、不良反應。,,實驗設計要點,實驗設計包括預實驗和正式實驗,,實驗基本思路,,實驗組（A2-10/B2-6）給0.5ml復方甘草酸苷膠囊溶液對照組（A1/B1）給0.5ml生理鹽水,,（一）預實驗1.實驗動物：成年小鼠；性別：單一性別；體重：(20±2)g；年齡：二月齡；數量：預實驗10只，正式實驗6只2.所需特殊器材、試劑的種類與數量：（1）實驗試劑：復方甘草酸苷膠囊、生理鹽水、蒸餾水（2）實驗器材：1ml注射器

9、10支、12號灌胃針10支、動物實驗臺、小單位電子秤、多通道生理信號采集記錄儀器。3.主要觀察指標：小鼠的精神狀況、腱反射情況、心電圖的變化。,,4.主要實驗方法與步驟：（1）提取液制作：購買復方甘草酸苷膠囊，取出粉末稱重后與一定量的溫水混合成甘草酸溶液。（2）分組與給藥：a．將預實驗的10只小鼠分別標記為A1-A10，觀察小鼠的正常狀態(tài)并且進行記錄，每只小鼠稱重記錄體重。麻醉前小鼠禁食10-12小時b．將12號灌胃針頭與1.

10、0 ml注射器相匹配，固定小鼠A1，使其頭、頸和身體呈一直線，右手拉住小鼠尾巴，左手的拇指、食指和中指揪住小鼠的頸部頭皮，另外小指和無名壓住小鼠的尾巴，針頭從小鼠的嘴角進入，壓住舌頭，抵住上顎小心的向內推進，進入食道后會有一種刺空感即可推藥，給A1灌入0.5ml生理鹽水，如圖所示。,,c．用3%戊巴比妥50mg/kg對A1小鼠在腹部后1/3處略靠外側，進行腹腔注射麻醉，麻醉時避開肝臟、膀胱。約幾分鐘后小鼠倒下，全身無力，反應消失，表明已

11、經達到適宜的麻醉效果。d．將A1仰臥固定于動物實驗臺上，將針形電極插入小鼠四肢皮下，記錄正常的ECG（紅－右上，黑－右下，黃－左上，綠-左下）。e．小鼠A2-A10按表1中濃度梯度從小到大灌服復方甘草酸苷膠囊溶液各0.5ml，觀察小鼠的精神狀況、腱反射情況，記錄數據并觀察變化。若小鼠出現四肢軟弱無力、肌腱反射減弱或消失等情況，記錄下此時的小鼠號數和給藥濃度。f．將小鼠分別進行麻醉后測心電圖，若出現ST段下移、T波改變、U波、Q-T

12、間期明顯延長等改變，則記錄下此時的小鼠號數和給藥濃度。結合步驟e粗略確定正式實驗的給藥區(qū)間。,,表 1 預實驗灌胃量,,（二）正式實驗a．將正式實驗的6只小鼠分別標記為B1-B6，觀察小鼠的正常狀態(tài)并且進行記錄，每只小鼠稱重記錄體重。b．按照預實驗的b、c、d步驟給小鼠B1進行灌胃和麻醉，記錄心電圖。c．小鼠B2-B6根據預實驗確定的給藥濃度區(qū)間從大到小進行灌胃（，觀察小鼠的精神狀況、腱反射情況，記錄情況后進行麻醉并測心電圖，若出