磁珠法核酸提取新篇章_第1頁
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文檔簡介

1、磁珠法—核酸提取的新篇章,洛陽惠爾納米科技狄光輝13683842418Q:625006192,核酸提取方法進展,核酸抽提是下游核酸檢測、研究或產(chǎn)品開發(fā)的起點,所分離的核酸的質量和完整性直接影響研究或診斷結果,因此核酸抽提是分子生物學最關鍵的方法之一。成功的核酸分離純化需要四個重要步驟:組織或細胞的破碎和裂解,核蛋白復合體的變性,核酸酶的滅活以及污染物的去除。,傳統(tǒng)核酸提取方法,,酚--氯仿抽提法,堿抽提法,CTAB抽提法,纖維

2、素膜層析法,核酸固相抽提法,市場上大多數(shù)商業(yè)核酸抽提試劑盒采用固相抽提法。相對于傳統(tǒng)方法,固相抽提更快速和高效。它解決了許多液--液抽提存在的諸多問題,如分離不完全等。,固相抽提方法的支持物主要有硅膠、玻璃顆粒、陰離子交換樹脂、磁性顆粒。固相抽提包括細胞裂解、核酸吸附、漂洗和洗脫四個關鍵性的步驟。,提取原理,首先,基于堿裂解法使細胞膜破裂,以及組蛋白變性,釋放核酸。,,然后,將經(jīng)裂解液處理的樣本轉移到固相支持物上,在結合液的幫助下靶核

3、酸被吸附到支持物上。,蛋白質等其他化合物也可與支持物表面發(fā)生結合,但通過目的性洗滌過程可以被除掉。,最后,以TE緩沖液或蒸餾水將純凈的靶核酸從支持物上釋放下來。,,,離心柱法提取DNA,磁珠法提取DNA,,裂解使核酸游離出來,結合加入磁珠,使核酸與其結合,洗滌洗去殘留雜質,洗脫將核酸從磁珠中分離出到溶液,純化分離磁珠,得到高純度核酸溶液,,,,,比較(以全血為例),,離心柱法產(chǎn)品效果圖,磁珠法產(chǎn)品效果圖,,核酸自動

4、化抽提系統(tǒng),自動化抽提系統(tǒng)是可高通量地處理樣品、有助于簡化分離步驟的一種大型、復雜的儀器操作系統(tǒng)。自動化提取的優(yōu)點有:減少人為工作時間,降低人力成本、增加工作者的安全性以及提高結果的可重復性和質量。,核酸自動提取儀,,磁棒,,深孔板,磁珠法核酸提取的核心是生物磁珠,是一種新型的功能化固體載體,其表面包被有活性基團,可與多種生物活性物質發(fā)生偶聯(lián),兼具有液體的流動性和固體磁性材料等特點。,生物磁珠的介紹,生物磁珠按功能集團分類及應用領域

5、,,,,Fe3O4磁性微球,硅基(硅羥基),氨基/羧基,生物磁珠的制備方法,植物、動物基因組DNA及細菌質粒提取試劑盒,磁珠法DNA提取試劑盒的介紹,應用:,和中科院植物研究所合作,提取百年以上植物的DNA,用于后續(xù)的分型及特定位點的分析,可用于海關、畜牧檢驗,檢測進出口肉制品或者家禽是否攜帶病毒,提取質粒,用作基因工程的常用載體,臨床疾病診斷:人類的很多疾病和基因密切相關,白血病、地中海貧血、腎衰竭等都能用基因技術進行分型檢測,再

6、尋找合適的供體進行移植治療;葉酸代謝能力基因檢測;DNA親子鑒定;胎兒性別檢測動物疾病檢測:布魯菌?。╞rucellosis,布?。卜Q波狀熱,是布魯菌引起的急性或慢性傳染病,人畜共患病。科學研究:醫(yī)學、農(nóng)牧、生物相關分子生物學定量研究。應用行業(yè): 各級各類醫(yī)療機構、疾病預防控制中心、血站、大學及研究所、獸醫(yī)站等。,全血試劑盒,病毒試劑盒,能夠從血清、血漿等多種病毒樣品中(如HBV、HPV、HCV ),高效提取和分離病毒總DNA

7、或RNA,也可適用于組織細胞或分泌物樣本中的病毒總核酸,提取產(chǎn)物可以直接用于下游應用,如熒光定量PCR或定量逆轉錄PCR等。,1. 生物磁珠具有小尺寸效應和表面效應,可高效核酸提取,滿足微量生物樣本核酸提取的要求。2.不使用酚、氯仿、異戊醇等有毒試劑,安全無毒,綠色環(huán)保。3.生物磁珠能夠通過儀器進行自動化操作,滿足數(shù)據(jù)庫建設對大批量樣本提取的需要,減少人為因素4.用時少,操作簡單,適用于大多數(shù)生物檢材。5.全自動核酸提取

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