除草劑丁草胺對花背蟾蜍胚后早期腦部發(fā)育的毒性作用.pdf

1、目的：通過對花背蟾蜍胚后早期蝌蚪的急慢性毒性實驗，我們探討除草劑丁草胺染毒后對背蟾蜍胚后發(fā)育早期蝌蚪的形態(tài)學(xué)與行為學(xué)的改變、腦部神經(jīng)元形態(tài)和數(shù)量以及室管膜厚度的改變，從而揭示除草劑丁草胺對花背蟾蜍胚后早期腦部發(fā)育的毒性作用，為生態(tài)保護工作提供更充實的資料。
　　方法：首先對花背蟾蜍發(fā)育至gosner20、gosner25和gosner26期的蝌蚪進行急性染毒，求出各期蝌蚪的LC50及其95％置信區(qū)間、安全濃度，并觀察記錄蝌蚪在行為

2、學(xué)和形態(tài)學(xué)上的變化；接著依照gosner20,25,26期蝌蚪的各自24hLC50濃度對各期蝌蚪進行染毒，24h后從各期取4-5只蝌蚪做腦部石蠟切片，尼氏染色，觀察急性染毒后的腦部組織學(xué)變化；然后以發(fā)育至gosner25期的蝌蚪做為研究對象，以其24hLC50濃度值為基礎(chǔ)換算為一系列濃度梯度（24hLC50濃度值的1/5、1/10、1/20、1/50、1/100和1/200）進行慢性染毒，每隔3天記錄體重、體長的變化，并取4-5只蝌蚪做

3、腦部石蠟組織切片，尼氏染色觀察染毒對花背蟾蜍胚后早期腦部發(fā)育的影響。
　　結(jié)果：隨著發(fā)育時間的增加，丁草胺對花背蟾蜍的LC50值逐漸增大。急性染毒對蝌蚪的行為學(xué)和形態(tài)學(xué)均產(chǎn)生了不同程度的毒性作用。慢性染毒過程中，丁草胺對花背蟾蜍胚后早期生長發(fā)育造成了明顯的滯育影響，體重從第6天、體長從第9天開始染毒組與對照組之間出現(xiàn)了顯著性差異。急慢性染毒后蝌蚪腦部神經(jīng)元形態(tài)均未出現(xiàn)明顯病理性改變，但在急性染毒24h后，蝌蚪的部分腦區(qū)的神經(jīng)元數(shù)量

4、出現(xiàn)了明顯減少，在慢性染毒的第3天，花背蟾蜍蝌蚪腦部四個區(qū)域（大腦海馬區(qū)、間腦丘腦區(qū)，中腦頂蓋區(qū)和延髓區(qū)）的神經(jīng)元數(shù)量均出現(xiàn)了不同程度的減少，在第6天，染毒組的神經(jīng)元數(shù)量恢復(fù)到了與對照組基本相同的水平，而到了第12天，海馬區(qū)和延髓區(qū)的的神經(jīng)元數(shù)量出現(xiàn)了下降，第21天觀察，除中腦區(qū)外，海馬區(qū)、間腦區(qū)和延髓區(qū)染毒組的神經(jīng)元數(shù)量均高出了對照組的水平。在急慢性染毒期間，延髓區(qū)神經(jīng)元數(shù)量減少最為顯著。同時，在染毒過程中，側(cè)腦室，第三腦室和第四腦室

5、的室管膜厚度均出現(xiàn)了明顯的增厚。
　　結(jié)論：酰胺類除草劑丁草胺對花背蟾蜍胚后發(fā)育早期的蝌蚪具有中等毒性，染毒會對蝌蚪的行為和形態(tài)造成改變，并且具有明顯的滯育效應(yīng)，對體重的影響較對體長的影響更為明顯；丁草胺染毒對蝌蚪腦部神經(jīng)元的形態(tài)基本上不產(chǎn)生影響，但染毒會使室管膜的厚度產(chǎn)生保護性的增高。在染毒早期，蝌蚪腦部四個區(qū)域神經(jīng)元數(shù)量均出現(xiàn)了減少，尤其對延髓區(qū)神經(jīng)元的影響最為顯著，但隨后通過蝌蚪自身的適應(yīng)性調(diào)節(jié)，神經(jīng)元的數(shù)量又逐步恢復(fù)到了正