項目6疫苗生產(chǎn)技術

1、教學安排,1. 員工培訓 由老師講解病毒疫苗生產(chǎn)的理論基礎及應用范圍。 分配實操任務：病毒疫苗(用動物病毒模擬)的生產(chǎn)。,2. 學生模擬組建運營一個病毒疫苗生產(chǎn)企業(yè)，撰寫計劃書(在理論教學期間完成)。 市場部：病毒疫苗的種類和用途，市場狀況，選擇生產(chǎn)的細菌疫苗品種，做市場銷售預測。 技術部：確定病毒疫苗生產(chǎn)的工藝流程及工藝參數(shù)，編制生產(chǎn)操作規(guī)程，確定生產(chǎn)車間的

2、布局。,品控部：制定所生產(chǎn)的病毒疫苗質(zhì)量標準，生產(chǎn)取樣分析操作規(guī)程，質(zhì)量檢測標準和操作規(guī)程。 總經(jīng)理：協(xié)調(diào)監(jiān)督各部工作，最后拿出完整的計劃書。,3. 計劃書實施。 計劃書要先經(jīng)過老師的審核，然后實施。 實施過程中考核操作技能。 實施后及時進行實訓報告的撰寫也總結。,病毒疫苗的一般制造方法,,一　病毒類疫苗的制造方法,1　毒種的選擇與減毒毒株須具備

3、的條件：（1）持有特定的抗原性；（2）有典型的形態(tài)和感染特定組織的特性，并能保持其生物學特性；（3）易在特定組織中大量繁殖；（4）不產(chǎn)生神經(jīng)毒素或能引起機體損害的其它毒素；,,（5）如制備活疫苗，繁殖過程中無恢復原致病性的現(xiàn)象；（6）未被其它病毒污染。2　病毒的繁殖（1）活體動物培養(yǎng)（2）雞胚培養(yǎng)（3）組織培養(yǎng),,（4）細胞培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時需要控制：①　常用的維持液和生長液　　需要氨基酸、輔酶、維生素、葡萄糖和

4、無機鹽等。② 培養(yǎng)條件控制a pH值：7.0±0.2；b CO2提供：通過保持環(huán)境CO2分壓5%，控制pH。,,c 氧的提供：通氧；d 容器內(nèi)壁潔凈度控制：用硫酸－鉻酸混合液洗滌，后用純水沖洗；e 細菌污染控制：徹底滅菌，加入一定量抗生素；f 培養(yǎng)溫度和時間控制：37±1℃，時間2－4天。,,3　疫苗的滅活　　用甲醛或酚溶液滅活。　　動物組織對滅活效果有影響；滅活時間要合適。4　疫苗純化　　細胞

5、培養(yǎng)換液即可。,,5　凍干　　凍干的疫苗充氮或真空密封保存。,重要的病毒類疫苗生產(chǎn)工藝,一、甲型肝炎減毒活疫苗歷史： 絨猴肝內(nèi)復制； 細胞培養(yǎng)未經(jīng)純化； 細胞培養(yǎng)經(jīng)純化。,,二　乙型肝炎疫苗　　HBsAg抗原具有較強的免疫原性，可制備疫苗，用酵母表達系統(tǒng)。,,三　流行性乙型腦炎疫苗　　11-15日齡地鼠腎經(jīng)胰酶消化，用大立瓶6-8r/h培養(yǎng)3d，用生理鹽水充分洗滌，加入維持液，接入毒株

6、鼠腦懸液，待病變達+++，第一次收液。細胞良好，待病變達++++作第二次收液。收液作毒力滴定與無菌實驗，加入福爾馬林，22℃恒溫滅活8d。,六　白喉類毒素,1　菌種及培養(yǎng)基　　菌種：第8號菌株。　　培養(yǎng)基：改良馬丁培養(yǎng)基，保浦氏培養(yǎng)基，改良林氏培養(yǎng)基。2　培養(yǎng)　　多用深層培養(yǎng)。,作業(yè)：,1　簡述病毒類疫苗制造方法。2　如何生產(chǎn)甲型肝炎疫苗？3　如何生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗？4　如何生產(chǎn)流感疫苗？5 如何生產(chǎn)狂犬疫