1氧-植物二烯酸還原酶opr酶聯(lián)免疫分析elisa

1、112氧植物二烯酸還原酶（植物二烯酸還原酶（OPR）酶聯(lián)免疫分析（酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定相關樣本中12氧植物二烯酸還原酶（OPR）含量。實驗原理：實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中12氧植物二烯酸還原酶（OPR）水平。用純化的12氧植物二烯酸還原酶（OPR）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入12氧植物二烯酸還原酶（OPR）抗原，再

2、與HRP標記的12氧植物二烯酸還原酶（OPR）抗體結合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的12氧植物二烯酸還原酶（OPR）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中12氧植物二烯酸還原酶（OPR）濃度。試劑盒組成試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48

3、）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品：225ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液（20ml20倍）1瓶（20ml30倍）1瓶28℃保存標本要求：標本

4、要求：1標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融2不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：操作步驟：1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第

5、三、第四孔分別加標準品稀釋液3計算：計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：檢