高濃度鹽篩選農(nóng)藥降解菌研究.pdf

1、近年來(lái)，利用微生物降解農(nóng)藥、處理農(nóng)藥污染的研究，日益被人們所重視。篩選出高效降解菌，是此研究基礎(chǔ)和重點(diǎn)，而篩選方法的合理性更是能否篩選出高效降解菌的關(guān)鍵。
　　 本文針對(duì)傳統(tǒng)農(nóng)藥降解菌篩選方法中存在的一些弊端，對(duì)農(nóng)藥降解菌篩選方法進(jìn)行了有創(chuàng)新和改良。以西南大學(xué)周邊普通大田土壤為研究材料，通過(guò)使用高濃度NaCl篩選方法，分離得到多株耐鹽株菌株，并以我國(guó)農(nóng)田中廣泛使用的幾類農(nóng)用化學(xué)物質(zhì)為研究對(duì)象，對(duì)耐鹽菌株的在一定濃度農(nóng)藥中生長(zhǎng)及降

2、解特性進(jìn)行了初步探討，為降解菌篩選方法的創(chuàng)新，提出了有益的參考。本研究主要結(jié)果如下：
　　 1.耐鹽菌株的篩選
　　 通過(guò)使用含有10％濃度NaCl的LB富集培養(yǎng)基對(duì)土壤中微生物進(jìn)行篩選，分離出22株耐鹽微生物，使用用含有15％濃度NaCl的LB培養(yǎng)基再次對(duì)22株耐鹽菌株進(jìn)行復(fù)篩得到6株極度耐鹽菌株(el～e6)，其它16株為中度耐鹽菌株(ml～m16)。
　　 2.耐鹽菌株的耐藥性檢測(cè)
　　 分別使用四

3、種農(nóng)用化學(xué)物質(zhì)對(duì)其抗藥性進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在200ppm藥物濃度下，22株耐鹽菌在48小時(shí)內(nèi)生長(zhǎng)被抑制，但效果并不明顯，其最大生長(zhǎng)量和所需時(shí)間均與不加藥相差無(wú)幾，表現(xiàn)出較高的耐藥性。說(shuō)明耐鹽菌對(duì)其他有毒害物質(zhì)亦有耐受力。
　　 3.耐鹽菌株降解率研究
　　 通過(guò)對(duì)22株耐鹽菌降解率的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，在50mg/L藥物濃度下，22株耐鹽菌對(duì)四種農(nóng)用化學(xué)物質(zhì)均有一定的降解效果。在對(duì)廣滅靈、高效氯氰菊酯、3，4-二氯苯胺、毒死蜱的處理2

4、d后，中等耐鹽菌株平均降解率分別為10.8％、39.5％、34.0％、28.6％。高耐鹽菌株分別為25.1％、76.4％、83.9％、63.6％。可看出高耐鹽居住的降解能力，遠(yuǎn)高于中等耐鹽菌株，說(shuō)明植株耐鹽性與其降解效率有一定的相關(guān)關(guān)系。
　　 4.對(duì)高耐鹽菌株的鑒定及降解、生長(zhǎng)研究
　　 通過(guò)對(duì)6株耐鹽菌在50mg/L藥物濃度下降解及生長(zhǎng)對(duì)照曲線，可發(fā)現(xiàn)其降解效率可能受到菌株生長(zhǎng)期和藥物殘留量?jī)煞矫娴挠绊懀?)在菌株活

5、性最強(qiáng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，菌株降解效率最高，而隨著菌株生長(zhǎng)進(jìn)入衰亡期，其降解效率逐步降低。2)在藥物殘留量較高時(shí)，菌株降解效率較高，而隨著藥物殘留量的減少，其降解效率也隨之降低。符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)原理。通過(guò)16srRNA檢測(cè)6株高耐鹽農(nóng)藥降解菌株鑒定結(jié)果如下：el與蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus starin TAUC5相似性最高(>99.9％)e2、e4與地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis strain BPR