豬傳染性腸胃炎抗體tge-ab酶聯(lián)免疫分析

1、豬傳染性腸胃炎抗體（豬傳染性腸胃炎抗體（TGEAb）酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：使用目的：本試劑盒用于測(cè)定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中傳染性腸胃炎抗體（TGEAb）表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬傳染性腸胃炎抗體（TGEAb）表達(dá)。用純化的豬傳染性腸胃炎抗原包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中傳染性腸胃炎抗體（TGEAb）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合

2、的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的傳染性腸胃炎抗原結(jié)合，形成抗原抗體酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬傳染性腸胃炎抗體（TGEAb）的存在與否。試劑盒組成試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液6ml1瓶2酶標(biāo)試劑6ml1瓶8陽(yáng)性對(duì)照0.5ml1瓶3酶標(biāo)包被板1

3、2孔8條9陰性對(duì)照0.5ml1瓶4樣品稀釋液6ml1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml1瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求標(biāo)本要求1標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟操作步驟1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2

4、孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次

5、，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。HumanHPFRESEARCHUSEONLY96determinationsPurposeThiskitallowsfthedeterminationofHPconcentrationsinHumanserumotherbiologicalfluids.PrincipleoftheassayThekitassayHPlevelinthesample，usePurifiedHPan

6、tibodytocoatmicrotiterplatewellsmakesolidphaseantibodythenaddHPtowellsCombinedWithHPafterwashingremovingnoncombinativeantibodyothercomponentsthenCombinedHPantibodywhichwithHRPlabeledbecomeantibody–antigenenzymeantibodyco

7、mplexafterwashingCompletelyAddTMBsubstratesolutionTMBsubstratebecomesbluecolAtHRPenzymecatalyzedreactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionthecolchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.Co

8、mparedwiththeCUTOFFvalueaccdingtothistojudgeHPexistinthesamplenot.Materialsprovidedwiththekit1washsolution20ml1bottle7StoppSolution6ml1bottle2HRPConjugatereagent6ml1bottle8Positivecontrol0.5ml1bottle3Microelisastripplate