版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領
文檔簡介
1、因為大鼠紅細胞比重是1。090，中性粒細胞的比重是1。0911取9份percoll原液與1份1.5m的Nacl混合定為100%的工作液然后就是目的液的配置根據(jù)你的鼠的密度取一定量的100%的工作液和一定量的生理鹽水充分混合后即為目的液比如：目的密度1.084=（1.126781.9121.0091.088）31.12678為100%的工作液的密度1.912為100%的工作液的體積1.009為生理鹽水的密度1.088為生理鹽水的體積3為總
2、體積1.5m的Nacl是我自己配的條件是1400rpmmin，20min還是全血與PBS1：1混合后再加在工作液上？配好目的液后把1:1稀釋血小心加在目的液上分兩步：第一部是配工作液用PBS稀釋？第二部是用工作液配目的液離心完后取第三層（中性粒細胞層）第四層（紅細胞層），再裂解你裂解液用的是什么？讓后用二蒸水裂解的也可以用氯化銨哦，明白了，1.084是牛的淋巴細胞比重差不多這個密度能除去90多的淋巴細胞雙蒸水裂解的條件你告我一下一般1m
3、l的紅細胞沉淀加2.5ml左右的雙蒸水裂解30s左右再直接放上足夠PBS把雙蒸水稀釋，離心，是吧加到工作液上后細胞分層也是第一層：血漿層、第二層淋巴層、第三層PMN層、第四層紅細胞層吧取第三層、第四層裂解如果第三層里的細胞PMN較多而且純度較高那就不用再取第四層了而且我個人認為紅細胞和PMN有可能不能完全分開BonemarrowPMN(BMPMN)wereisolatedaccdingtotheproceduredescribedinr
4、eference37withsomemodifications.BrieflyBMCsuspendedin2mlofKRG()werelaidontopofathreelayerPercollgradientpreparedin15mlpolystyrenetubingbylayering2mleachof1.0951.0851.070gmlPercollsolutions.ThedensityofeachPercollsolution
5、wasverifiedusingdensitymarkerbeads.Aftercentrifugationat500gf30minat4Cinaswingingbucketrotthelowestb(1.0851.095gmlinterface)theupperpartofthe1.095gmllayerwerecollectedasthePMNfraction.AfterwashingwithKRG()remainingredblo
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
評論
0/150
提交評論