生物實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范安全手冊(cè)

1、實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范本規(guī)程中列出了最基本的實(shí)驗(yàn)室操作和程序，他們是微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范的基礎(chǔ)。在規(guī)劃實(shí)驗(yàn)室和國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目時(shí)，可以根據(jù)這些規(guī)程來(lái)制訂實(shí)驗(yàn)室安全操作的書面程序。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該采用“安全手冊(cè)”或“操作手冊(cè)”，其中定義了已知的和潛在的危害，并規(guī)定了特殊的操作程序來(lái)避免或盡量減小這種危害。規(guī)范的微生物學(xué)操作技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室安全的基礎(chǔ)，而專門的實(shí)驗(yàn)設(shè)備僅僅是一種補(bǔ)充，絕不能替代正確的操作規(guī)范。下面列出了一些最重要的概念。進(jìn)入規(guī)定進(jìn)入規(guī)定

2、1、在處理危險(xiǎn)度2級(jí)或更高危險(xiǎn)度級(jí)別的微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志（圖1）。2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。3、實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。5、進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過特別批準(zhǔn)。6、與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。人員防護(hù)1、在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，任何時(shí)候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物

3、的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。5、嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）。6、不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼

4、鏡。8、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。9、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。操作規(guī)范1、嚴(yán)禁用口吸移液管。2、嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn)行。4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液，皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。實(shí)驗(yàn)

5、室應(yīng)保存這些事件或事故的書面報(bào)告。6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果，可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實(shí)驗(yàn)室的手寫文件必須保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒有受到污染。避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散1、為了避免被接種物灑落，微生物接種環(huán)的直徑應(yīng)為2～3mm并完全封閉，柄的長(zhǎng)度應(yīng)小于6cm以減小抖動(dòng)。2、使用封閉式微型電

6、加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在本生燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要再進(jìn)行消毒的一次性接種環(huán)。3、干燥痰液標(biāo)本時(shí)要注意避免生成氣溶膠。4、準(zhǔn)備高壓滅菌和／或?qū)⒈惶幚淼膹U棄標(biāo)本和培養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)放置在防漏的容器內(nèi)（如實(shí)驗(yàn)室廢棄物袋）。在丟棄到廢棄物盛器中以前，頂部要固定好（如采用高壓滅菌膠帶）。5、在每一階段工作結(jié)束后，必須采用適當(dāng)?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。詳細(xì)資料見參考文獻(xiàn)12。生物安全柜的使用1、應(yīng)參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)

7、所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性（參見第10章）。應(yīng)當(dāng)發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊(cè)或操作手冊(cè)。特別需要明確的是，當(dāng)出現(xiàn)溢出﹑破損或不良操作時(shí)，安全柜就不再能保護(hù)操作者。2、生物安全柜運(yùn)行正常時(shí)才能使用。3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。4、安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。5、安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會(huì)干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最

8、好使用一次性無(wú)菌接種環(huán)。6、所有工作必須在工作臺(tái)面的中后部進(jìn)行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。7、盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。8、操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。9、不要使實(shí)驗(yàn)記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因?yàn)檫@將干擾氣體流動(dòng)，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。10、工作完成后以及每天下班前，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)南緞?duì)生物安全柜的表面進(jìn)行擦拭。11、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5min。12、在生

9、物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。避免感染性物質(zhì)的食入以及與皮膚和眼睛的接觸1、微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5μm）會(huì)迅速沉降到工作臺(tái)面和操作者的手上。實(shí)驗(yàn)室人員在操作時(shí)應(yīng)戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。2、不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飲食和儲(chǔ)存食品。3、在實(shí)驗(yàn)室里時(shí)，嘴里不應(yīng)有東西——鋼筆、鉛筆、口香糖。4、不應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室化妝。5、在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中，操作人員應(yīng)將面部、口和眼遮住或采取其他防護(hù)措施。避免