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文檔簡(jiǎn)介
1、中草藥及成方制劑顯微鑒別法介紹中草藥及成方制劑顯微鑒別法介紹顯微鑒別系指用顯微鏡對(duì)藥材的切片、粉末、解離組織或表面制片及成方制劑中藥味的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。鑒別時(shí)選擇有代表性的樣品,根據(jù)各該藥材鑒別項(xiàng)的規(guī)定制片。成方制劑根據(jù)不同劑型適當(dāng)處理后制片。一、橫切片或縱切片:選取藥材適當(dāng)部位,軟化后用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時(shí)可包埋后切片。二、粉末
2、制片:取粉末少量,置載玻片上,攤平,選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它適當(dāng)試液處理后觀察。三、表面制片:將樣品濕潤(rùn)軟化后切取一部分或撕取其表皮加適宜的試液觀察。四、解離組織片:如樣品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在,可用氫氧化鉀法;如果品堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在解離前,應(yīng)先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片。1氫氧化鉀法置樣品于試管中,加5%氫氧化鉀溶液適量,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾
3、去堿液,加水洗滌后,取出少量置載玻片上,用解剖針?biāo)洪_,以稀甘油裝置觀察。2硝鉻酸法置樣品于試管中加硝鉻酸試液適量,放置,至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸液,加水洗滌后,照1法操作裝置。3氯酸鉀法置樣品于試管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量緩緩加熱,待產(chǎn)生的氣泡漸少時(shí),再及時(shí)加入氯酸鉀少量,以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生,至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸液,加水洗滌后,照1法操作裝置。五、花粉粒與孢子制片:取花粉、花藥(或小的花朵)或孢子囊群(
4、干燥樣品浸于冰醋酸中軟化),用玻璃棒搗碎,過濾于離心管中,離心,取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸(9∶1)的混合液1~3ml,置水浴上加熱2~3分鐘,離心,取沉淀,用水洗滌2次加50%甘油與1%苯酚3~4滴用品紅甘油膠封藏觀察。也可用水合氯醛試液裝置觀察。六、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的測(cè)量:在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小,可用目鏡測(cè)微尺測(cè)量。先將目鏡測(cè)微尺裝入目鏡內(nèi),用鏡臺(tái)測(cè)微尺標(biāo)化。標(biāo)化時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺,使兩種量尺的刻度平行
5、,左邊的“0”刻度重合,再找第二條重合刻度。根據(jù)兩條重合刻度間兩種量尺的小格數(shù),計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拇笮。é蘭)。測(cè)量時(shí)以目鏡測(cè)微尺測(cè)量目的物的小格數(shù),乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物鏡下進(jìn)行,但欲測(cè)量較長(zhǎng)的如纖維、非腺毛等的長(zhǎng)度時(shí)則以在低倍物鏡下測(cè)量較為方便。記錄最大值與最小值(μm)可允許有少量略高或略低于藥典規(guī)定的數(shù)值。七、細(xì)胞壁性質(zhì)的檢定:1木質(zhì)化細(xì)胞壁加間苯三酚試液1~2滴,稍放置,加鹽酸1滴
6、因木化程度不同顯紅色或紫紅色。2木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱,顯橘紅色至紅色。3纖維素細(xì)胞壁加氯化鋅碘試液;或先加碘試液濕潤(rùn)后,稍放置再加硫酸溶液(33→50);顯藍(lán)色或紫色。本液應(yīng)置棕色玻璃瓶?jī)?nèi),在暗處保存。組織解離液(1)取硝酸10ml,加入100ml水中,混勻。(2)取鉻酸10g,加水100ml使溶解。用時(shí)將二液等量混合,即得。品紅甘油膠取動(dòng)物膠1g,加水6ml,浸泡至溶化,再加甘油7ml,加熱并輕輕攪拌至完全混
7、勻,用紗布濾于培養(yǎng)皿內(nèi),加堿性品紅溶液(堿性品紅0.1g,加無(wú)水乙醇600ml及樟油80ml,溶解)適量,混勻,凝固后即得。α-萘酚試液取15%的α-萘酚乙醇溶液10.5ml緩緩加硫酸6.5ml,混勻后再加乙醇40.5ml及水4ml,混勻,即得。銅氨試液取碳酸銅0.5g,加水適量,置乳體中研磨,再加濃氨溶液10ml使溶解,即得。硝酸汞試液取汞4.5g,加發(fā)煙硝酸3ml,俟作用完畢,加等量水稀釋,即得。本液應(yīng)置棕色玻璃塞瓶?jī)?nèi),在暗處保存。
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