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文檔簡介

1、11移動(dòng)基因移動(dòng)基因:又叫轉(zhuǎn)位因子(transposableelements)由于它可以在染色體基因組上移動(dòng),甚至可在不同染色體間躍遷,故又稱跳躍基因(jumpinggene)。有三種類型,插入序列,轉(zhuǎn)為子和噬菌體Mu和D108。2斷裂基因(斷裂基因(splitsplitgenegene):真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基因,其核苷酸序列中含有與氨基酸編碼無關(guān)的DNA間隔區(qū)段,從而被分割成不連續(xù)的若干區(qū)域。將這種編碼序列不連續(xù),有間隔區(qū)段的DNA片斷稱

2、為斷裂基因。非編碼間隔區(qū)段稱間隔子,有轉(zhuǎn)錄和編碼功能序列稱表達(dá)子。原核細(xì)胞無內(nèi)含子。3重疊基因重疊基因(overlappinggenes):不同基因的核苷酸序列有時(shí)為相鄰兩個(gè)基因共用,將核苷酸彼此重疊的兩個(gè)基因稱為重疊基因。4假基因:假基因:在珠蛋白基因簇(genecluster)各片斷核苷酸序列分析時(shí)發(fā)現(xiàn),除了有正常的功能基因之外,還有功能失活的特殊序列片斷,它不能行使表達(dá)功能。該類無表達(dá)功能的畸變核苷酸基因序列片斷,稱為假基因。5同

3、尾酶同尾酶:有一些限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的堿基順序不完全恒定,即識(shí)別順序不同,但酶切后產(chǎn)生同樣黏性末端的兩種酶稱為同尾酶,如BamHⅠ和BglⅡ。6質(zhì)粒質(zhì)粒:細(xì)菌存在于細(xì)胞質(zhì)中的一種獨(dú)立于染色體以外的遺傳成分,是由環(huán)狀的DNA分子組成的復(fù)制子。質(zhì)粒有我復(fù)制和調(diào)控系統(tǒng),可以在胞漿內(nèi)自主復(fù)制,把攜帶的遺傳信息通過自我復(fù)制的子代質(zhì)粒,可隨細(xì)菌分裂而進(jìn)入子代菌體中。還有轉(zhuǎn)移,選擇性標(biāo)記及不相容性等特性。7柯斯(柯斯(COSCOS)質(zhì)粒)質(zhì)粒:粘性

4、質(zhì)粒(Cos)帶有λ噬菌體的Cos位點(diǎn)和整個(gè)pBR322的DNA順序。經(jīng)感染進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞以后,它就好象質(zhì)粒那樣在細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制。分子量小,易環(huán)化和擴(kuò)增,可包裝3045kb外源基因,可由Ampr抗性篩選,常用于構(gòu)建基因文庫。8CosCos位點(diǎn)位點(diǎn)(Cohesiveendsite):λDNA為線狀雙鏈分子,兩端各有幾個(gè)堿基的單鏈互補(bǔ)粘性末端,通過粘性末端的互補(bǔ)作用形成雙鏈環(huán)形DNA。這種由粘末端結(jié)合形成的雙鏈區(qū)段即Cos位點(diǎn)。9COSCOS

5、細(xì)胞細(xì)胞:用一個(gè)復(fù)制起始部位缺失的SV40突變種感染猴細(xì)胞,由于病毒DNA不能自主復(fù)制,便整合到宿主染色體DNA中,早期基因表達(dá)產(chǎn)生功能性的T抗原,這樣的細(xì)胞就叫COS細(xì)胞。1010基因組文庫基因組文庫:分離真核生物中某種DNA成分通常是分離供體細(xì)胞中的染色體DNA,酶切后,將這些染色體DNA片段與某種載體相接,而后轉(zhuǎn)入大腸桿菌,建立包含有真核細(xì)胞染色體DNA片斷的克隆株這種克隆株群體稱基因組文庫。11cDNA11cDNA文庫文庫:以m

6、RNA為模板在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下將形成的互補(bǔ)DNA(cDNA)與某種載體相接,而后轉(zhuǎn)入大腸桿菌,建立克隆株,即cDNA文庫(genelibrary)1212轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染:病毒(含噬菌體)DNA及其重組子DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞(或細(xì)菌)的過程。由于噬菌體是細(xì)菌的病毒,因此噬菌體DNA導(dǎo)入大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞也稱轉(zhuǎn)染。1313轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo):以噬菌體為媒介,將外源DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱轉(zhuǎn)導(dǎo)。1414轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化:以質(zhì)粒作為克隆載體將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞。轉(zhuǎn)化作

7、用就是一種基因型細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來自另一種基因型細(xì)胞的DNA,進(jìn)而使原來細(xì)胞的遺傳基因和遺傳性發(fā)生變化的現(xiàn)象。常見:原生質(zhì)粒轉(zhuǎn)化法,化學(xué)轉(zhuǎn)化法和電穿孔法。3鏈的過程。在多數(shù)情況下,新生多肽還需要經(jīng)過轉(zhuǎn)譯后加工和修飾才能成為有活性的蛋白質(zhì)。2727順式作用元件順式作用元件:順式作用元件為一些能與DBP結(jié)合的特定序列DNA片段主要位于真核基因上游含有特有的相似或一致序列決定轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄效應(yīng)。按功能可分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子

8、、沉默子、衰減子、終止子等DNA序列片段。2828反式作用因子反式作用因子:反式作用因子是一組能直接或間接地與DNA的順式作用元件特定序列結(jié)合,發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的核內(nèi)非組蛋白,激活或阻遏基因表達(dá)。是DNA結(jié)合蛋白(DBP),DBP又稱轉(zhuǎn)錄因子(tranionfactTF)分通用轉(zhuǎn)錄因子及轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子兩大類。基因表達(dá)的組織特異性及細(xì)胞周期特異性受上述元件和因子的相互作用所決定。2929轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄因子:能夠結(jié)合在某基因上游特異核苷酸序列上的蛋

9、白質(zhì),活化后從胞質(zhì)轉(zhuǎn)位至胞核,通過識(shí)別和結(jié)合基因啟動(dòng)子區(qū)的順式作用元件啟動(dòng)和調(diào)控基因表達(dá)。3030瞬時(shí)表達(dá)瞬時(shí)表達(dá):外源基因進(jìn)入宿主細(xì)胞后,不整合到受體細(xì)胞染色體而獨(dú)立于其外,隨復(fù)制而出現(xiàn)基因產(chǎn)物,但復(fù)制量不宜太多,否則會(huì)引起細(xì)胞死亡,也不能隨細(xì)胞傳代,因而其表達(dá)的量越來越少最后消失。這種現(xiàn)象稱為瞬時(shí)表達(dá)。3131穩(wěn)定表達(dá)穩(wěn)定表達(dá):具有選擇性標(biāo)記,有完整的哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)錄系統(tǒng),但無真核復(fù)制子的表達(dá)載體,在轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞后,外源基因進(jìn)入

10、真核細(xì)胞后,可將基因整合到細(xì)胞染色體上,可隨細(xì)胞轉(zhuǎn)錄表達(dá)和傳代。通過對轉(zhuǎn)染DNA的陽性細(xì)胞克隆篩選,則可獲得外源基因整合到細(xì)胞染色體中穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞。32tk32tk基因基因:可以合成胸腺嘧啶核苷激酶(thyineKinaseTK),在所有真核細(xì)胞中都有表達(dá)是嘧啶生物合成補(bǔ)救代謝途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶它可催化胸苷磷酸化轉(zhuǎn)變成為dTMP繼續(xù)磷酸化生成dTTP參與DNA的生物合成。通過HAT培養(yǎng)基篩選TK細(xì)胞。同時(shí)也對GCV敏感,是一種常見的自

11、殺基因。3333亮氨酸拉鏈亮氨酸拉鏈:存在于蛋白C末端,為兩組走向平行,帶亮氨酸的α—螺旋形成的對稱二聚體,約為30個(gè)氨基酸,每兩個(gè)亮氨酸之間隔有六個(gè)氨基酸,于是每兩圈螺旋就有一個(gè)亮氨酸,排成一排,從而在2個(gè)α螺旋的蛋白分子之間形成一條拉鏈。形成二聚體后可使肽鏈上富含的堿性氨基酸區(qū)與亮氨酸拉鏈形成的整體結(jié)構(gòu)與DNA親和力較強(qiáng)而發(fā)生結(jié)合。3434基因突變基因突變:指基因組DNA分子在結(jié)構(gòu)上發(fā)生堿基對組成或排列順序的改變(通常只涉及部分序列

12、的變化),并引起個(gè)體表型的改變而使生物體發(fā)生遺傳變異。3535同義突變同義突變:是指堿基被替代后沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列這是與密碼子的簡并性相關(guān)如CTT、CTC、CTA、CTG的第3位堿基互相替代后其編碼表達(dá)的產(chǎn)物均為亮氨酸因此這種突變不產(chǎn)生突變效應(yīng)。3636錯(cuò)義突變錯(cuò)義突變:是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的序列改變。有些錯(cuò)義突變嚴(yán)重影響到蛋白質(zhì)活性甚至完全失去活性,從而影響了表型。如果該基因是必需基因,則該突變?yōu)橹滤劳蛔儭?7.37

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