沉降菌監(jiān)測方法

1、規(guī)范性引用文件本標準參考了ISO146981《潔凈間以及相關環(huán)境控制第1部分：微生物控制》，ISOTS111331：2000（英文版）《食品和動物飼料的微生物學培養(yǎng)基制備和生產(chǎn)指南第1部分：實驗室培養(yǎng)基制備的質量保證通用指南》。本標準代替GBT162941996《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法》。本標準與GBT162941996的主要區(qū)別為：—增加了確定最少采樣點數(shù)目的方法；—修改了原標準4.8.3.2，改為“4.10.2采用大豆

2、酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于2d，采用沙氏培養(yǎng)基（SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在20℃~25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于5d?！保弧緲藴试黾恿?.8“日常監(jiān)控”的內容，增加了潔凈室（區(qū)）空氣微生物濃度控制的糾偏限度和警戒限度的設立和如何確定取樣頻次的內容。本標準的附錄A、附錄B是規(guī)范性附錄。本標準的附錄C是資料性附錄。本標準由國家食品藥品監(jiān)督管理局提出并歸口。沉降菌settl

3、ingmicrobe用本標準提及的方法收集空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。3.2沉降菌菌落數(shù)settlingmicrobeplatecount規(guī)定時間內每個平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目，以個皿表示。方法提要本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內的活微生物數(shù)

4、，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。4.2人員的職責及培訓潔凈室（區(qū)）的測試人員應進行本專業(yè)的培訓并獲得相應資格后才能履行對潔凈室（區(qū)）測試的職責，其中包含涉及的衛(wèi)生知識和基本微生物知識。潔凈室（區(qū)）的測試人員應選與生產(chǎn)操作的空氣潔凈度級別要求相適應的穿戴方式，外面的衣服不能帶進100000級以上的區(qū)域。4.3儀器儀器應包括：a）培養(yǎng)皿；b）培養(yǎng)基（見本標準附錄B）；c）恒溫培養(yǎng)箱；d）高壓蒸汽滅菌器。4.3.1培養(yǎng)皿一般采用φ90mm

5、15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿。4.3.2培養(yǎng)基大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏培養(yǎng)基（SDA）或其他用戶認可并經(jīng)驗證了的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄B。4.3.3恒溫培養(yǎng)箱必須定期對恒溫培養(yǎng)箱進行校驗。5.2測試狀態(tài)靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進行測試。靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于2人。沉降菌測試前，被測潔凈室（區(qū)）由使用者決定是否需要預先消毒。測試報告中應標明測試時所采用的狀態(tài)和室內測試人員數(shù)。5.3測試時間5.3.1在空態(tài)或靜態(tài)a測試時，對單

6、向流潔凈室（區(qū)）而言，測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min后開始。對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于30min后開始。在靜態(tài)b測試時，對單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過10min自凈后開始；對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min自凈后開始。5.3.2在動態(tài)測試時，則須記錄生產(chǎn)開始的時間以及測試時間。5.4沉降菌菌落數(shù)計算5.4.1采樣點數(shù)

7、量及其布置5.4.1.1最少采樣點數(shù)目沉降菌測試的最少采樣點數(shù)目可參照GBT162922010。5.4.1.2采樣點的位置沉降菌的采樣點位置可參照GBT162922010。a）工作區(qū)采樣點位置離地0.8m~1.5m左右（略高于工作面）；b）可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。采樣點布置的規(guī)則見附錄A。5.4.2最少培養(yǎng)皿數(shù)在滿足最少采樣點數(shù)目的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表1。表1最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（φ90mm）

8、10014100002100000230000025.4.3采樣次數(shù)每個采樣點一般采樣一次。5.4.4采樣注意事項5.4.4.1對于單向流潔凈室（區(qū)）或送風口，采樣器采樣口朝向應正對氣流方向；對于非單向流潔凈室（區(qū)），采樣口向上。5.4.4.2布置采樣點時，至少應盡量避開塵粒較集中的回風口。5.4.4.3采樣時，測試人員應站在采樣口的下風側，并盡量少走動。5.4.4.4應采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。5.4.4.