磷酸鹽緩沖液配制方法_第1頁
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文檔簡介

1、磷酸鹽緩沖液（PBS）配制方法0.01MPBSPBS(135mMNaCl2.7mMKCl1.5mMKH2PO48mMK2HPO4，pH7.2)PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl137mmolL，KCl2.7mmolL，Na2HPO44.3mmolL，KH2PO41.4mmolL稱7.9gNaCl，0.2gKCl，0.24gKH2PO4(1.44gNa2HPO4)和1.8gK2HPO4，溶于800ml蒸餾水中，用HCl調節(jié)溶液的

2、pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L。保存于4℃冰箱中即可。需要注意的是，通常所說的濃度0.01M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na離子或K離子的濃度，Na離子和K離子只是用來調節(jié)滲透壓的。母液的配制：0.2MNa2HPO4：稱取71.6gNa2HPO412H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4：稱取31.2gNaH2PO42H2O，溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2MPB(pH=7.4

3、，100ml)：取19ml0.2molL的NaH2PO4，81ml0.2molL的Na2HPO4即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應比例適當稀釋即可，如：0.1MPB（PH=7.4）：取500ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。0.01MPB（PH=7.4）：取50ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB（PH=7.4）：取100ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCl的話

4、，加入NaCl至0.9%（g100ml）即可。另：其它各種另PH值的0.2MPB（100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.2

5、28727.323773.滴加濃鹽酸將pH值調節(jié)至8.0，然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：上述PBSBuffer中無二價陽離子，如需要，可在配方中補充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。0.05molLPBS(磷酸緩沖液PhosphateBufferSolution，PBS)的配制：甲液：0.05molLNa2HPO4溶液：稱取磷酸氫二鈉9.465g7.099g加蒸餾水至1000ml乙液：0.0

6、5molLKH2P04溶液:稱取磷酸二氫鉀9.07g6.803g加蒸餾水至1000m1。將甲乙液分裝在棕色瓶內，于4℃冰箱中保存，用時甲、乙兩液各按不同比例混合，即可得所需pH的緩沖液見下表:pH甲液ml乙液mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.0

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