小鼠乙型肝炎e抗體hbeab酶聯(lián)免疫分析elisa

1、1小鼠乙型肝炎小鼠乙型肝炎e抗體抗體(HBeAb)(HBeAb)酶聯(lián)免疫分析（酶聯(lián)免疫分析（ELISAELISA）試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中乙型肝炎e抗體(HBeAb)的含量。實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)水平。用純化的小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入

2、乙型肝炎e抗體(HBeAb)，再與HRP標(biāo)記的乙型肝炎e抗體(HBeAb)抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙型肝炎e抗體(HBeAb)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)濃度。試劑盒組成試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書

3、1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：2700ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液（20ml20倍）1瓶（20ml30倍）1

4、瓶28℃保存注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。2封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。3各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡1530分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。5請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含

5、量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，3重復(fù)5次，拍干。6.溫育：操作同3。7.洗滌：操作同5。8.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.9.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定

6、應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。試劑盒性能：試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%計(jì)算：計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。檢測范圍：檢測范圍：100