重金屬污染土壤淋洗前后生態(tài)毒理診斷方法研究.pdf

1、在我國，隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，重金屬對土壤和農(nóng)作物的污染問題越來越突出，部分地區(qū)土壤重金屬污染現(xiàn)象十分嚴(yán)重，一些修復(fù)工作也逐步展開。在實際工作中，Na2EDTA螯合劑淋洗是一種常用方法，但在修復(fù)效果的評價方面往往以目標(biāo)污染物含量為標(biāo)準(zhǔn)，不能準(zhǔn)確反映淋洗后土壤的毒性。本試驗針對化學(xué)分析的不足采用生態(tài)毒理診斷方法，在生物個體、細胞和DNA三個水平上評價Na2EDTA淋洗后土壤的生態(tài)毒性，以期找到適合檢測修復(fù)后土壤生態(tài)毒性的方法。
　　

2、 試驗中土壤取自從化小坑村某廢棄電鍍廠，主要目標(biāo)污染物是Cr、Ni、Cu、Zn等重金屬，于2008年12月至2010年3月在華南師范大學(xué)和華南環(huán)科所土壤修復(fù)實驗室中進行，研究結(jié)果如下：
　　 1、土壤重金屬生態(tài)毒性的表達：一般認為，重金屬有效態(tài)是造成生物損傷的主要重金屬成分，所以試驗中采用提取有效態(tài)的方法表達土壤的生態(tài)毒性。為了避免有效態(tài)提取劑本身成分對生物影響，選取去離子水作為土壤重金屬有效態(tài)提取液。試驗中土壤淋洗時間包括2

3、h、6h、12h、18h和24h五個梯度。
　　 2、試驗方法以及檢測指標(biāo)的選擇：
　　 植物試驗：選用蘿卜作為受試植物，以14d生物量抑制率和根伸長抑制率作為監(jiān)測指標(biāo)，通過線性回歸分析得出根伸長抑制率比生物量抑制率與土壤有效態(tài)稀釋比例相關(guān)性好，適合用作生態(tài)毒理評價。因鮮重與土壤有效態(tài)稀釋比例相關(guān)性較干重要高，生物量選擇時宜選用鮮重進行回歸分析。
　　 發(fā)光菌毒性檢驗：用BHP9511型水質(zhì)毒性快速檢測儀以青?；?/p>

4、菌（Vibrioqinghaiensis SP.nov）檢測淋洗后土壤毒性，對數(shù)回歸分析結(jié)果表明土壤有效態(tài)稀釋比例與發(fā)光抑制率有較好的相關(guān)性（R2>0.90），且方法運用比較成熟，是一種很好的評價淋洗后土壤的方法。
　　 蠶豆根尖微核試驗：以不同淋洗時間土壤有效態(tài)提取液分別染毒，觀察細胞微核，計算各個處理的細胞微核率，結(jié)果表明2h、6h處理組微核率和對照有顯著性差異，12h、18h和24h與對照無顯著差異。蠶豆微核試驗是水質(zhì)檢測

5、中一種常用的診斷方法，具有成熟的實驗流程和獲得認可的毒性分級標(biāo)準(zhǔn)，在修復(fù)后土壤毒性分級中具有一定的借鑒作用。
　　 單細胞凝膠電泳試驗（SCGE）：又稱彗星試驗，是一種以單細胞檢測DNA損傷的方法，用蠶豆根尖細胞作為試驗材料，不同淋洗時間土壤有效態(tài)提取液染毒，在CASP軟件中分析彗星圖像，指標(biāo)包括彗尾長度、DNA百分比、尾距和Olive尾距，結(jié)果通過SPSS統(tǒng)計檢驗表明單細胞凝膠電泳試驗敏感度高，方法簡便，適合作為修復(fù)后土壤的毒

6、性評價方法。
　　 3、驗結(jié)果分析：
　　 在植物試驗和發(fā)光菌毒性檢測試驗中分別通過回歸分析估算各處理的EC50稀釋比例，結(jié)果表明EC50由大到小分別是24h、18h、12h、6h和2h淋洗土壤，24h淋洗土壤生態(tài)毒性最小，2h最大。在蠶豆微核試驗中，6h淋洗土壤微核率最高，其次是2h、12h、18h和24h淋洗土壤，其中12h、18h和24h淋洗土壤微核率與對照無顯著性差異，其他三組與對照差異顯著。單細胞凝膠電泳試驗結(jié)