酶標(biāo)儀工作原理及使用方法

1、酶標(biāo)儀簡介：酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測器?？珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計即用比色法來進(jìn)行分析。測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。酶標(biāo)儀原理：酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同.圖示是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工

2、作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果.微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板，從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.而另一些酶標(biāo)儀

3、則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測，因此省去了XY方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單.微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液.光是電磁波，波長100nm~400nm稱為紫外光，400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回

4、來。綠色植物之所以是綠色，是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光，但對綠色不吸收，反射出來，所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。隨著檢測方式的發(fā)展，擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀，可檢測吸光度(Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長，而

5、濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片，只能截取特定波長進(jìn)行檢測。檢測單位檢測單位光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。T=(3020)360020)=0.0028OD=log(1T)=log(10.0028)=2.552中心定位中心定位儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時，儀器其實(shí)要

6、進(jìn)行35個點(diǎn)的測量，選取最中間的5個點(diǎn)的均值為本孔的OD值。光源的參照通道光源的參照通道參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。用途和其它提示用途和其它提示用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。質(zhì)量控制質(zhì)量控制質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制?？瞻仔Ｕ瞻仔Ｕ幸恍┰噭┖械恼f明書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。檢