動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究ppt課件

1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究,1,第一節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用,一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn) ⑴ 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)條件容易嚴(yán)格控制，動(dòng)物的選擇在年齡、體重、種屬、品系、雌雄、健康狀況、病情（模型復(fù)制）等方面容易做到均衡一致。⑵ 受試動(dòng)物的入選與分組比較簡單，容易做到完全隨機(jī)化，一般采用簡單隨機(jī)分組而不用分層。,2,⑶ 受試動(dòng)物的選擇容易做到整齊劃一，可以集中一次性隨機(jī)選取，實(shí)驗(yàn)觀察容易集中進(jìn)行，研究期限相對(duì)較短。⑷ 動(dòng)物不會(huì)像人一樣有復(fù)雜的心理活動(dòng)

2、，因而感情因素影響較小，較少受到誤導(dǎo)，主觀偏倚發(fā)生的可能性較小，不存在霍桑效應(yīng)和安慰劑效應(yīng)問題。,3,⑸ 動(dòng)物施加任何處理因素都會(huì)無條件地接受，因而依從性好。⑹ 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的醫(yī)學(xué)倫理與科研道德困擾較少。⑺ 實(shí)行開放式實(shí)驗(yàn)，無需采用盲法。⑻ 可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟捎萌魏螌?duì)照形式。⑼ 不存在受試對(duì)象的知情同意和經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償問題。,4,二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用 在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)性研究中，常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有：小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、沙鼠、兔、犬、貓、豬、羊

3、、雞、鴿、蛙和蟾蜍等。 （一）小鼠 小鼠屬于哺乳綱、嚙齒目、鼠科。小鼠繁殖周期短，生長速度快，容易飼養(yǎng)，操作方便，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科研中用途最廣泛和最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。,5,⑴ 藥學(xué)、藥理、毒理學(xué)研究 ⑵ 腫瘤學(xué)研究 ⑶ 傳染性疾病的研究 ⑷ 免疫學(xué)研究 ⑸ 遺傳學(xué)研究 ⑹ 內(nèi)分泌疾病的研究 ⑺ 計(jì)劃生育研究 ⑻ 呼吸、消化系統(tǒng)疾病研究 ⑼ 燒傷、凍傷、放射病的物理損傷性研究,6,（二）大鼠 大鼠屬于哺乳綱、

4、嚙齒目、鼠科。常用的大鼠為大白鼠，是野生褐鼠的變種。大鼠繁殖力強(qiáng)，易飼養(yǎng)，體形大小合適，給藥容易，采樣量合適、方便。畸胎發(fā)生率低，行為多樣化，是醫(yī)學(xué) 科研 中最常用的 僅次于小鼠用量的 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。,7,⑴ 藥理、毒理學(xué)研究 ⑵ 行為學(xué)研究 ⑶ 營養(yǎng)學(xué)研究 ⑷ 內(nèi)分泌學(xué)研究 ⑸ 心血管疾病研究 ⑹ 腫瘤學(xué)研究 ⑺ 傳染病、呼吸系統(tǒng)疾病、糖尿病、白內(nèi)障、內(nèi)耳中耳疾病、老年醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)和實(shí)驗(yàn)

5、外科學(xué)的研究,8,（三）豚鼠 豚鼠屬于哺乳綱、嚙齒目、豚鼠科，又名天竺鼠，荷蘭豬。豚鼠性情溫順，繁殖快，飼養(yǎng)容易，是較早用于生物醫(yī)學(xué)研究的常用動(dòng)物。 ⑴ 藥理、毒理學(xué)研究 ⑵ 變態(tài)反應(yīng)研究 ⑶ 傳染病研究 ⑷ 耳科學(xué)研究 ⑸ 營養(yǎng)缺乏癥,9,（四）地鼠 又名黑線倉鼠，哺乳綱、嚙齒目、鼠科。地鼠常用的是金黃地鼠（敘利亞地鼠），其次是中國地鼠（黑線地鼠或背紋地鼠）。地鼠使用范圍和用量僅次于小鼠和大鼠

6、。 ⑴ 生理學(xué)研究 ⑵ 遺傳學(xué)研究 ⑶ 腫瘤學(xué)研究 ⑷ 傳染病學(xué)研究 ⑸ 糖尿病研究 ⑹ 營養(yǎng)學(xué)研究 ⑺ 狂犬疫苗、乙腦疫苗的制備及檢定等,10,（五）沙鼠哺乳綱、嚙齒目、倉鼠科。 ⑴ 寄生蟲學(xué)研究 ⑵ 微生物學(xué)研究 ⑶ 腫瘤學(xué)研究 ⑷ 腦病研究 ⑸ 內(nèi)分泌學(xué)研究 ⑹ 代謝性疾病研究 ⑺ 復(fù)制急、慢性鉛中毒模型，篩選抗抑郁藥和抗絲蟲藥物等。,11,

7、（六）兔 哺乳綱，兔形目，兔科。供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)用的兔主要有中國白家兔、新西蘭白兔、日本大耳白兔、荷蘭兔、青紫藍(lán)兔、波蘭兔等。 ⑴ 心血管疾病的研究 ⑵ 免疫學(xué)、微生物學(xué) 和生物制品方面的研究 ⑶ 發(fā)熱研究和致熱原檢測(cè),12,⑷ 生殖生理和避孕藥的研究 ⑸ 眼科學(xué)研究 ⑹ 呼吸系統(tǒng)、消化 系統(tǒng)疾病研究 ⑺ 泌尿系統(tǒng)疾病 ⑻ 物理性損傷研究 ⑼ 藥物檢驗(yàn)、變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)等方面的研究

8、 ⑽ 化妝品致畸因子的研究,13,(七) 犬 哺乳綱、食肉目、犬科。體格健壯，耐受力強(qiáng)，容易馴化，中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)比較發(fā)達(dá)，生理上沒有汗腺,食道全部由橫紋肌構(gòu)成。 ⑴ 實(shí)驗(yàn)外科學(xué)研究 ⑵ 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究 ⑶ 疾病動(dòng)物模型 ⑷ 藥理、毒理學(xué)研究 ⑸ 肝病研究等。,14,第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇,一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇原則⑴ 盡量選擇與人體結(jié)構(gòu)、機(jī)能、代謝及疾病 特征相

9、似的動(dòng)物；⑵ 選用其解剖、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康膭?dòng)物；⑶ 選用對(duì)擬施加的處理因素反應(yīng)敏感、穩(wěn)定 的動(dòng)物；,15,⑷ 選用結(jié)構(gòu)功能簡單又能反映研究指標(biāo)的動(dòng)物。⑸ 選用患有人類類似疾病近交系或突變系動(dòng)物。⑹ 選用與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、技術(shù)條件、實(shí)驗(yàn)方法等相 適應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物。⑺ 在不影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c結(jié)果的前提下，選擇最 易獲得、最經(jīng)濟(jì)、便于操作管理的動(dòng)物。 ⑻ 選用具有質(zhì)量合格證的動(dòng)物。,16,二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬?不同種類

10、的動(dòng)物對(duì)藥物的反應(yīng)既有共同性，也有特殊性。 ?嗎啡對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用，在狗、兔、大鼠、猴主要表現(xiàn)為中樞抑制，而在小鼠和貓則可能引起中樞興奮。 ?以嘔吐為指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)用狗和貓為宜，如果選用家兔和鼠類，則肯定要失敗，因?yàn)榧彝煤褪箢惒粫?huì)嘔吐。,17,?家兔體溫變化靈敏，故常用于觀察研究解熱藥物和檢查致熱原，對(duì)于體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定的動(dòng)物如大鼠和小鼠等，則不宜選用。 ?貓、狗和大白鼠的血壓穩(wěn)定，適用于觀察藥物對(duì)血壓的影響。 ?過敏反應(yīng)研究宜選用豚

11、鼠，因?yàn)殡嗍笠子谥旅簟??在燒傷實(shí)驗(yàn)研究中，豬是比較理想的動(dòng)物。豬的皮膚組織結(jié)構(gòu)與人相似血液學(xué)和血液化學(xué)的各種常數(shù)亦與人相似。,18,三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品系 ●同種不同品系的動(dòng)物，對(duì)同一藥物的敏感性和反應(yīng)性也存在很大的差異。 ● CFW系小鼠對(duì)馬血清表現(xiàn)強(qiáng)烈過敏反應(yīng)，而CF＃系小鼠卻相當(dāng)?shù)啬褪堋?●Ａ、C3HA、津白Ⅱ號(hào)等品系小鼠容易致癌，而C57BL、津白Ⅰ號(hào)小鼠就不容易致癌 。●不同品系小鼠的自發(fā)腫瘤的發(fā)生率也有很大差異， C

12、3H、Ａ系小鼠自發(fā)乳腺癌的發(fā)病率很高。,19,四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體差異 （一）年齡、體重 年齡的選擇要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的和不同年齡動(dòng)物的特點(diǎn)而定。除少數(shù)特殊情況外，一般均應(yīng)選成年動(dòng)物來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。常用的各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其生育成熟年齡如下：小鼠6～8周齡；大鼠10～12周齡；豚鼠10～12周齡；家兔4～5月齡；狗8～9月齡。,20,?急性實(shí)驗(yàn)一般選用成年動(dòng)物，對(duì)各種動(dòng)物比較理想的體重要求是：小鼠18～22克，大鼠180～250克，豚鼠45

13、0～700克，家兔2.0～2.5公斤，貓1.5～2.5公斤，狗9～1 5公斤，猴8～15公斤。?慢性實(shí)驗(yàn)最好選用年輕些的動(dòng)物，小鼠15～18克，大鼠90～100克，豚鼠150～200克，家兔1.5～1.8公斤，貓1.0～1.5公斤，狗7～8公斤。,21,（二）性別 實(shí)驗(yàn)表明，不同性別的動(dòng)物其解剖生理特性和對(duì)藥物的敏感性不同。例如AB／Jena系小鼠，雌鼠壽命為100周齡左右，而雄鼠則僅50周左右，如不計(jì)雌雄，進(jìn)行抗衰老研究或慢

14、性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，則必將導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)論。又如雌性大鼠對(duì)麻醉劑的敏感性為雄性大鼠的2.5～3.8倍。 在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，若無特別要求，一般宜選用雌、雄各半。,22,（三）生理狀態(tài) 動(dòng)物的生理狀態(tài)如懷孕、哺乳對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響很大，因此，在一般實(shí)驗(yàn)中不宜采用處于特殊生理狀態(tài)的動(dòng)物。 （四）健康情況 動(dòng)物的健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確與否有直接的影響。用處于衰竭、饑餓、寒冷、炎熱、疾病等情況下的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，必將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)

15、定性。因此，應(yīng)選用健康狀況良好的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。,23,第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分級(jí),國際分級(jí)：普通動(dòng)物、無特定病原體動(dòng)物、悉生動(dòng)物、無菌動(dòng)物四個(gè)等級(jí)；國內(nèi)分級(jí)：普通動(dòng)物、清潔動(dòng)物、無特定病原體動(dòng)物、無菌動(dòng)物四個(gè)等級(jí)。,24,（一）普通動(dòng)物（CV）--- 一級(jí)動(dòng)物?微生物學(xué)控制要求最低，不得攜帶能感染人類的人獸共患病原體和體外寄生蟲以及能引起動(dòng)物自身烈性傳染病的病原體，如流行性出血熱病毒、鼠痘病毒、沙門菌、弓形體、體外寄生蟲、致病性皮膚

16、真菌等。?主要用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)、科研預(yù)實(shí)驗(yàn)、一些要求不嚴(yán)格的短期實(shí)驗(yàn)和某些生物制品的原材料生產(chǎn)等，不適合正規(guī)的科學(xué)研究。,25,（二）清潔動(dòng)物（CL）---- 二級(jí)動(dòng)物◎是指除不能攜帶普通動(dòng)物傳染病的病原體外，還不能攜帶對(duì)動(dòng)物危害大、對(duì)科研干擾大的病原體?！驀鈱?shí)驗(yàn)動(dòng)物分級(jí)中沒有清潔動(dòng)物級(jí)，一般科學(xué)實(shí)驗(yàn)均采用無特定病原體動(dòng)物和無菌動(dòng)物。由于我國普及無特定病原體動(dòng)物尚有一定條件困難，清潔動(dòng)物作為一種過渡，已在我國得到了廣泛應(yīng)用。,26,

17、（三）無特定病原體動(dòng)物（SPF）---三級(jí)動(dòng)物 是指除應(yīng)排除一、二級(jí)病原體外，還不能攜帶主要潛在感染或條件致病病原和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體。 SPF動(dòng)物作為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可適用于所有科研實(shí)驗(yàn)。,27,（四）無菌動(dòng)物（GFA）-- 四級(jí)動(dòng)物 是指用現(xiàn)代技術(shù)手段從動(dòng)物體內(nèi)、外檢測(cè)不到一切生命體。無菌動(dòng)物為科學(xué)實(shí)驗(yàn)中要求最高的動(dòng)物，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、放射醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)、營養(yǎng)代謝、藥理學(xué)和毒理學(xué)、老年

18、病學(xué)、心血管病學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域。 目前我國已能大量生產(chǎn)的無菌動(dòng)物有小鼠、大鼠和豚鼠。,28,（五）悉生動(dòng)物（GNA）--- 已知菌動(dòng)物 是指動(dòng)物體內(nèi)所攜帶的其他生命體是已知的，并在屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)的動(dòng)物。 悉生動(dòng)物與無菌動(dòng)物有許多相似之處，但又可彌補(bǔ)無菌動(dòng)物的某些缺點(diǎn)，飼養(yǎng)較容易?？蓱?yīng)用于微生物學(xué)、菌群失調(diào)現(xiàn)象、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、生理學(xué)、骨髓移植、病毒學(xué)、外科感染控制等研究領(lǐng)域。,29,,,,,,,,總

19、結(jié)： 動(dòng) 物 的 入 選,1. 種 屬2. 品 系3. 年 齡4. 體 重5. 性 別6. 級(jí) 別7. 合格證,,,30,第四節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行,一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組與標(biāo)記（一）分組 ⑴ 摸球或抽簽法 例如用40只雌雄各半，年齡體重大致相等的小鼠分成四個(gè)組。先將小鼠按體重大小順序排列，雄鼠編為1～20號(hào)，雌鼠編為21～40號(hào)。 然后紅黃藍(lán)黑四種顏色的球表示甲、乙、丙、

20、丁四組，將數(shù)量相等４種顏色的球放入一個(gè)口袋里，每次摸取時(shí)都要充分混勻。,31,?每次取一個(gè)，記下顏色后再放回口袋。若第一次摸的是紅球，1號(hào)鼠應(yīng)分到甲組；若第二次摸出的是籃球，2號(hào)鼠應(yīng)分到丙組；若第三次又摸出籃球，可不記再放入袋中；若第四次摸出的是黑球，3號(hào)鼠應(yīng)分到丁組；4號(hào)鼠不必再摸球決定，剩下的乙組就是4號(hào)鼠應(yīng)分入的組。如此，1～4號(hào)鼠即分配完畢。?然后，5～8號(hào)鼠，9～12號(hào)鼠......，也用同樣的方法分配。,32,⑵隨機(jī)

21、數(shù)字表法 隨機(jī)數(shù)字表中的所有數(shù)字都是相互獨(dú)立的，且全部數(shù)字無論從橫行、縱列或斜向等各種順序均呈隨機(jī)狀態(tài)。因此，使用時(shí)可從任何一處開始，向左、向右、向上或向下任一種順序查用均可。?例如，擬將12只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，6只用甲處理，另6只用乙處理。先把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)，再依次將查得的隨機(jī)數(shù)字標(biāo)于編號(hào)下面，如遇單數(shù)分入甲組，遇雙數(shù)分入乙組，隨機(jī)數(shù)字任意取隨機(jī)數(shù)字表中某一行的12個(gè)數(shù)字：,33,動(dòng)物編號(hào)：01 02 03 04 05 06 0

22、7 08 09 10 11 12隨機(jī)數(shù)字：4 4 1 7 1 6 5 8 0 9 7 9組 別： 乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 乙 乙 甲 甲 甲 如果要求各組動(dòng)物數(shù)相等，就應(yīng)從甲組撥出一個(gè) 到乙組。撥出的方法是看下一個(gè)隨機(jī)數(shù)字是幾就 撥甲組中的那一個(gè)，本例下一個(gè)隨機(jī)數(shù)字是8，因 甲組共有七只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，故應(yīng)再往下查一個(gè)是3， 就把甲

23、組第三個(gè)5號(hào)動(dòng)物撥入乙組。,34,（二）標(biāo)記 常用方法有：染色法、耳緣剪孔法、烙印法和號(hào)牌法。 1. 染色法 用毛筆或棉簽蘸取化學(xué)藥品，在動(dòng)物體表的不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同編號(hào)。常用的染液有3%～5%的苦味酸溶液（黃色）、2%的硝酸銀溶液（咖啡色）、0.5%的中性紅溶液（紅色）和煤焦油酒精溶液（黑色）。,35,?標(biāo)記的原則是“先左后右，先上后下”。具體編號(hào)順序：左前腿涂有斑點(diǎn)的記為1號(hào)，左側(cè)腰部記為2號(hào)，左后腿記為3號(hào)，

24、頭部記為4號(hào)，腰背部記為5號(hào)，尾部記為6號(hào)，右前腿記為7號(hào)，右側(cè)腰部記為8號(hào)，右后腿記為9號(hào)。如果動(dòng)物編號(hào)超過10，需要編10～100號(hào)時(shí)，可用兩種顏色配合使用，其中一種顏色代表個(gè)位數(shù)，另一種代表十位數(shù)。例如，用紅色代表十位數(shù)，黃色代表個(gè)位數(shù)，那么左前腿上標(biāo)記紅色，左側(cè)腰部標(biāo)記黃色者即為12號(hào)，以此類推。,36,第五節(jié) 人類疾病模型的復(fù)制,概念：疾病模型是指為醫(yī)學(xué)科學(xué)研究而建立的，具有人類疾病模擬表現(xiàn)的各種疾病材料。一、人類疾病模型

25、的條件⑴ 必須能反映現(xiàn)實(shí)原型的本質(zhì)特征和關(guān)系；⑵ 能夠?qū)λ芯康膯栴}進(jìn)行定性定量分析，并能得出一定的解（結(jié)果）；⑶ 在模型上得出的解（結(jié)果），必須能夠回到具體研究對(duì)象（原型）中去解決實(shí)際問題。,37,二、復(fù)制疾病模型的目的和用途⑴ 用于探討和揭示疾病的發(fā)病病因、發(fā)病機(jī)理、病理變化和病程轉(zhuǎn)歸等；⑵ 用于探討和尋找新的診斷和治療方法；⑶ 用于篩選和研制新藥、新生物制品、新醫(yī)療器械以及它們的療效或使用效果判定。三、復(fù)制疾病模型應(yīng)

26、遵循的原則（一）盡可能與人類疾病相近相似,38,（二）應(yīng)當(dāng)具有可重復(fù)性和一致性（三）必須保證其可靠性和確定性（四）要注意其適用性和可控性（五）盡量做到既經(jīng)濟(jì)又易行可行四、復(fù)制疾病模型的基本步驟（一）自發(fā)性疾病動(dòng)物模型 自發(fā)性疾病動(dòng)物模型包括先天（原發(fā)性）自發(fā)性和后天（繼發(fā)性）自發(fā)性兩種類型，它們的共同特點(diǎn)是自發(fā)，無需人工復(fù)制。,39,（二）誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型 誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型，其特點(diǎn)是必須經(jīng)過人工干預(yù)，必須

27、施加一定的誘發(fā)因素，整個(gè)過程即人工復(fù)制。 ?直接復(fù)制：即非遺傳操作方式，是直接在所選擇的動(dòng)物身上復(fù)制出所需要的疾病模型。?間接復(fù)制：即遺傳操作方式，是在動(dòng)物母代身上復(fù)制，而在其子代身上才得以發(fā)病，后者才是我們所需要的疾病模型，這種動(dòng)物被稱為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。,40,1．直接復(fù)制的基本步驟 第一步，選擇動(dòng)物。可根據(jù)其需要和可行性選擇最合適的動(dòng)物，一般雌雄各半，特殊要求例外。 第二步，選擇誘發(fā)因素。包括生物因素、化學(xué)因素、物理

28、因素等。最常用的是化學(xué)藥品、細(xì)菌、射線、特殊飲食等。 第三步，選擇誘發(fā)途徑。多為靜脈注射、腹腔接種、粘膜涂抹、皮膚劃痕、體外照射、喂飼等。,41,第四步，進(jìn)行人工實(shí)驗(yàn)誘發(fā)復(fù)制。復(fù)制的具體操作技術(shù)可參見有關(guān)專業(yè)書籍，這里不再一一介紹。 第五步，結(jié)果檢測(cè)與分析。復(fù)制是否成功，必須通過結(jié)果檢測(cè)與分析方可判定。 第六步，重復(fù)驗(yàn)證。為確保模型的可靠性和可重復(fù)性，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)復(fù)制加以驗(yàn)證。只有可重復(fù)的模型才具有準(zhǔn)確性和可靠性，

29、通過模型獲得的模擬實(shí)驗(yàn)結(jié)果才經(jīng)得起科學(xué)檢驗(yàn)。,42,2．遺傳操作復(fù)制的基本步驟 第一步，選擇動(dòng)物。動(dòng)物必須是健康雌性，多選擇小鼠。 第二步，選擇目的基因。可根據(jù)需要選擇某疾病的遺傳基因或缺陷基因。 第三步，選擇操作途徑。最常用的顯微注射法和病毒感染法。,43,第四步，進(jìn)行遺傳操作。首先克隆目的基因——→其次經(jīng)顯微注射把目的基因直接導(dǎo)入受精卵雄原核或早期胚胎干細(xì)胞中——→再次把處理后的受精卵導(dǎo)入假母輸卵管或子宮內(nèi)—

30、—→最后經(jīng)培育分娩出子代。 第五步，結(jié)果檢測(cè)驗(yàn)證。用目的基因探針檢測(cè)子代個(gè)體，如果檢測(cè)到這種導(dǎo)入的外源性基因，即標(biāo)志著轉(zhuǎn)基因動(dòng)物疾病模型復(fù)制成功。,44,世界首只（美國） 人獸混種羊（人類細(xì)胞比例達(dá)15%）,“世界第一只人獸混種羊在美國內(nèi)華達(dá)大學(xué)的伊斯梅爾·贊加尼教授領(lǐng)導(dǎo)的研究小組誕生,目前羊體內(nèi)的人類細(xì)胞比例達(dá)到15%，動(dòng)物細(xì)胞比例為85%。,45