人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則20080904

1、人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則一、引言基因治療是指改變細胞遺傳物質(zhì)為基礎(chǔ)的醫(yī)學(xué)治療。目前僅限于體細胞?；蛑委煹募夹g(shù)和方式日趨多樣性。按基因?qū)氲男问?，分為體外基因?qū)耄╡xvivo）及體內(nèi)基因?qū)耄╥nvivo）兩種形式。前者是在體外將基因?qū)肴思毎?，然后將該細胞注入人體。其制品形式是外源基因轉(zhuǎn)化的細胞，適合在具有專門技術(shù)人才和GMP條件的醫(yī)療單位進行。后者則是將基因通過適當?shù)膶?dǎo)入系統(tǒng)

2、直接導(dǎo)入人體，包括病毒的與非病毒的方法。其制品形式是基因工程技術(shù)改造的病毒或者是重組DNA、或者是DNA復(fù)（混）合物?；蛑委熤苿┓N類較多，因此，本指導(dǎo)原則不可能用一個模式來概括，只能提出一個共同的原則，具體的方案應(yīng)根據(jù)這些原則，確定研究技術(shù)路線。其基本原則：一是必須確保安全與有效，要充分估計可能遇到的風(fēng)險，并提出相應(yīng)的質(zhì)控要求；二是要促進基因治療的研究，并加強創(chuàng)新。對一些新的治療技術(shù)路線的相應(yīng)質(zhì)控要求，可有一定的靈活性，應(yīng)注意到基因治

3、療本身的特點以及它與經(jīng)典的化學(xué)合成藥物或基因工程藥物的差別。目前，一些基因治療研究相對比較成熟，而一些則不夠完善，更加要求研究者在使用該技術(shù)指導(dǎo)原則時不可生搬硬套。為此，研究者應(yīng)加強咨詢和論證，提出一個科學(xué)可行的研究方案，最終獲得確保安全有效的基因治療制品。在向國家藥品監(jiān)督管理局申報臨床試驗時，除須按本指導(dǎo)原則中“研究內(nèi)容和制品質(zhì)量控制“準備材料外，同時需提供下述材料：（1）國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和進展（綜述）。包括：1所用基因的研究現(xiàn)狀和進展

4、；2所用載體的研究現(xiàn)狀和進展；3所用基因?qū)胂到y(tǒng)和方法的研究現(xiàn)狀和進展；4該研究或制品相關(guān)的體外有效性實驗資料；5該研究或制品相關(guān)的動物試驗安全性和有效性資料；6該研究或制品相關(guān)的臨床試驗安全性和有效性資料；7該研究或制品的生產(chǎn)工藝現(xiàn)狀；8該研究或制品的質(zhì)量控制現(xiàn)狀；和生物活性，SDSPAGE、表達盒DNA序列分析、Westernblot分析、轉(zhuǎn)染效率、透射電鏡負染法觀察、復(fù)制型病毒的檢測和其它污染因子的檢測。（2）非病毒基因?qū)胂到y(tǒng)除

5、裸DNA外，一般包括兩個部分：一是哺乳動物細胞表達載體；二是其它載體物質(zhì)，如脂質(zhì)體、多肽或金屬粒子等。為此，需說明目的基因?qū)胂到y(tǒng)的性質(zhì)與內(nèi)容。由于部分病人對青霉素的過敏反應(yīng)，最好不用耐氨芐青霉素基因作耐藥基因，而建議用卡那霉素或新霉素基因作耐藥基因。若用物理方法導(dǎo)入，須提供其詳細方法、步驟，基因?qū)胄始捌浔磉_的生物活性以及導(dǎo)入細胞后基因的穩(wěn)定性，無重排或突變的證據(jù)。每一操作步驟必須鑒定其結(jié)果，通常的鑒定內(nèi)容和方法有：限制性酶切圖譜，

6、基因的PCR擴增，表達盒DNA序列分析，SDSPAGE，Westernblot分析等。（二）細胞庫及工程菌庫的建立和檢定包括包裝和繁殖重組病毒的細胞庫和擴增重組質(zhì)粒的工程菌庫。必須建立三級庫，即原始細胞庫（PrimarySeedBank）、種子細胞庫（MasterCellBank）和工作細胞庫（WkingCellbank）；或原始工程菌庫、種子工程菌庫和工作工程菌庫。1細胞庫（1）原始細胞庫需說明來源、代數(shù)、細胞特性及有關(guān)檔案資料。對主