淹水稻田土壤微生物對(duì)鎘污染毒性的生理生態(tài)反應(yīng)及其抗性czcC基因的克隆與表達(dá).pdf

1、該項(xiàng)目以江西水稻土為研究材料,綜合運(yùn)用傳統(tǒng)及現(xiàn)代分子生物學(xué)手段,采用室內(nèi)培養(yǎng)、純培養(yǎng)及統(tǒng)計(jì)分析相結(jié)合的方法,全面探討了重金屬鎘脅迫對(duì)淹水稻田土壤的微生物生態(tài)及毒性效應(yīng),并篩選分離到一株鎘抗性細(xì)菌,進(jìn)行了抗性czcC基因的克隆與表達(dá),為建立有效的重金屬污染預(yù)警指標(biāo)體系、環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià)及抗鎘微生物的有效利用提供有益的參考.該研究所獲主要結(jié)論如下:1.以江西黃棕稻田土為材料,采用室內(nèi)培養(yǎng)方法,系統(tǒng)研究了不同程度的外源重金屬鎘脅迫對(duì)淹水稻田士壤可

2、培養(yǎng)微生物特別是厭氧微生物種群多樣性、土壤生物活性以及酶活性動(dòng)態(tài)變化過(guò)程的影響.2.在傳統(tǒng)微生物污染生態(tài)研究基礎(chǔ)上,運(yùn)用分子生態(tài)學(xué)手段,建立了有效的土壤總DNA的提取方法,提取到滿(mǎn)足PCR擴(kuò)增的高質(zhì)量的土壤總DNA,獲得用于進(jìn)行DGGE分子指紋分析的特異16S rDNA V3區(qū)擴(kuò)增片段.并采用DGGE分子指紋技術(shù),避開(kāi)傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)過(guò)程,對(duì)重金屬鎘污染條件下稻田土壤微生物種群的基因多樣性進(jìn)行了初步研究.3.微生物純培養(yǎng)生理毒性研究表明,

3、不同微生物純培養(yǎng)對(duì)鎘脅迫的敏感程度不同,G<'+>較G<'->對(duì)Cd<'2+>更為敏感,表現(xiàn)為世代時(shí)間縮短,最高菌濃度下降.固氮菌對(duì)Cd<'2+>非常敏感,當(dāng)Cd<'2+>含量為0.2mg/L時(shí)即完全抑制菌體增殖.4.從長(zhǎng)期重金屬鎘處理土壤中分離純化,獲得一株可在含鎘350mg/L的培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)的抗鎘細(xì)菌菌株,編號(hào)為DKC1,通過(guò)對(duì)該菌株進(jìn)行形態(tài)觀察、Biolog生理生化分析、G+Cmol%測(cè)定及16S rDNA序列同源性比較,鑒定