杜仲葉綠原酸和竹葉多糖降糖顆粒的研究.pdf

1、杜仲葉綠原酸是一種多酚類(lèi)化合物，具有良好的降血糖、降血壓和降血脂等活性。竹葉多糖是一種中等相對(duì)分子質(zhì)量的雜多糖，具有顯著的藥用效果，例如抗氧化作用，降血糖，抗癌活性以及免疫調(diào)節(jié)等作用。而泡騰顆粒是一種使用方便、藥效快、口感佳和便于攜帶和保存的藥劑形式。因此，本實(shí)驗(yàn)將杜仲葉綠原酸和竹葉多糖進(jìn)行復(fù)配制得杜仲葉綠原酸和竹葉多糖降糖顆粒（以下簡(jiǎn)稱:杜竹降糖顆粒），并對(duì)其有效成分進(jìn)行檢測(cè);杜竹降糖顆粒的體外降血糖活性基于HepG2細(xì)胞體外葡萄糖消

2、耗實(shí)驗(yàn)，杜竹降糖顆粒的毒性評(píng)價(jià)是采用HepG2和人臍靜脈細(xì)胞(HUVEC)作為體外細(xì)胞模型進(jìn)行探究。通過(guò)觀察杜竹降糖顆粒對(duì)HepG2和HUVEC細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的影響，并通過(guò)體外葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn)和MTS毒性實(shí)驗(yàn)來(lái)初步探索杜竹降糖顆粒對(duì)HepG2細(xì)胞的降血糖作用和對(duì)HepG2和HUVEC細(xì)胞的毒性作用，探討其可能的機(jī)理。研究結(jié)果表明:
　　1.杜竹降糖顆粒的制備
　　以天然藥物化學(xué)的理論為指導(dǎo)，采用藥物制劑學(xué)的技術(shù)手段，對(duì)杜竹降糖顆

3、粒進(jìn)行了制劑研究，采用酸堿混合制粒法，采用正交優(yōu)化試驗(yàn)選擇最佳處方配比。
　　選擇以檸檬酸:酒石酸(1∶1)作為酸源，以碳酸氫鈉作為碳（堿）源，通過(guò)單因素試驗(yàn)，當(dāng)酸源和碳（堿）源的比例為5∶4時(shí)，制粒效果及口感都良好。采用PEG6000包裹NaHCO3，以用量為45.5％的甘露醇作為填充劑，以用量0.5％的安賽蜜/阿斯巴甜(1∶1)作為矯味劑，以用量為20％的碳酸氫鈉作為碳（堿）源，以用量為25％的檸檬酸/酒石酸(1∶1)為酸源，

4、以用量為4％的PEG6000作為潤(rùn)滑劑，進(jìn)行制備泡騰顆粒。
　　根據(jù)中國(guó)藥典對(duì)泡騰制劑的規(guī)定，溶化時(shí)間均小于300 s，制得的杜竹降糖顆粒符合藥典要求。
　　2.杜竹降糖顆粒功效成分的檢測(cè)
　　參照現(xiàn)行《中國(guó)藥典》相關(guān)規(guī)定對(duì)杜竹降糖顆粒進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)，在鑒別和含量測(cè)定等方面進(jìn)行了研究，分別采用高效液相色譜法和苯酚-硫酸比色法分別對(duì)杜竹降糖顆粒中綠原酸和多糖進(jìn)行含量分析。
　　用薄層色譜法對(duì)樣品中綠原酸進(jìn)行鑒定，供

5、試品色譜中，在與對(duì)照品色譜的相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照色譜沒(méi)有干擾。測(cè)得杜竹降糖顆粒中綠原酸和多糖的回收率、穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性和平均含量的RSD值均小于5％。
　　該方法質(zhì)量控制方法重現(xiàn)性良好、可靠。
　　3.杜竹降糖顆粒降血糖活性
　　以HepG2細(xì)胞作為糖代謝細(xì)胞模型，探究杜竹降糖顆粒體外降血糖活性，觀察四種泡騰顆粒的降糖效果。
　　將杜仲葉與竹葉提取物復(fù)配后的泡騰顆粒的葡萄糖消耗量較

6、單一的竹葉泡騰顆粒葡萄糖消耗量增加了2％～24％，而較單一的杜仲葉泡騰顆粒葡萄消耗量增加了13％～28％;濃度在200μg/mL時(shí)，杜竹降騰顆粒的降糖效果最佳為156.35％。
　　杜竹降糖顆粒的降糖效果較好，杜仲葉綠原酸和竹葉多糖復(fù)配有增效的功能。
　　4.杜竹降糖顆粒體外毒性評(píng)價(jià)
　　杜竹降糖顆粒的毒性是基于HepG2和HUVEC兩種細(xì)胞進(jìn)行體外評(píng)價(jià)，通過(guò)MTS法檢測(cè)細(xì)胞的存活率。
　　竹葉多糖泡騰顆粒和杜仲

7、葉綠原酸泡騰顆粒對(duì)HepG2和HUVEC細(xì)胞生長(zhǎng)有不同程度的抑制作用，而加入杜竹降糖顆粒生長(zhǎng)曲線與對(duì)照組的生長(zhǎng)曲線軌跡相同。杜竹降糖顆粒對(duì)HepG2細(xì)胞的存活率的影響呈劑量依賴關(guān)系，但毒性較小，在濃度為200μg/mL時(shí)細(xì)胞存活率可達(dá)到為99.82％。對(duì)HUVEC細(xì)胞的存活率的影響不明顯，在低濃度時(shí)，杜竹降糖顆粒顆粒具有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，細(xì)胞存活率最高可達(dá)到為105.45％。
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