表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)β受體激動(dòng)劑的研究.pdf

1、β受體激動(dòng)劑即我們熟知的瘦肉精，是一類非法使用在肉類制品上，促進(jìn)牲畜瘦肉生長(zhǎng)、抑制牲畜脂肪合成的苯乙胺類藥物，最為常見的情況是被非法用于豬的飼喂養(yǎng)殖過程中。人食用飼喂了較大劑量瘦肉精的畜產(chǎn)品后可出現(xiàn)惡心、嘔吐、心動(dòng)過速、肌肉震顫等不良反應(yīng)，對(duì)健康帶來嚴(yán)重危害。β受體激動(dòng)劑作為非法添加物添加進(jìn)飼料時(shí)，其使用量往往是正常治療量的數(shù)十倍之多，并且持續(xù)喂藥較長(zhǎng)時(shí)間（通常連續(xù)使用3周以上），非法飼養(yǎng)者為了縮短牲畜飼養(yǎng)周期，這些牲畜屠宰前往往沒有休

2、藥期，這種情況下β受體激動(dòng)劑在肌肉和內(nèi)臟器官會(huì)產(chǎn)生較高濃度的殘留，而且不易被破壞，給食品安全帶來巨大隱患。目前對(duì)動(dòng)物組織中瘦肉精殘留的檢測(cè)方法主要采用色譜技術(shù)以及免疫分析技術(shù)兩類方法，但存在各自局限。
　　本文將表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)特點(diǎn)應(yīng)用于β受體激動(dòng)劑的檢測(cè)當(dāng)中，建立靈敏度高、簡(jiǎn)單、快速的β受體激動(dòng)劑檢測(cè)新方法以滿足監(jiān)管，特別是現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)需要，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、采用化學(xué)還原法，以檸檬酸鈉作為還原劑制備了三

3、種不同粒徑的金納米顆粒溶膠以及一種銀納米顆粒溶膠。然后從粒徑大小、形狀、分布情況對(duì)不同納米溶膠進(jìn)行表征。初步檢測(cè)了四種溶膠與β受體激動(dòng)劑類藥物分子結(jié)合后拉曼信號(hào)的增強(qiáng)效果，通過實(shí)驗(yàn)得到三種金溶膠當(dāng)中加入2mL濃度10mg/mL檸檬酸鈉制備出的金溶膠膠體B尺寸均勻、粒度適中、分散性好，與β受體激動(dòng)劑結(jié)合后拉曼信號(hào)增強(qiáng)效果優(yōu)于另外兩種金溶膠膠體A和膠體C。然后將銀溶膠與金溶膠膠體B對(duì)β受體激動(dòng)劑增強(qiáng)效果進(jìn)行比較，得到銀溶膠與β受體激動(dòng)劑結(jié)合

4、后的增強(qiáng)效果優(yōu)于金溶膠，因此選擇銀溶膠作為表面增強(qiáng)活性基底對(duì)β受體激動(dòng)劑進(jìn)行檢測(cè)。
　　2、優(yōu)化表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)條件，選取了具有代表性的三種β受體激動(dòng)劑硫酸特步他林(TS)、鹽酸班布特羅(BH)、鹽酸氯丙那林（CH)為代表進(jìn)行研究，利用他們具有相同結(jié)構(gòu)部分的特點(diǎn)，找到表面增強(qiáng)拉曼光譜法檢測(cè)β受體激動(dòng)劑的共性方法。通過單因素實(shí)驗(yàn)得到的表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)β受體激動(dòng)劑的最優(yōu)條件為:銀溶膠與待測(cè)溶液添加比例3∶2，調(diào)節(jié)pH值為5，N

5、aCl濃度為0.15 mol/L。
　　3、對(duì)β受體激動(dòng)劑水溶液的表面增強(qiáng)拉曼光譜性質(zhì)進(jìn)行研究。首先對(duì)三種常用β受體激動(dòng)劑的拉曼光譜特征峰進(jìn)行指認(rèn)和歸屬，確定β受體激動(dòng)劑類藥物的拉曼光譜共性特征峰為800-850cm-1，1050 cm-1，1450 cm-1三處，并以此作為β受體激動(dòng)劑存在的定性依據(jù)。然后以CH為代表，考慮兼顧靈敏性和穩(wěn)定性的需要，選擇800-850cm-1處特征峰為定量分析峰，建立β受體激動(dòng)劑水溶液濃度與其特征

6、峰拉曼信號(hào)強(qiáng)度之間的線性關(guān)系用于定量檢測(cè)。得到β受體激動(dòng)劑水溶液在濃度1-10 mg/L范圍內(nèi)，特征峰拉曼信號(hào)強(qiáng)度與待測(cè)物濃度之間關(guān)系滿足方程Y=2483X-763.2，相關(guān)系數(shù)為R2=0.997，檢測(cè)限為0.1mg/L。
　　4、研究了尿液中主要成分對(duì)β受體激動(dòng)表面增強(qiáng)拉曼光譜的影響，建立尿液中β受體激動(dòng)檢測(cè)方法。排除尿素分子在1005 cm-1的干擾因素后，選擇800-850 cm-1和1450 cm-1處特征峰作為快速鑒定尿

7、液中存在β受體激動(dòng)劑類藥物的定性依據(jù)?？紤]兼顧靈敏性和排除雜峰干擾的需要，選擇β受體激動(dòng)劑在800-850cm-1處的拉曼特征峰信號(hào)強(qiáng)度與濃度之間建立線性關(guān)系，建立尿液中β受體激動(dòng)劑的定量檢測(cè)方法。以CH為代表，表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)CH尿液體系在濃度1-10 mg/L范圍內(nèi)，存在良好的線性相關(guān)關(guān)系，其特征峰強(qiáng)度與濃度之間滿足方程Y=2113X+6006，相關(guān)系數(shù)為R2=0.999，最低檢出限為0.5mg/L。為了進(jìn)一步對(duì)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)

8、比采用高相液相色譜法建立對(duì)β受體激動(dòng)劑的檢測(cè)方法。以峰面積對(duì)CH濃度建立線性關(guān)系，得到線性方程為Y=0.03018X+0.04667，相關(guān)系數(shù)r=0.999;結(jié)果表明CH濃度在0.5-10mg/L時(shí)，濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。此方法的最小檢出限為0.15mg/L。分別用SERS法和HPLC方法對(duì)一批未知濃度的CH盲樣進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果具有很好的一致性。最后從前處理、檢測(cè)限、準(zhǔn)確性三個(gè)方面將兩種方法進(jìn)行比較，得出表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)尿