成束狀阿拉伯半乳糖蛋白(FLA)家族基因在桃果實(shí)采后貯藏期間的表達(dá)分析.pdf

1、桃果實(shí)因其濃郁的香味、柔軟多汁的口感，以及豐富的營(yíng)養(yǎng)深受消費(fèi)者的喜愛。桃果實(shí)為典型的呼吸躍變型果實(shí)，采后在常溫下迅速進(jìn)入呼吸和乙烯高峰，從而加速衰老和軟化，極易受到機(jī)械損傷和病原微生物侵染而導(dǎo)致大量腐爛。低溫冷藏是抑制桃果實(shí)采后呼吸代謝進(jìn)、延長(zhǎng)貨架期的有效手段。然而，桃果實(shí)又屬于冷敏性果實(shí)，低溫貯藏環(huán)境會(huì)導(dǎo)致果實(shí)冷害的發(fā)生，主要表現(xiàn)為出汁率下降、果肉絮敗、果心褐變等不良性狀。成束狀阿拉伯半乳糖蛋白（FLA）作為一類與細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)相關(guān)的糖蛋

2、白，與果實(shí)軟化之間的聯(lián)系及其作用還不清楚。為此，本研究以“湖景蜜露”桃果實(shí)為試材，鑒定了12個(gè)假定的FLA家族成員，并對(duì)它們進(jìn)行了生物信息學(xué)分析，測(cè)定了這些成員在桃生長(zhǎng)發(fā)育組織中的表達(dá)；分析了褪黑素處理后的桃果實(shí)細(xì)胞壁果膠中性糖的組成變化，從細(xì)胞壁代謝的層面揭示了褪黑素緩解冷害的機(jī)理；研究了外源乙烯和ABA處理對(duì)FLA成員在桃果實(shí)成熟期間的表達(dá)影響，以期為闡明果實(shí)軟化的分子調(diào)控機(jī)制提供新的視角。研究結(jié)果如下：
　?。?）成束狀阿拉

3、伯半乳糖蛋白（FLA）是阿拉伯半乳糖蛋白（AGP）大家族中的亞族，含有阿拉伯半乳糖糖基化區(qū)域和假定的成束域（FAS）。從桃基因組數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出了12個(gè)假定的FLA序列，對(duì)這12個(gè) FLA的蛋白結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示PpFLA7不具有特定的阿拉伯糖或半乳糖糖基化位點(diǎn)，不屬于典型的FLA家族。PpFLA6的氨基酸組成和保守域的分布與其它成員相比差別較大。聚類分析結(jié)果表明PpFLAs家族可以分為CladeⅠ，CladeⅡ，CladeⅢ三類。利用

4、熒光定量PCR（qPCR）對(duì)不同組織和成熟階段桃果實(shí)進(jìn)行表達(dá)分析，發(fā)現(xiàn)各個(gè)成員在不同時(shí)期的桃組織中差異化表達(dá)。其中，PpFLA4在桃果實(shí)成熟階段顯著上調(diào)表達(dá)，暗示了它可能在桃果實(shí)的成熟階段扮演重要角色。
　?。?）低溫貯藏下的桃果實(shí)在經(jīng)過褪黑素處理后質(zhì)地特性發(fā)生了改變，其中包括果實(shí)硬度、內(nèi)聚力和粘附力，出汁率得到了明顯提升。中性糖（阿拉伯糖和半乳糖）的流失現(xiàn)象出現(xiàn)在貯藏第7天桃果實(shí)CDTA溶性和Na2CO3溶性的果膠組分中，分支程

5、度明顯下降，但在貯藏第21天這一現(xiàn)象得到了改善。原子力顯微鏡結(jié)果顯示處理組桃果實(shí)果膠多糖的鏈寬集中在較小的區(qū)間，表明處理組中果膠的降解更為嚴(yán)重。FLA家族成員在褪黑素處理的桃果實(shí)貯藏后期呈現(xiàn)一致的上調(diào)表達(dá)，暗示它們響應(yīng)了褪黑素誘導(dǎo)下的果實(shí)軟化，可能起到保護(hù)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)不被過快分解的作用。
　?。?）外源乙烯和ABA處理上調(diào)了常溫貯藏桃果實(shí)中PpFLA2、PpFLA4、PpFLA5、PpFLA6、PpFLA8的表達(dá)水平，表明FLA部分