大管電泳和一步法酶分析技術(shù)研究初探.pdf

1、毛細(xì)管電泳技術(shù)(一般采用內(nèi)徑50-100μm的石英毛細(xì)管)在人類基因組研究中扮演了舉足輕重的角色，使整個(gè)人類基因組計(jì)劃的完成大大提前，但是，伴隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，對(duì)目標(biāo)產(chǎn)品進(jìn)行更加深入的研究成為大勢(shì)所趨。因此，毛細(xì)管電泳技術(shù)樣品用量小的顯著特性卻限制了自身的應(yīng)用范圍，于是增大毛細(xì)管電泳的載樣量成為拓寬其應(yīng)用領(lǐng)域的技術(shù)瓶頸。 為了保持毛細(xì)管電泳技術(shù)分離效率高的優(yōu)點(diǎn)，又能彌補(bǔ)其載樣量小、檢測(cè)靈敏度低等不足，本論文將殼管換熱器結(jié)構(gòu)

2、引入到大管電泳系統(tǒng)中，借此強(qiáng)化電泳系統(tǒng)的散熱能力，使得在毫米級(jí)的分離管路中進(jìn)行電泳成為可能。本文采用不同規(guī)格的內(nèi)部制冷管對(duì)大管電泳系統(tǒng)進(jìn)行內(nèi)部降溫處理，使電泳過(guò)程中產(chǎn)生的焦耳熱能及時(shí)地被制冷毛細(xì)管中的冷卻液帶走。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，內(nèi)部制冷的存在確實(shí)起到了很好的制冷功效，使得大管電泳的電流-電壓關(guān)系在較大范圍內(nèi)符合歐姆曲線；分別選擇酸性、堿性物質(zhì)為模型化合物測(cè)試了帶有內(nèi)部制冷的大管電泳系統(tǒng)的分離效果，部分化合物的分離效率達(dá)到了60，000 p

3、lates/m以上；實(shí)驗(yàn)中采用的大管電泳能夠承載1.0μL左右的樣品，這樣大的載樣能力使得其能夠作為半制備或制備電泳系統(tǒng)。 高的載樣能力預(yù)示著大管電泳可以實(shí)現(xiàn)多維操作，于是目標(biāo)組分的轉(zhuǎn)移也就成為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)大管電泳的任務(wù)之一。因此，采用麗春紅為探針化合物測(cè)試了系統(tǒng)的電轉(zhuǎn)移性能，證實(shí)了在該裝置上進(jìn)行有效組分轉(zhuǎn)移的可行性。 建立大管電泳系統(tǒng)的目的之一就是搭建高通量藥物篩選平臺(tái)，而酶分析技術(shù)是藥物篩選中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，因此，本文