果蠅Gilgamesh-I激酶的表達、純化及晶體結構學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中文摘要酪蛋白激酶1家族(CaseinKinase1Family—CKl)在細胞的很多生理生化功能方面發(fā)揮著調節(jié)作用，并在Wnt／Winless和Hedgehog等信號途徑中發(fā)揮著重要作用。本文對人源CKlY的一個同源結構域一果蠅CKl(Gilgamesh—I、)進行了蛋白表達、純化及結晶。晶體形成后，運用X射線晶體衍射方法對晶體進行了初步分析，其分辨率可達285A，屬于尸43212空間群，晶胞參數a=b=52025A，c=291727

2、A。果蠅Gilgamesh—I蛋白晶體結構由分子置換的方法確定。結構解析發(fā)現它有一個保守的催化區(qū)域及一個相對活躍的構象。結構比較表明Gilgamesh—I結構域存在一個位于Ccl螺旋和p4折疊中間的延伸的環(huán)，然而正是這段折疊環(huán)對其活性和功能起著調節(jié)作用。關鍵詞：果蠅CKl；結晶；結構；折疊環(huán)；信號通路目錄弓I言1第1章材料與方法311材料3111實驗材料3112試劑3113實驗儀器3114試劑配制412實驗方法6121果蠅cDNA文庫的

3、獲得6122果蠅Gilgamesh—I蛋白序列信息8123目的基因的克隆9125目的蛋白的表達13126目的蛋白的純化15227賴氨酸甲基化20128蛋白結晶20129結構的解析與完善21第2章實驗結果與討論2321果蠅Gilgamesh—I蛋白的表達純化及賴氨酸甲基化2322果蠅GilgameshI蛋白晶體學研究一27221果蠅GilgameshI蛋白晶體篩選與優(yōu)化2723果蠅Gilgamesh—I蛋白晶體數據的收集與處理2824果蠅

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