納米材料結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)免疫法檢測(cè)β-興奮劑類獸藥的電化學(xué)傳感器研究.pdf

1、本文結(jié)合納米材料,采用競(jìng)爭(zhēng)免疫法構(gòu)建檢測(cè)β-興奮劑類獸藥的電化學(xué)免疫傳感器,并對(duì)構(gòu)建傳感器的各種條件進(jìn)行了優(yōu)化,如固定抗原/抗體濃度、培養(yǎng)時(shí)間和作用底物濃度等,同時(shí)評(píng)估了傳感器的靈敏度、選擇性、重復(fù)性和穩(wěn)定性,最終將得到的傳感器用于實(shí)際樣品檢測(cè)。本研究主要內(nèi)容包括：
　　 ⑴利用電沉積法和共價(jià)吸附法將納米金(Gold Nanoparticals,GNPs)和克倫特羅-多壁碳納米管(Multi-walled Carbon Nano

2、tubes,MWCNTs)復(fù)合物修飾到電極表面,構(gòu)建了一種靈敏的電化學(xué)免疫傳感器檢測(cè)克倫特羅。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,該免疫傳感器顯示了寬的線性范圍和低的檢測(cè)限(線性范圍是0.3-1000ng/mL,檢測(cè)限是0.15ng/mL),具有簡(jiǎn)便、快速、重復(fù)性好和穩(wěn)定性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。此外,利用上述傳感器檢測(cè)動(dòng)物飼料樣品,具有較高的準(zhǔn)確性和抗干擾能力。
　　 ⑵利用納米金、聚苯胺(Polyaniline,PANI)、多壁碳納米管和辣根過氧化物酶(

3、Horse Radish Peroxidase,HRP)標(biāo)記的克倫特羅納米金復(fù)合物,構(gòu)建了一種新型的電化學(xué)免疫傳感器檢測(cè)克倫特羅。多壁碳納米管/聚苯胺/納米金復(fù)合膜被修飾到電極表面,使得電極表面的導(dǎo)電性和電流響應(yīng)強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于裸電極;由于納米金的加入,增加了辣根過氧化物酶和二抗的固定量,使得到的電化學(xué)免疫傳感器具有較高的靈敏度。上述免疫傳感器的線性范圍是0.24-1000ng/mL,檢測(cè)限是0.12ng/mL,且能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)克倫特羅的特異性

4、檢測(cè)。利用此傳感器對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析得到了好的回收率。
　　 ⑶利用多孔Cu2O-SiO2納米粒子和生物素-親和素系統(tǒng)構(gòu)建了一種電化學(xué)免疫傳感器。Cu2O-SiO2納米粒子具有氧化還原電化學(xué)活性強(qiáng)、比表面積大、成膜能力好和穩(wěn)定性高的特點(diǎn),將其固定到免疫傳感器表面用于電極表面電流信號(hào)的放大;親和素-生物素被用來進(jìn)一步提高免疫傳感器的催化性能,一個(gè)親和素可以結(jié)合四個(gè)生物素,從而吸附大量的辣根過氧化物酶。基于上述兩種信號(hào)放大方法構(gòu)建的

5、免疫傳感器檢測(cè)萊克多巴胺的線性范圍是0.12-1000ng/mL,檢測(cè)限是0.8ng/mL。該免疫傳感器已成功地用于實(shí)際樣品中萊克多巴胺的檢測(cè)。
　　 ⑷利用金納米粒子、普魯士藍(lán)(Prussian Blue,PB)、聚苯胺、聚丙烯酸(Polyacrylic Acid,PAA)和金摻雜的石墨納米復(fù)合物(Au-hybrid GrapheneNanocomposite,AuGNs),構(gòu)建了一種檢測(cè)沙丁胺醇的超靈敏電化學(xué)免疫傳感器。納米

6、金、普魯士藍(lán)、聚苯胺和聚丙烯酸復(fù)合膜提高了電極的電化學(xué)活性、穩(wěn)定性和催化活性。納米石墨有很大的比表面積,因而金摻雜的石墨納米復(fù)合物可以固定大量的殼聚糖、金納米粒子和辣根過氧化物酶;辣根過氧化物酶量的增加可以促進(jìn)過氧化氫和電極之間的電子轉(zhuǎn)移。在實(shí)驗(yàn)優(yōu)化條件下,該傳感器檢測(cè)沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)液的線性范圍是0.08-1000ng/mL,(r=0.9955),檢測(cè)限是0.04ng/mL。同時(shí),此將傳感器可用于飼料和豬肉實(shí)際樣品中沙丁胺醇的檢測(cè)。

7、>　　 ⑸利用殼聚糖-四氧化三鐵-聚酰胺-胺樹形分子-納米金(Chitosan-Fe3O4Polyamide-amine dendrimers-Gold Nanoparticals,CS-Fe3O4-PAMAM-GNPs)納米復(fù)合物和辣根過氧化物酶一多壁碳納米管-抗體(Horse Radish Peroxidase-Multi-walled Carbon Nanotubes-Antibody,HRP-MWCNTs-Ab)生物復(fù)合物構(gòu)建