水溶性量子點(diǎn)熒光探針的制備及其用于堿基檢測(cè)的研究.pdf

1、堿基、核酸等生物分子在所有生命形態(tài)中扮演著重要角色。水溶性量子點(diǎn)熒光探針作為納米材料的一個(gè)重要組成部分，由于量子點(diǎn)具有寬的激發(fā)光譜、窄的發(fā)射光譜，不易被光漂白等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛用于各種物質(zhì)的檢測(cè)等方面。另外，熒光猝滅法具有高靈敏度、高選擇性、光譜簡(jiǎn)單和分析便捷等優(yōu)點(diǎn)，不僅為生物小分子檢測(cè)提供了很好的平臺(tái)，而且為納米材料作用于細(xì)胞的研究提供了基礎(chǔ)的理論依據(jù)。本課題的主要內(nèi)容是以量子點(diǎn)為熒光探針，基于熒光猝滅法建立了快速靈敏檢測(cè)堿基的新技術(shù)。主

2、要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 采用改進(jìn)的綠色合成路線(xiàn)，以石蠟為還原劑、油酸為穩(wěn)定劑、小分子巰基乙酸為修飾劑得到了具有良好的水溶性和熒光穩(wěn)定性的量子點(diǎn)熒光探針。用TEM、發(fā)射光譜對(duì)制備的水溶性量子點(diǎn)進(jìn)行了表征。結(jié)果表明：量子點(diǎn)顆粒的平均尺寸為3.7nm，其水溶液的熒光可連續(xù)穩(wěn)定一個(gè)禮拜。
　　 研究了量子點(diǎn)與堿基之間的相互作用，其中，嘧啶類(lèi)堿基對(duì)量子點(diǎn)的猝滅作用為動(dòng)態(tài)猝滅，而嘌呤類(lèi)堿基對(duì)量子點(diǎn)的猝滅作用為靜態(tài)猝滅。在實(shí)驗(yàn)的濃度范

3、圍內(nèi)，水溶性量子點(diǎn)熒光探針檢測(cè)體系的熒光強(qiáng)度的降低與尿嘧啶（U）、鳥(niǎo)嘌呤（G）、腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、胸腺嘧啶（T）的濃度之間有良好的線(xiàn)性關(guān)系。其中，尿嘧啶的檢測(cè)限為3.23×10-6mol·L-1（即0.36μg·mL-1），較高效液相色譜法的檢測(cè)限更靈敏一個(gè)數(shù)量級(jí)；首次采用水溶性量子點(diǎn)熒光探針檢測(cè)鳥(niǎo)嘌呤的檢測(cè)范圍為1～100μg·mL-1；較熒光光度法的檢測(cè)范圍擴(kuò)大了一個(gè)數(shù)量級(jí)；胸腺嘧啶的檢測(cè)限為0.02μmol·L-1，而以

4、ZnS熒光猝滅法的檢出限僅為0.40μmol·L-1；我們首次建立了腺嘌呤、胞嘧啶的檢測(cè)方法，檢測(cè)限分別為0.17μmol·L-1，1.70μmol·L-1。
　　 通常堿基在體內(nèi)多以磷酸鹽的形式存在，我們進(jìn)一步研究了嘧啶類(lèi)單磷酸苷與水溶性量子點(diǎn)熒光探針的作用情況。在實(shí)驗(yàn)的濃度范圍內(nèi)，水溶性量子點(diǎn)熒光探針檢測(cè)體系的熒光強(qiáng)度的降低與單磷酸胞苷（CMP）、單磷酸胸苷（TMP）、單磷酸尿（UMP）的濃度之間有良好的線(xiàn)性關(guān)系，檢測(cè)范圍為