簡介：能干細胞IPSCS物學(xué)特性研究論文作者簽名亟墮}指導(dǎo)教師簽名＆型論文評閱人1評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5答辯委員會主席黃扭教援濫江太堂醫(yī)堂院附屬簋二醫(yī)院委員I匭匿塞值F敦援塹塹友堂醫(yī)堂瞳基礎(chǔ)匡堂委員2掛童生F教授逝江盍堂醫(yī)堂院阻屆』L童匡院2委員3直強蘭￡教授塹江省主匡瞳2委員4錢差垡圭住醫(yī)』匝逝塹省厶民匡瞳2委員5■期一日一辯一STUDYONTHEGENERATIONANDCHARACTEHZAFIONOFPEDIATRICLEUKEMIAPATIENTSSPECIFICIPSCSLIKECELLLINE⑧舢也”’5酊卿觚坐幽絲8“P。州80?！?519NATURE皇立THESISREVIEWER1THESISREVIEWER2THESISREVIEWER3THESISREVIEWER4THESISREVIEWER5CHAIR坐墊墮墜堡塑墅型型型竺型型竺型COMMITTEEOFORALDEFEACECOMMITTEEMAN1HO∞GWD呻?yún)sG毋蜥B商CM觸甜丑呵衄G”型塑蘭塑11竺些型COMMITTEEMAN2．LPD啪GDLIM虹呱1BCO曲面SHOSPITALOF213EJIANGUMV商WSCHOOLOFMEDICINECOMMITTEEMAN3“乜GAOMK瓤刪婭GNDVM瀏OF抽刪。刪CBI嘣EMCDIC批H呷岫COMMITTEEMAN4坐型塑型墼型型坐型COMMITTEEMAN5DATEOFORALDEFENCEMAY30“2012．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．一

簡介：目的骨創(chuàng)傷后的再生能力提示有能夠自我復(fù)制并能多向分化的干細胞存在。一般認為，干細胞存在于骨、骨膜、骨髓及其他由中胚層發(fā)育來的組織中，在出生后仍然有少量干細胞繼續(xù)存在，在機體損傷時參與組織的修復(fù)。組織工程的基礎(chǔ)是有功能的細胞，骨組織工程需要大量的成骨細胞。十多年來，國內(nèi)外學(xué)者和臨床工作者對各種組織的細胞成骨能力進行了大量的研究，提出了定向性骨祖細胞、誘導(dǎo)性骨祖細胞和基質(zhì)干細胞的概念。目前，在研究中使用的作為種子細胞的成骨細胞來源有以下幾種骨、軟骨、骨外膜、骨髓和骨外組織。越來越多的證據(jù)表明，骨髓基質(zhì)干細胞BMSCS有多分化潛能，移植人體內(nèi)后可分化為骨、軟骨、肌肉、脂肪、血管內(nèi)皮、肝臟、神經(jīng)等多種細胞。能夠作為組織工程中不同細胞的來源在體內(nèi)正常循環(huán)中能夠分布于多種組織和器官，可以用于細胞和基因治療。而且取材、分離培養(yǎng)、擴增以及導(dǎo)入外源基因也相對方便。BMSC。通過抽取自體骨髓得到，對病人造成創(chuàng)傷較少，且無免疫排斥反應(yīng)。因此，BMSCS在實際應(yīng)用時將具有潛在的優(yōu)勢。本試驗?zāi)康氖墙⒁环N簡單有效的骨髓基質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)方法，并探討在體外培養(yǎng)中其增殖和分化的相互關(guān)系，總結(jié)骨髓基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)的生物學(xué)規(guī)律，為將來在體外分離、培養(yǎng)、擴增出大量的有成骨活性的細胞以滿足再造骨組織的需要提供了美好的前景。方法沖洗法獲取WEISTAR大鼠骨髓，用貼壁法分離提純骨髓基質(zhì)細胞BONEMARROWSTROMALCELLSBMSCS，傳至第3代細胞后分組1分別用普通培養(yǎng)基和誘導(dǎo)培養(yǎng)基DMEM加入地米松10MMOLL，Β甘油磷酸鈉10MMOLL，維生素C50MGL培養(yǎng)10天，每3天換液1次。繪制各自細胞生長曲線。2分別用普通培養(yǎng)基和誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15天，每3天換液1次，于第4、7、10、13、16天，檢測兩組的堿性磷酸酶表達量。3以510ML密度接種于6孔培養(yǎng)板各1板，各孔放置載玻片，分別加入基礎(chǔ)培養(yǎng)液和誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng)，每3天換液，20天后分別取出各自細胞爬片行VONKOSSA染色。結(jié)果1普通培養(yǎng)基中細胞的生長速度明顯快于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的細胞。2細胞堿性磷酸酶表達量兩組有顯著性差異P005，普通培養(yǎng)基組明顯低于誘導(dǎo)組。3對照組細胞YONKOSSA染色陽性，試驗組為陰性。結(jié)論1貼壁篩選法是一種簡單有效的骨髓基質(zhì)細胞的分離純化方法。2骨髓基質(zhì)細胞在體外可誘導(dǎo)分化為成骨細胞，可作為骨組織工程中種子細胞的來源。3骨髓基質(zhì)細胞的增殖和分化存在相關(guān)抑制的關(guān)系。

簡介：椎間盤細胞基質(zhì)包括膠原、蛋白聚糖等。椎間盤退行性病變表現(xiàn)為細胞數(shù)量和細胞基質(zhì)代謝的改變。生長因子有調(diào)整細胞增殖、分化及細胞基質(zhì)代謝的作用，可用于椎間盤退變的生物學(xué)治療。目前有關(guān)生長因子對纖維環(huán)細胞作用的研究偏少，本研究考察體外培養(yǎng)條件下IGF1胰島素樣生長因子1、PDGF血小板源性生長因子、TGFΒ1轉(zhuǎn)化生長因子Β1對人退變纖維環(huán)細胞生物學(xué)活性的影響，以深入及擴展生長因子對人類椎間盤退變的生物學(xué)治療的研究。方法結(jié)合酶消化法和組織塊培養(yǎng)法，體外單層培養(yǎng)人退變纖維環(huán)原代細胞。傳代后通過免疫組織化學(xué)染色鑒定細胞。對傳3代細胞分別采用不同生長因子干預(yù)，根據(jù)文獻所查，選用相應(yīng)生長因子最佳作用濃度，分對照組、IGF1組、PDGF組、TGFΒ1組、IGF1PDGF組、IGF1TGFΒ1組、PDGFTGFΒ1組、IGF1PDGFTGFΒ1組等8組。干預(yù)后第3、6D，采用MTT法測定細胞增殖，ELISA法測定細胞培養(yǎng)上清液中Ⅰ、Ⅱ型膠原和AGGRECAN含量。用CURVEEXPERT13軟件將所測的OD值轉(zhuǎn)算為濃度值，數(shù)據(jù)運用SPSS130統(tǒng)計軟件分析。結(jié)果傳3代細胞Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色陽性。IGFI具有促人退變纖維環(huán)細胞增殖作用，輕度抑制細胞合成Ⅰ型膠原，促進細胞合成II型膠原和AGGRECAN，促Ⅱ型膠原合成作用強于TGFΒ1。PDGF具有明顯促人退變纖維環(huán)細胞增殖作用，促增殖作用強于IGFI，抑制細胞合成I型膠原，輕度促進細胞合成Ⅱ型膠原，無明顯促細胞合成AGGRECAN作用。TGFΒ1抑制人退變纖維環(huán)細胞增殖，促進細胞合成Ⅰ、Ⅱ型膠原，AGGRECAN，促AGGRECAN合成作用強于IGFI。多種因子聯(lián)合作用較單種未見明顯優(yōu)勢，未能呈現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)。結(jié)論IGFI、TGFΒ1、PDGF明顯改變?nèi)送俗兝w維環(huán)細胞的生物學(xué)活性。三種因子可以應(yīng)用于對人類椎間盤退變的生物學(xué)治療。

簡介：分類號73941密級公開UDC610編號201310001攻讀碩士學(xué)位研究生畢業(yè)論文RNA干擾下調(diào)CIB1表達對膠質(zhì)母細胞瘤U87細胞生物學(xué)特性的影響THEEFFECTOFCELLBIOLOGICALACTERISTICSOFGLIOBLASTOMAU87THATCIB1DOWNREGULATEBYRNAINTERFERENCETOUCHDOWN指導(dǎo)教師呂同德主任技師惠玲副主任技師學(xué)生姓名閆蔚論文類型基礎(chǔ)研究學(xué)科專業(yè)名稱基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（免疫學(xué)）研究方向腫瘤生物學(xué)學(xué)院（系、部）醫(yī)學(xué)院論文起止時間201112201303青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級攻讀碩士學(xué)位研究生畢業(yè)論文學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明54學(xué)位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明55

簡介：點擊查看更多表皮干細胞在不同外界因素下對其生物學(xué)特性的影響及機制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：該文應(yīng)用細胞力學(xué)、細胞生物學(xué)、生物化學(xué)、分子免疫學(xué)等方法和技術(shù)從細胞層次上的應(yīng)力生長關(guān)系著手重點就人肺上皮細胞對周期性機械拉伸刺激的響應(yīng)機理進行了初步的探索主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下1應(yīng)用周期性基底膜拉伸應(yīng)變裝置建立了人肺上皮細胞的體外加載模型并應(yīng)用生物化學(xué)方法和流式細胞技術(shù)探討該模型的可行性2應(yīng)用流式細胞技術(shù)研究周期性機械拉伸應(yīng)變對人肺上皮細胞增殖的影響探討此類細胞在其力學(xué)生理背景下的生長行為3應(yīng)用胞外基質(zhì)蛋白如纖粘連蛋白FN、膠原蛋白ⅣCOLⅣ裱襯基底膜激光共聚焦顯微鏡分析周期性機械拉伸應(yīng)變下人肺上皮細胞表面Α、Α和Β三種整聯(lián)蛋白的分布狀況4應(yīng)用膠原蛋白ⅣCOLⅣ裱襯基底膜微管吸吮技術(shù)研究周期性機械拉伸應(yīng)變對人肺上皮細胞粘附和鋪展的影響并結(jié)合前面膜受體整聯(lián)蛋白和骨架肌動蛋白的變化探討人肺上皮細胞力學(xué)性質(zhì)對拉伸刺激的響應(yīng)及其機理5應(yīng)用膠原蛋白ⅣCOLⅣ裱襯基底膜激光共聚焦技術(shù)研究周期性機械拉伸應(yīng)變對人肺上皮細胞骨架肌動蛋白FACTIN的影響6胞內(nèi)鈣離子在細胞的機械信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起了重要的作用應(yīng)用熒光分光光度法研究了人肺上皮細胞響應(yīng)拉伸應(yīng)變時胞內(nèi)鈣離子濃度的變化

簡介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文IL6在膽管癌細胞株QBC939中的生物學(xué)效應(yīng)及其信號傳導(dǎo)途徑的實驗研究姓名韓寧申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師黃強許戈良20080501安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文韓寧2008IGIL6IL6RIMMUNOGLOBININTERLEUKIN6免疫球蛋白白細胞介素一6INTERLEUKIN6RECEPTOR白細胞介素一6受體IL6I己EINTERLEUKIN6ELEMEMTIPJAKSPTYRS仉虹TYR“IRISⅣⅣDLVDVEGFEDL’AGELSOCS3NMPTKIMMUNOPRECIPITATIONJANUSKINASESPHOSPHOTYROSINE白細胞介素一6反應(yīng)元件免疫沉淀JANUS激酶磷酸酪氨酸SIGNALTRANSDUCERANDACTIVATOROFTRANSCRIPTIOIL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活因子TYROSINETRIHYDROXYMETHYLAMINOMETHANEMICROVESSELDENSITYLYMPHATICVESSELDENSITYVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTORETHYLENEDIAMINETERAACETICACIDGELATINSUPPRESSOROFCYTOKINESIGNALING3NONTRANSMEMBRANEPROTEINTYROSINEKINASE3酪氨酸三羥甲基氨基甲烷微血管密度淋巴管微密度血管內(nèi)皮生長因子乙二胺四乙酸明膠細胞因子信號抑制物3非跨膜型蛋白酪氨酸激酶

簡介：復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文PC12細胞缺糖損傷的分子細胞生物學(xué)特征姓名宋曉冬申請學(xué)位級別碩士專業(yè)遺傳學(xué)指導(dǎo)教師左伋劉雯20030501復(fù)里大學(xué)2000級磋士擻學(xué)鏈論文ABSTRACTBRAINISCHEMIAISONEOFTHEMOSTSERIOUSANDFATALDISEASESTOPROBEINTOTHEPATHOLOGICALMECHANISMOFTHEINJURYWI1LCONTRIBUTETOUNDERSTANDTHESESDISEASESBYAPPLYINGGLUCOSEDEPRIVATIONANINSULTRELEVANTTOTHEBRAINISCHEMIAMEDIA，PCI2CELLSTRAINWASEVALUATEDBYVARIABLECELLULARANDMOLECULARBIOLOGICALTECHNIQUESINCLUDINGMICROSCOPY，ELECTRONMICROSCOPY，F(xiàn)IOWCYTOMETRYANALYSIS，鞘渾，LDHLEAKAGEANDSODMEASUREMENT。RTPCR。THERESULTSREVEALEDTHATTHETREATEDPEL2CELLSWHICHDEPRIVEDGLUCOSEUNDERWENTTHEMORPHOLOGICALANDFUNCTIONALALTERATIONSINCLUDINGAPOPTOSISANDNECROSISAFTER24HOURFORGLUCOSEDEPRIVATION，THEAPOPTOSISPCI2CELLSINCREASEDTOTHEPEAKLEVELTHERNALEVELSOFGRP75、BCL一2、CMYC、BCLXL、BAXWEREMEASUREDBYRTPCRIN懟12CELLSEXPOSEDTOGLUCOSEDEPRIVATIONFORVARIOUSTIMEINTERVALSTHEDATADEMONSTRATEDTHATGRP75UPREGULATEDIN24HOURFORGLUCOSEDEPRIVATIONBCL～2、BCLXL、CMYCRNALEVELSEXPRESSEDTOPEAKLEVELS6一16HOURSAFTERGLUCOSEDEPRIVATIONTREATMENTTHENDECLINEDGRADUALLY。UNDERPARALLEDCONDITIONS，BAXINDUCED。KEYWORDSGLUCOSEDEPRIVATION，APOPTOSISISCHEMICINJURY4

簡介：目的了解癌睪丸抗原OYTES1對人間充質(zhì)干細胞MSCS生物學(xué)行為的影響。方法1運用不連續(xù)密度梯度離心法從人骨髓中分離MSCS，然后使用含10％FBS的LDMEM培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，聯(lián)合使用胰蛋白酶TRYSIN和EDTA對MSCS進行消化傳代以獲得較單一的干細胞群通過以下方法鑒定MSCS顯微鏡觀察細胞形態(tài)、CCK8法檢測細胞生長情況、流式細胞術(shù)檢測細胞表面分子標(biāo)志物（CD105、CD90、CD44、CD29、CD45、CD14和HLADR）、用條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)MSCS向成骨和成脂肪方向分化采用5％DMSO凍存MSCS，并比較凍存前后細胞的形態(tài)學(xué)特征、存活率、生長情況和表面分子標(biāo)志物的表達以了解凍存效果。2采用RTPCR、免疫細胞化學(xué)染色法、細胞免疫熒光染色法及免疫印跡法WESTERNBLOT檢測MSCS，從MRNA水平和蛋白質(zhì)水平了解OYTES1的表達用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染OYTES1SIRNA，RTPCR和WESTERNBLOT檢測MSCS中OYTES1基因的最佳干擾時間及干擾效率觀察OYTES1基因干擾后MSCS的形態(tài)學(xué)特征，并了解MSCS相關(guān)表面分子標(biāo)志物的表達情況。3通過CCK8法檢測細胞的增殖能力、流式細胞術(shù)分別檢測細胞周期和細胞凋亡用WESTERNBLOT檢測周期相關(guān)調(diào)控蛋白CYCLINE和凋亡相關(guān)蛋白CASPASE3用劃痕修復(fù)實驗和TRANSWELL遷移實驗檢測細胞遷移能力。結(jié)果1通過不連續(xù)密度梯度離心法體外獲得了來源于骨髓的MSCS，經(jīng)培養(yǎng)及傳代后MSCS得到較好的純化，具有MSCS典型的形態(tài)學(xué)特征，表達系列MSCS相關(guān)表面分子標(biāo)志物（CD105、CD90、CD44和CD29），并呈現(xiàn)出向成骨和成脂肪方向的分化潛能。采用5％DMSO凍存MSCS的效果良好，復(fù)蘇后的細胞其形態(tài)特性、存活率及生長情況與凍存前相比無明顯改變，仍表達系列MSCS相關(guān)表面分子標(biāo)志物（CD105、CD90、CD44和CD29）。2在MSCS中均檢測到OYTES1MRNA和蛋白，OYTES1蛋白分布于MSCS的胞質(zhì)和胞核。MSCS中OYTES1表達的下調(diào)不影響MSCS的形態(tài)學(xué)特征和MSCS相關(guān)表面分子標(biāo)志物的表達。3OYTES1下調(diào)后，細胞增殖能力減弱、G1期細胞增多、S期和G2期細胞減少并伴隨CYCLINE表達的下降、細胞凋亡率增加且伴隨CASPASE3表達增強，以及細胞遷移能力下降等，與其余實驗組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異P＜005，這些結(jié)果表明MSCS中OYTES1的下調(diào)，影響了MSCS的增殖、周期分布、細胞凋亡及細胞的遷移能力，提示OYTES1可能參與MSCS的這一系列生物學(xué)行為，但具體機制尚不清楚。結(jié)論1體外對MSCS進行培養(yǎng)、連續(xù)傳代、鑒定及凍存，為后續(xù)實驗提供了大量的種子細胞。2證實了MSCS中OYTES1的表達所建立的RNAI方法能有效地下調(diào)MSCS中的OYTES1。3OYTES1參與MSCS的增殖、細胞周期、細胞凋亡和細胞遷移等生物學(xué)行為。

簡介：該課題首先建立人巨噬細胞系U937和人臍靜脈內(nèi)皮細胞系ECV304的共培養(yǎng)模型然后以刀豆蛋白ACONA為巨噬細胞刺激劑在倒置顯微鏡下觀察巨噬細胞對血管內(nèi)皮細胞形態(tài)學(xué)的影響采用HTDR摻入法觀察其對DNA合成的影響采用流式細胞儀測定細胞周期的變化同時采用RTPCR研究巨噬細胞對血管內(nèi)皮細胞靶基因HOXB2和VEGF受體KDR表達的影響用免疫熒光技術(shù)檢測血管內(nèi)皮細胞膜上整合素受體ΑΝΒ3的表達變化結(jié)果表明CONA刺激的U937細胞使內(nèi)皮細胞間隙變大胞體出現(xiàn)類似神經(jīng)元樣的突起形態(tài)不一使內(nèi)皮細胞S期明顯增加使內(nèi)皮細胞VEGF受體KDR和HOXB2基因MRNA的表達水平明顯上調(diào)使內(nèi)皮細胞膜上整合素受體ΑΝΒ3表達明顯增加通過該研究得出以下結(jié)論1活化的巨噬細胞可以通過影響血管內(nèi)皮細胞的形態(tài)、細胞周期、VEGF受體KDR及HOXB2的表達來促進其增殖和遷移2活化的巨噬細胞可以增強血管內(nèi)皮細胞與基質(zhì)的黏附3活化的巨噬細胞通過促進血管內(nèi)皮細胞的增殖、遷移及與基質(zhì)的黏附來調(diào)節(jié)其成血管作用4HOXB2表達水平可作為血管內(nèi)皮細胞增殖的指標(biāo)5HOXB2與血管內(nèi)皮細胞成血管作用有密切關(guān)系

簡介：鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文野生型和突變型DNA聚合酶Β的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及對CHO細胞生物學(xué)特性的影響姓名趙繼敏申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理生理學(xué)指導(dǎo)教師董子明20040501郊州大學(xué)2004年碩士畢業(yè)論文野生型和突變型DNA壤臺酶B的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及對CTTO細胞生物學(xué)特性的影響介導(dǎo)轉(zhuǎn)染中國倉鼠卵巢細胞CHINESEHAMSTEROVARYCELLS，CLIO細胞，經(jīng)G418篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系，通過RTPCR方法檢測重組基因MRNA水平的表達，MTT測法生長曲線、漉式細胞術(shù)測細胞周期，以觀察轉(zhuǎn)染的DNAPOL13對細胞生物學(xué)特性的影響。MTT法測得的轉(zhuǎn)染組和對照組0D值的比較采用雙因素方差分析，各組細胞周期中S期的比例的比較采用單因素方差分析。均以NO05為顯著性水準。結(jié)果穩(wěn)定轉(zhuǎn)染野生型和突變型DNAPOL13的CHO細胞株中，都有外源基因MRNA水平；轉(zhuǎn)染突變型58BP缺失POL13基因的細胞增殖速度和S期比例增高均高于未轉(zhuǎn)染組細胞，差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO05。結(jié)論高表達外源性野生型和突變型DNAPOL13，對CHO細胞生長具有不同的影響，為進一步探討POL0與基因組穩(wěn)定性的關(guān)系及其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用打下了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞DNAPOLB轉(zhuǎn)染CHO細胞RTPCR流式細胞術(shù)細胞生長曲線2

簡介：目的研究臍血間充質(zhì)干細胞MSC的體外分離、純化、擴增及其部分生物學(xué)特征為臍血干細胞定向分化為神經(jīng)元樣細胞提供充分的前期理論依據(jù)和技術(shù)方法結(jié)論認為臍血中富含造血干祖細胞是骨髓和外周血后的第三種造血干細胞的來源臍血干細胞的分離提純及擴增培養(yǎng)和形態(tài)學(xué)的研究分析揭示了我們培養(yǎng)的臍血MSC能很好地貼附生長增殖分化程度很低有多向分化的潛能并能分泌細胞因子以調(diào)節(jié)自身生長從而揭示了體外分離擴增分離臍血干細胞及其培養(yǎng)擴增的可行性并且由于分化程度低抗原表達弱細胞毒性低因此免疫應(yīng)答弱臍血的低免疫應(yīng)答性使得同胞間或非血緣供者移植后的GVHD發(fā)生率和嚴重性均低于骨髓移植臍血間充質(zhì)干細胞取材容易采集方便在組織工程中將有著廣泛的應(yīng)用前景

簡介：點擊查看更多雙歧桿菌分泌型粘附素體外調(diào)節(jié)腸上皮細胞生物學(xué)功能的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多siRNA沉默SLC7A5基因?qū)KM-1細胞系生物學(xué)特性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：我們的實驗選擇非病毒的質(zhì)粒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2BMP2轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細胞MSCS研究其轉(zhuǎn)染后外源基因表達情況及對骨髓基質(zhì)干細胞MSCS成骨特性的影響并以新西蘭白兔為動物模型研究其在活體內(nèi)的成骨效應(yīng)骨髓基質(zhì)干細胞MSCS中包括了誘導(dǎo)性骨祖細胞IOPC和確定性骨祖細胞DOPC后者無需誘導(dǎo)因子的作用本身就具備了成骨分化的能力而前者在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2BONEMPHOGEICPROTEIN2BMP2等成骨刺激因子作用下也向成骨分化2730利用脂酯體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將人BMP2基因?qū)牍撬杌|(zhì)干細胞MSCS使骨髓基質(zhì)干細胞MSCS在發(fā)揮基因治療的細胞載體的同時利用自體分泌的活性BMP2蛋白促進其向成骨細胞系的分化是我們實驗的設(shè)計思想之一在對人和兔骨髓基質(zhì)干細胞MSCS體外培養(yǎng)擴增的過程中我們也著重觀察了不同年齡供體的骨髓基質(zhì)干細胞的生長特性為今后進一步進行以骨髓基質(zhì)干細胞作為細胞載體的基因治療研究打下基礎(chǔ)實驗一構(gòu)建真核細胞表達載體PCDNA3HBMP2目的為了研究人類骨形態(tài)發(fā)生蛋白2BONEMPHOGEICPROTEIN2BMP2轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細胞MSCS的穩(wěn)定表達以及對轉(zhuǎn)染后骨髓基質(zhì)干細胞MSCS生物學(xué)特性的影響為了進一步研究非病毒載體介導(dǎo)的BMP2轉(zhuǎn)染MSCS在動物體內(nèi)成骨修復(fù)的作用構(gòu)建真核表達載體PCDNA3HBMP2實驗二人骨髓基質(zhì)細胞的獲取、體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性的觀察目的體外培養(yǎng)了不同年齡段的人骨髓基質(zhì)細胞HMSCS對其不同的生物學(xué)特性進行觀察為進一步了解人骨髓基質(zhì)細胞作為基因轉(zhuǎn)載和表達的細胞載體和可作為外源性組織細胞的可行性奠定基礎(chǔ)實驗三脂酯體介導(dǎo)HBMP2轉(zhuǎn)染人骨髓基質(zhì)干細胞和對其生物學(xué)特性的影響目的證實人骨髓基質(zhì)干細胞HMSCS作為良好的基因治療骨缺損的細胞載體和觀察人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2BMP2在HMSCS內(nèi)穩(wěn)定表達的可行性并觀察外源性HBMP2對HMSCS成骨分化能力的影響實驗四兔骨髓基質(zhì)細胞的獲取、體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性的觀察目的為進一步了解BMP2基因轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細胞在活體內(nèi)促進骨修復(fù)重建的作用我們進行了兔骨髓基質(zhì)細胞RMSCS的體外培養(yǎng)研究快速大量提取培養(yǎng)兔骨髓基質(zhì)細胞RMSCS的方法實驗五HBMP2轉(zhuǎn)染自體兔骨髓基質(zhì)細胞的成骨實驗研究目的探討人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2HBMP2轉(zhuǎn)染兔自體骨髓基質(zhì)細胞RMSCS和兔自體骨髓基質(zhì)細胞單純體內(nèi)植入的骨生成誘導(dǎo)及促進骨缺損修復(fù)的作用