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簡(jiǎn)介:分類號(hào)Q28UDC576密級(jí)單位代碼10798桃果實(shí)質(zhì)體發(fā)育的細(xì)胞分子生物學(xué)研究ASTUDYONCELLULARANDMOLECULARBIOLOGYOFPLASTIDDEVELOPMENTINPEACHFRUIT二級(jí)學(xué)科細(xì)胞生物學(xué)研究方向植物發(fā)育細(xì)胞生物學(xué)研究生黎明指導(dǎo)教師郭學(xué)民教授所在院所河北科技師范學(xué)院2016年6月縮略詞AOIAIEAOFINTEREST選定區(qū)域CARCAMTENOID類胡蘿卜素CHLCHLOROPHYLL葉綠素CDDNACHLOROPLASTDEOXYRIBONUCLEICACID葉綠體基因組F0MINIMALFLUORESCENCE固定熒光FMMAXIMALFLUORESCENCE最大熒光F。ⅧIABLEFLUORESCENCE可變熒光FV/FMMAXIMALQUANTUMYIELDOFPS1IPSII最大光能轉(zhuǎn)換效率NPQNONPHOTOCHEMICALQUENCHING非光化學(xué)淬滅系數(shù)PSIPHOTOSYSTEMI光系統(tǒng)IPSIIPHOTOSYSTEMII光系統(tǒng)IIPTDNAP1ASTIDDEOXYRIBONUCLEICACID質(zhì)體基因組APCOEFFICLENTOFPHOTOSYNTHETICQUENCHING光化學(xué)淬滅系數(shù)蘭皇業(yè)呈坐21型呈里絲蘭2墮L旦些型塑型燮皇_
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簡(jiǎn)介:ADISSERTATIONSUBMITTEDTOSICHUANAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORMASTERDEGREEOFSCIENCEEFFECTSOFRETINOLON/NVITROCHARACTERIZATIONOFSERTOLICELLSFROMPREPUBERTAIPORCINETESTISHUANHUANLIUSUPERVISORSHUMINYUASSOCIATEPROFESSORWENJIANG,SICHUAN,CHINAJUNE,2015論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。一虢硼堤垃F(xiàn)咖薩白莎關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)/位論文的全部或部分內(nèi)容??诒菊撐牟槐C堋U?qǐng)?jiān)谝陨峡趦?nèi)劃“√’’研究生簽名卻坎也研究生簽名A們目?!萆弦覍?dǎo)師簽名口本論文保密,在一年解密后適用本授權(quán)?!跮年8旯L多三乙印甜年考具CFB
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)墨墨壘墨密級(jí)公玨學(xué)號(hào)2Q1321壘Q321雞原始生殖細(xì)胞及軟骨干細(xì)胞分離培養(yǎng)與生物學(xué)特性研究STUDYONISOLATION,CULTUREANDCHARACTERIZATIONOFCHICKENPRIMORDIALGERMCELLSANDCARTILAGESTEM/PROGENITORCELLS學(xué)位申請(qǐng)人李璐指導(dǎo)教師李俊杰教授合作導(dǎo)師關(guān)偉軍教授學(xué)科專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士授予單位河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期二。一六年五月三十日試驗(yàn)所屬項(xiàng)目及資金來(lái)源本研究由河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系蛋雞產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助。
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簡(jiǎn)介:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文香豬卵巢細(xì)胞生物學(xué)特性和影響母豬卵巢顆粒細(xì)胞體外成熟的因素探討姓名孟春花申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師石放雄20080601香豬卵巢細(xì)胞生物學(xué)特性和影響母豬卵巢顆粒細(xì)胞體外成熟的因素探討均有表達(dá).表明抑制素A,PKB、FOXOS、BAX和BEL.2在香豬卵巢中呈卵泡發(fā)育階段特異性和細(xì)胞特異性表達(dá),可能在香豬卵泡的發(fā)育、閉鎖和黃體化中起重要調(diào)控作用.2.為了研究FOX06在豬生殖系統(tǒng)的作用,本實(shí)驗(yàn)從4個(gè)成年豬卵巢和4只成年小鼠的腦組織中提取RNA,根據(jù)已報(bào)道的小鼠FOX06基因引物進(jìn)行RTPCR,結(jié)果從小鼠腦組織中擴(kuò)增出一條約2500BP的片段,而豬卵巢組織中未見(jiàn)此片段.因此,F(xiàn)OX06基因可能在成年豬卵巢中不表達(dá).3.為了研究豬卵泡發(fā)育過(guò)程中影響PGC生長(zhǎng)和卵泡閉鎖的因素,本實(shí)驗(yàn)中用機(jī)械法從豬卵巢分離有腔卵泡,按直徑大小分為3組小卵泡1.5.3IIIITI、中卵泡3.5NLI/1和大卵泡耋5TONI,統(tǒng)計(jì)健康卵泡和閉鎖卵泡分別所占比率,分離PGC并收集PFF.用流式細(xì)胞術(shù)ANNEXINV.FITC/PI雙染法檢測(cè)PGC存活率和FLUO3AM探針標(biāo)記PGC檢測(cè)CA2】I,用WESTERNBLOT檢測(cè)PGC內(nèi)FOX03A表達(dá)水平,用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)PFF中E2的濃度.結(jié)果表明隨有腔卵泡直徑的增大,閉鎖卵泡的比率逐漸降低P0.05;PGC內(nèi)FOX03A表達(dá)水平逐漸升高PO.05;PFF中E2的濃度逐漸升高PO.05.表明CA2I和FOX03A轉(zhuǎn)錄因子可能通過(guò)調(diào)控不同直徑有腔卵泡中PGC的生長(zhǎng)和凋亡,從而調(diào)節(jié)豬有腔卵泡的生長(zhǎng),發(fā)育和閉鎖.4.為研究細(xì)胞外游離CA2對(duì)PGC的影響,在豬顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中添加CACL2或CA2螯合劑EGTA,分別于0H、6H、24H和48HE集PGC和培養(yǎng)液.用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)CA2濃度CA2I、用WESTERNBLOT檢測(cè)PGC內(nèi)FOX03A表達(dá)水平、用RIA法檢測(cè)培養(yǎng)液中E2的濃度.結(jié)果表明1培養(yǎng)液中50MG/MLCACL2對(duì)PGC的【CA2】I沒(méi)有顯著影響;50舭EGTA.顯著降低了豬顆粒細(xì)胞內(nèi)CA2濃度P0.05,但500舭EGTA反而對(duì)PGC的CA2】I無(wú)顯著影響.2培養(yǎng)液中添H口CACL26H可以顯著提高PGC內(nèi)FOX03A的表達(dá),而添加EGTA顯著抑制了PGC內(nèi)FOX03A的表達(dá)P0.05,且抑制程度呈劑量依賴性關(guān)系.3培養(yǎng)液中添加CACL2對(duì)PGC內(nèi)E2的分泌起抑制作用,而添加EGTA對(duì)PGC內(nèi)E2的分泌起顯著的促進(jìn)作用P0.05,且E2分泌提高幅度與EGTA的添加量呈劑量依賴性正相關(guān).另外,體外培養(yǎng)的PGC中E2的分泌隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高的趨勢(shì),體外培養(yǎng)的PGC可能存在一個(gè)自成熟的過(guò)程.所以,細(xì)胞外鈣離子可能通過(guò)FOX03AF言號(hào)通路來(lái)調(diào)控體外培養(yǎng)的PGC的生長(zhǎng)、凋亡和成熟.5.為研究PGC中CA2堆號(hào)通路是否受PDK/PKB/FOXO信號(hào)通路的調(diào)節(jié),用2NG/MLFSH、1MMOYLEGTA一種CA2螯合劑、10MNOL/LLY294002一種P13K的特異性抑制劑以及FSHEGTA、EGTALY和FSHE∞A十LY共處理體外培養(yǎng)的PGC,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)PGC存活率、用WESTERNBLOT檢測(cè)PGC內(nèi)FOX03A等蛋白表達(dá)水平、用RIA法檢測(cè)培養(yǎng)液中E2的濃度。結(jié)果表明處理后2H,各處理組細(xì)胞存IL
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簡(jiǎn)介:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文菊亞族六個(gè)種的細(xì)胞學(xué)及太行菊的生殖生物學(xué)研究姓名李健申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)園林植物與觀賞園藝指導(dǎo)教師陳發(fā)棣20080601南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文菊亞族六個(gè)種的細(xì)胞學(xué)及太行菊的生殖生物學(xué)研究核花粉時(shí)期完全消失。最終形成AY四面體型小孢子,成熟花粉有3核,花粉表面具3個(gè)萌發(fā)孔。4太行菊單子房,單胚珠,雙珠被,薄珠心,胚珠倒生型,胚囊發(fā)育屬于待宵草型;大孢子母細(xì)胞由孢原細(xì)胞直接發(fā)育而成,經(jīng)過(guò)兩次分裂形成大孢子四分體,呈線型排列,其中珠孔端大孢子為具功能大孢子,而合點(diǎn)端的3個(gè)大孢子在發(fā)育過(guò)程逐漸解體;胚胎發(fā)育過(guò)程經(jīng)歷球形胚,心形胚,魚雷形胚和子葉胚四個(gè)階段;花粉活力較高,自交時(shí)能在柱頭上大量附著,且都能正常萌發(fā)形成花粉管并進(jìn)入胚囊。關(guān)鍵詞菊亞族;核型;減數(shù)分裂;大小孢子發(fā)生;雌雄配子體;胚胎發(fā)育II
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簡(jiǎn)介:上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文東方鱟血細(xì)胞中兩種脂多糖結(jié)合蛋白的基因克隆、表達(dá)及其生物學(xué)功能研究姓名王東寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師張惟杰吳祥甫200251歲屠支逸名謦博士學(xué)位論文新型絲氨酸蛋白酶,同時(shí)它具有LPS結(jié)合區(qū),可以結(jié)合LPS并抑制G菌的生長(zhǎng)。目前用于功能研究的TALFSHFC主要都是從天然鱟血細(xì)胞裂解物的分離純化中得來(lái)的,這存在以下幾方面問(wèn)題首先鱟類是一種稀少的物種,這就大大局限了從鱟血裂解物中分離天然TALF和FC的樣品來(lái)源;其次TALF和FC含量有限,且需在無(wú)菌環(huán)境下純化,這使分離純化相當(dāng)困難;同時(shí)天然裂解物對(duì)內(nèi)毒素的敏感性還因每次不同來(lái)源的樣品而異。另外,利用氨基酸合成法合成的具有LPS結(jié)合活性的肽段成本太高,且化學(xué)合成法難以完善肽的修飾加工。因而,為了獲得大量可用于研究與臨床治療的TALF和FC蛋白,只有利用基因工程的手段才有可能大量制備具有生物活性的重組蛋白以滿足應(yīng)用的需要。目前國(guó)際上尚沒(méi)有從分子水平克隆TALF基因并用基因工程手段重組表達(dá)該蛋白的報(bào)道,對(duì)于TALF的研究還完全停留于蛋白水平至于東方鱟來(lái)源的FC一直也沒(méi)有什么基因重組克≮彳。之隆表達(dá)的報(bào)道。所洲我鐘稍目標(biāo)就是利用基因工程手段從鱟血細(xì)胞的/CDNA一|L克隆TALF和FC基因,同時(shí)完成將它們?cè)诓煌谋磉_(dá)系統(tǒng)II進(jìn)行重組表達(dá)的研究以建立起一種或幾種理想的表達(dá)系統(tǒng)用以大量制備具有生物活性的重組蛋白。另外,本論文也包括了從腫瘤患者的淋巴結(jié)中克隆次級(jí)淋巴趨化因子SECONDARYLYMPHOIDTISSUECHEMOKINE,SLC基因,同時(shí)將其在原核表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行重組表達(dá)并純化的研究。F首先,本研究以中國(guó)大陸福建、浙江沿海海域的東方鱟為材料,成功L抽提了其覷細(xì)胞的總RNA,并首次利用了逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR
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簡(jiǎn)介:廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子在大腸桿菌中的表達(dá)、純化及生物學(xué)活性研究姓名黃新強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師鄭忠輝宋思揚(yáng)200171ABSTRCTUEXPRESSIONOFKERATINOCYTEGROWTHFACTORINESCHERICHIACOLIANDITSPURIFICATIONANDBIOACTIVITYABSTRACTKERATINOCYTEGROWTHFACTORKGFISAMEMBEROFFIBROBLASTGROWTHFACTORFGF71BYACTINGPREDOMINANTLYINAPARAERINEN%ANNERKGFCXTNSTIMULATETHEPROLIFERATION,DIFFERENTIATIONANDMIGRATINNOFEPITHELIALCEILSASERIOUSSTUDIESHAVEPROVIDEDINSIGHTINTOTHEFUNCTIONOFKGFINR礎(chǔ)PROCESSESOFVARIOUSTISSUESANDORGARTS,INELUDINGSKIN,CORNEA,BOWELINADDITIONITISAPROTECTIVEFACTORFORGASTROINTESTINALINJURYINDUCEDBYRADIATIONANDCHEMOTHERAPYINTERESTINPRODUCING】ARGEAMOUNTANDBIOACTIVEKGFTHROU曲GENETICENGINEERINGMETHODHASBEENHEIGHTENEDDUETOTHELIMITEDAMOUNTOFKGFINTHEBODYBASEDONPREVIOUSWORK,THISP卵ERFOCUSONTHEEXPRESSIONPURIFICATIONANDBIOACTIVETESTOFKGFFOR也ESAKEOFPROVIDINGGROUNDWORKFORFUTURESTUDYBYCHANGINGTHEINDUCINGTEMPERATUREINDUCER1PTGCONCENTRATIONTHEDENSITYOFBACTERIAANDINDUCINGTIME,THESATISFYINGCONDITIONFOREXPRESSIONOFSOLUBLEFUSIONPROTEINGSHGFCOULDBEOBTAINEDAT25℃03MMOL,LIPTG,OD600EQUALSTO097,5HINDUCINGTIMEUNDERTHEIMPROVEDCONDITIONTHESOLUBLEGSTKGFCOMPRISEDABOUT420OFTOTALEELLULARPROTELNAND25RAGGSTKGFCOULDBEHARVESTEDINLLFERMENTATIONAMETHODWHICHCOMBINEDTWOSTEPOFAMILITYCHROMATOGRAPHYANDTRYPSININCUBATIONWASUSEDTOACHIEVEKGFPURIFICATIONSINCETHEFUSIONPROTEINGSTKGFCOULDBINDTOGSHSEPHAROSO4BANDHEPARINSEPHAROSACL6BANDHEPARINSEPHAROSECL石BPROTECTSTHEACTIVECORCOFKGFFROM自啊SINPROTEOLYSISTHE17KDKGFDERIVEDFROMGSTKGFWASPURIFIEDTOHOMOGENEITY52RAGPURIFIEDKGFATOTALRECOVERYOF泓KGF懈HARVESTEDWRESTEMBLOTANAL|RSISSHOWEDTHATTHEPMIFIEDKGFCOULDBEDETECTEDBYRABBITAGAIBSTHUMANKGFMTTASSAYWASUSEDTOINVESTIGATETHEEFFECTOFRECOMBINEDKGFONTHEPROLIFERATIONOFMOUSECORNEALEPITHELIALCELLSWHICHWERECULTUREDTHROUGH
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簡(jiǎn)介:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛蛙T、B淋巴細(xì)胞的主要生物學(xué)特性研究姓名鄧時(shí)銘申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師肖克宇20040401培養(yǎng)結(jié)果顯示只有1000№/ML慶大霉素組中T、B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒數(shù)為69.94±4.51%和72.36±1.89%,其它均低于50.00%。溫度增至28℃時(shí),環(huán)磷酰胺對(duì)T淋巴細(xì)胞有毒性作用,對(duì)B淋巴細(xì)胞無(wú)毒性作用;慶大霉素在500№/M1以上對(duì)T、B淋巴細(xì)胞均有毒性作用;鏈霉素250¨∥M1以上對(duì)T、B淋巴細(xì)胞均有毒性作用。關(guān)鍵詞牛蛙T淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞表面標(biāo)志免疫抑制
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簡(jiǎn)介:上海第二醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文神經(jīng)元突觸成份轉(zhuǎn)運(yùn)的分子和細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制研究姓名蔡倩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師盛祖杭20050501在本論文工作巾,我們還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)SYNTABULIN在神經(jīng)元線粒體順行軸漿運(yùn)輸過(guò)程中所發(fā)揮的另一個(gè)重要作用。SYNTABULIN屬外周膜相關(guān)蛋白,通過(guò)它的羧基末端尾部區(qū)域定位至線粒體。采用實(shí)時(shí)活細(xì)胞影像學(xué)技術(shù),可見(jiàn)神經(jīng)元中相當(dāng)數(shù)量的SYNTABULIN與線粒體肓共定位,并能夠沿神經(jīng)元突起共同移動(dòng)。弘SYNTABULIN特異性SIRNA抑制內(nèi)源性SYNTABULIN的表達(dá)或干擾SYNTABULIN與KINESINL重鏈間的相互作用可削弱線粒體在神經(jīng)元軸突中的順行運(yùn)輸,進(jìn)而降低了線粒體在其中的正常分布密度。結(jié)果提示,SYNTABUFIN作為一個(gè)連接分子還能夠?qū)⒕€粒體細(xì)胞器附著在以微管細(xì)胞骨架為基礎(chǔ)的馬達(dá)分子KINESINI上,并參與線粒體在神經(jīng)元的順行軸漿運(yùn)輸過(guò)程。已有報(bào)道,KINESINL作為一個(gè)候選馬達(dá)蛋白分子,同時(shí)參與了神經(jīng)元中SNAP25、SYNAPSINL、谷氨酸受體GLUR2、GAP43和線粒體等各種不同類型突觸成份在軸突和樹突中的運(yùn)輸過(guò)程。隨著對(duì)SYNTABULIN與KINESINI重鏈羧基末端尾部序列問(wèn)直接相互作用的闡明,為深入研究與SYNTABULIN和KINESINI相互作用有關(guān)的軸漿運(yùn)輸過(guò)程提供了一個(gè)重要線索。綜上所述,SYNTABULIN作為一個(gè)連接分子或是接合體復(fù)合物中的一個(gè)重要組成部分,參與神經(jīng)元中KINESINI所介導(dǎo)的多種物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)通路,如SYNTAXIN和線粒體細(xì)胞器沿神經(jīng)元突起的順行軸漿運(yùn)輸過(guò)程。該研究為進(jìn)一步研究和理解與神經(jīng)元其它重要突觸成份轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的分子和細(xì)胞學(xué)機(jī)制以及某些神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制提供了新思路。國(guó)際項(xiàng)尖權(quán)威雜志“自然細(xì)胞生物學(xué)2004年第10期發(fā)表的新聞專題評(píng)論認(rèn)為,此項(xiàng)研究成果是神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重大突破。關(guān)鍵詞SYNTAXIN,線粒體,KINESINI,微管,馬達(dá)蛋白。順行軸漿運(yùn)輸,膜轉(zhuǎn)運(yùn)
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簡(jiǎn)介:天津大學(xué)碩士學(xué)位論文懸浮培養(yǎng)南方紅豆杉細(xì)胞真菌誘導(dǎo)生物學(xué)效應(yīng)的研究姓名張長(zhǎng)平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化工指導(dǎo)教師元英進(jìn)2000121天津大學(xué)在職申請(qǐng)碩士學(xué)位論文摘要ABSTRACTTHEPHYSIOLOGYSTATUS,CELLULTRASTRUCTUREANDTHESECONDARYMETABOLISMOFSUSPENSION。CULTUREDTAXUSCHINESISVAR.MAIREIINFLUENCEDBYFUNGALELICITORFROMFUSARIUMOXYSPORUMWHICHWASADDEDINTOTHECULTUREDSYSTEMINTHELATEREXPONENTIALSTAGEWERESTUDIEDTAXOLWASTHEMAINSECONDARYMETABOLITEINTHECELLCULTURESSYSTEMANDELICITATIONBYFUNGALELICITORWASTHEMAINMETHODOFTHISPAPER.AFEWNEWTECHNOLOGIESOFTAXOLPRODUCTIONINCLUDINGELICITINGTHECELLSINFASKSYSTEMANDBIOREACTORSYSTEMBYFUNGALELICITORANDFILLINGUPTHEFRUCTOSEATTHESAWTETIME,ANDINDUCINGTHECELLSBYCOCULTUREMETHODWHICHTHEFUNGIWEREIMMOBILIZEDWEREDEVELOPED.THEBIOLOGICALEFFECTSOFIRAXUSCHINESISVAT.MAIREFBYDIFIERENTFUNGALELICITORWITHPREPARATIONWERERESEARCHEDCRUDEFUNGALELICITORORIGINATEDFROMFUNGALCELLWALLCOULDPROMOTETHETAXOLPRODUCTIONANDREACHED66.2MG/1FOURDAYSAFTERELICITATION.THEPHYSIOLOGICALSTATUSOFCELLSCHANGEDOBVIOUSLY.THEMEDIUMWASALKALINIZEDANDCONTENTOFPROTEININCREASEDMANYOXIDATIVEGROUPSWERERELEASEDBYOXIDATIVEBURSTINASHORTTIMEAFTERELICITATIONANDTHEACTIVITYOFALLKINDSOFENZYMESCHANGEDFLUCTUANTLYTHEACTIVITYOFPALWHICHWASAINTERESTENZYMEINPHENYLPROPANOIDMETABOLISMPATHWAYWASPROMOTEDANDTHEACCUMULATIONOFPHENOLICSWASHIGHER.THEFUNGALELICITORINFLUENCEDTHEEELLULTRSTRUCTURETOO.THEINTENSESTRUCTUREOFEELLAGGREGATESTENDEDTORELAXANDTHEMIDDLEAREAOFCELLAGGREGATESALTEREDMOSTOBVIOUSLYWHICHRESULTEDFROMTHEINHIBITIONOFPRIMARYMETABOLISMBYFUNGALELICITORTHEREWEREELCETRONDENSEPRECIPITATELININGTHETONOPLASTAFTERELICITATIONANDTHEAMOUNTOFELECTRONDENSEPL,ECIPITATEINCREASEDFIRSTANDDECREASEDFOLLOWED.THEMAINCOMPONENTOFWHICHWERECA’ANDCL_.WHICHHADRELATIONSHIPWITHTHECELLSIGNALTRANSMISSION.OVERALL,THECELLSTRUCTUREWASNOTSERIOUSLYDAMAGED,BUTTHESTRUCTURESOFCELLAGGREGATESANDTONPLASTCHANGEDDRAMATICALLY.THEACTIVECOMPONENTOFCRUDEELICITORWASOLIGOSACCHARIDEANDTHENONACTIVECOMPONENTCOULDINFLUENCEDTHEACTIVITYOFOLI20SACCHARIDEBYALTEREDTHEEXPOSURELEVELOFPOLYSACCHARIDETOCELLS.THETAXOLPRODUCTIONINCREASEDCONTRASTTOELICITATIONBYCRUDEFUNGALELICITORANDTHEPEAKVALUEOFTAXOLPRODUCTIONREACHED98.4MG/L1DAYAFTERELICITATIONATTHESAMETIME,THECELLSRESPONDEDTOTHEFUNGALELICITORMOREQUICKLYANDTHEPERIODOFELICITATIONWASSHORTED.THERESEARCHABOUTRELATIONSHIPBETWEENTAXOLPRODUCTIONANDCARBONSOURCEMETABOLISMSHOWEDTHATTHEFRUCTOSEWASBESTCARBONSOURCEFORTAXOLBIOSYNTHESIS.THEELICITATIONPOTENTIALITYOFELICITORWASBROUGHTINTOFULLPLAYBYADDINGTHEFRUCTOSEMEDIUMINTOTHESYSTEM,BYWHICHTHETAXOLPRODUCTIONWASPROMOTEDCOMPARINGTOTHEELICITATIONBYFUNGALELICITORALONE.THEPEAKVALUEOFTAXOLAMOUNTREACHED81.0MG/LINTHEFLASKAND71.7MG/LINTHEBIOREACTOR.THEIMMOBILIZEDFUNGICOULDINDUCETHETAX01ACCUMULATION,THEHIGHESTAMOUNTOFTAXOLREACHED55.3MG/LAFTER4DAYSELICITEDBYTHEM.DIFFERENTELICITATIONBYHADDIFFERENTTIMECOURSEOFELICITAFIONANDTHESPECIESOFMETABOLITEWEREDIFFERENTEITHER.KEYWORDSPLANTCELL,SUSPENSIONCULTURE,F(xiàn)UNGALELICITOR,IMMOBILIZATION,TAXOL,MORPHOLOGY,ENZYME,METABOLISM2
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簡(jiǎn)介:第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文HTERT基因轉(zhuǎn)染對(duì)人胚胎成纖維細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名梁光萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)外科學(xué)(燒傷專業(yè))指導(dǎo)教師羅向東200251驗(yàn)對(duì)HTERT基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞是否具有惡性表型進(jìn)行分析。結(jié)果1構(gòu)建了含有HTERT基因的熒光真核表達(dá)載體。2通過(guò)脂質(zhì)體法,將HTERT熒光正義真核表達(dá)載體及空載體導(dǎo)入HEF細(xì)胞經(jīng)G418篩選,各獲一個(gè)陽(yáng)性克隆,分別命名為HEFHTERT和HEFEGFP,并從DNA、MRNA和蛋白質(zhì)水平鑒定外源性HTERT基因成功導(dǎo)入HEF細(xì)胞,并可轉(zhuǎn)錄及翻譯。3HZFHTERT細(xì)胞端粒酶活性明顯高于HEF和HEFEGFP細(xì)胞O290O040VS0110001200930032,P001,端粒長(zhǎng)度得到延長(zhǎng),分別為60KB、53KB和54KB。體外培養(yǎng)60代后,HEF、HEFEGFP細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)減緩,而HEFHTERT細(xì)胞在體外培養(yǎng)70代后仍能每23天傳一代。4外源性HTERT轉(zhuǎn)染對(duì)HEF細(xì)胞端粒酶RNAHTR、端粒酶相關(guān)蛋白1TPL在MRNA水平上的表達(dá)無(wú)影響。5MTT法顯示,HEFHTERT細(xì)胞增殖明顯增快;蛋白免疫印跡檢測(cè)發(fā)現(xiàn),HEFHTERT細(xì)胞PCNA、IDL、I和111型膠原表達(dá)明顯增強(qiáng);流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn),HEFHTERT細(xì)胞GO/GL期細(xì)胞數(shù)較HEF和HEFEGFP細(xì)胞下降,S期和G2M期細(xì)胞數(shù)升高,增殖指數(shù)PI增高;透射電鏡下HEFHTERT細(xì)胞中線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器較HEF和HEFEGFP細(xì)胞豐富。6核型分析顯示HEFHTERT細(xì)胞染色體數(shù)目為46條;流式細(xì)胞儀檢測(cè)DNA未出現(xiàn)異倍體將HEF及其轉(zhuǎn)染細(xì)胞接種到裸鼠皮下均不產(chǎn)生致瘤性。結(jié)論本研究成功構(gòu)建了攜帶HTERT全長(zhǎng)CDNA序列的熒光真核表達(dá)載體HTERT,PLRES2EGFP,并將其穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至人胚胎成纖維細(xì)胞中,使細(xì)胞端粒酶得到活化,端粒長(zhǎng)度延長(zhǎng),從而使細(xì)胞壽命延長(zhǎng),細(xì)胞增殖能力得到明顯增強(qiáng),并且轉(zhuǎn)染細(xì)胞不產(chǎn)生惡性表型。,關(guān)鍵詞人端粒酶蛋白催化亞單位,人胚胎成纖維細(xì)胞熒光真核表達(dá)載體,細(xì)胞增殖,惡性表型/’~~
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簡(jiǎn)介:‘97717。附⑨西,£農(nóng)林針教大學(xué)2006屆攻讀項(xiàng)士學(xué)位研究生學(xué)位畢業(yè)論文I、F。瑚P基因轉(zhuǎn)染表皮干細(xì)胞及對(duì)其生物學(xué)特性影響的研究學(xué)科專業(yè)蝤席蛭蘭研究方向動(dòng)物胚胎工程研究生韓雅婷指導(dǎo)教帥竇忠英教授完成時(shí)間2Q06年5月實(shí)驗(yàn)成果及新見(jiàn)解建立起以酶消化法獲取原代表皮干細(xì)胞,IV型膠原差速篩選,有血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的山羊表皮干細(xì)胞培養(yǎng)體系。構(gòu)建ESCS多能性維持的關(guān)鍵基因NANOG的真核表達(dá)載體并導(dǎo)入山羊表皮干細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)NANOG可以促進(jìn)表皮干細(xì)胞表達(dá)一些ESCS特異性的標(biāo)志,并使表皮干細(xì)胞克隆形成能力有一定提高,體外培養(yǎng)能夠自發(fā)分化為神經(jīng)樣細(xì)胞,OCT一4陽(yáng)性,顯示NANOG可以促進(jìn)表皮干細(xì)胞表現(xiàn)部分ESCS的生物學(xué)特性。關(guān)鍵詞NANOG;表皮干細(xì)胞;山羊;胚胎干細(xì)胞
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簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文CCR7的表達(dá)及與配體CCL19對(duì)鼠小膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響姓名田勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生物學(xué)(遺傳學(xué))指導(dǎo)教師傅衍TATSUROKOIKE20060401
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簡(jiǎn)介:第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文人與小鼠神經(jīng)干細(xì)胞生物學(xué)特性的比較研究姓名姬西團(tuán)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)(神經(jīng)外科學(xué))指導(dǎo)教師章翔20040501第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文縮略語(yǔ)NSCSEGFHUEGF縮略語(yǔ)表英文全稱NEURALSTEMCELLSEPIDERMALGROWTHFACTORHUMANEPIDERMALGROWTHFACTORBFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACTORBNCTSDGFAPNF一200NGFRAESCSVZSGZBMSCGFPBDNFBMPCNFBORONNEUTRONCAPTURETHERAPYSPRAGUEDAWLEYGLIALFIBDLLARYACIDICPROTEINNEUROFILAMENT200NERVEGROWTHFACTORRETINOICACIDEMBRYONICSTEMCELLSSUBVENTRICULARZONESUBGRANULARZONEBONEMARROWMESENCHYMAISTEMCELLGREENFLUORECENTPROTEINBRAINDERIVEDNEUROTROPHICFACTORBONEMORPHOGENETICPROTEINCILIARYNEUROTROPHICFACTOR中文全稱神經(jīng)干細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子人源性表皮生長(zhǎng)因子堿性成纖維生長(zhǎng)因子硼中子俘獲技術(shù)大鼠種系膠質(zhì)纖維酸性蛋白神經(jīng)絲200神經(jīng)生長(zhǎng)因子維甲酸胚胎干細(xì)胞室管膜下區(qū)齒狀回的亞顆粒區(qū)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞綠色熒光蛋白腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子骨形成蛋白睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因
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簡(jiǎn)介:I盟些叢盥塋也韭L』城亟垡恥捌旦韭地蚶出生縫唑鞋盥娶垡址土盟芏盥蛐螬刪目錄摘第一章綜述~7第一節(jié)CSN復(fù)合體概進(jìn)7凹、CSN復(fù)合體的發(fā)現(xiàn)7CSN復(fù)合體的結(jié)構(gòu)11I成和分布8CSN復(fù)弁體的生化活性9CSN復(fù)臺(tái)體與泛錄/26S蚩閂酶體臍解途徑J0泛索/26S蛋口酶體降解途徑簡(jiǎn)介10二26S蛋白脯體12三CSN復(fù)合體與26S蛋白酶體的關(guān)系13四CSN復(fù)臺(tái)體與泛桑/26S蛋臼酶體降解途徑的關(guān)系14五、CSN復(fù)合體的細(xì)胞功能15CSN復(fù)合體和細(xì)胞捌期~15CSN復(fù)合體和摹兇表達(dá)16三CSN復(fù)合體和DNA修復(fù)1A、CSN復(fù)合體在植物生長(zhǎng)發(fā)育葉的重要作用178七、CSN復(fù)合體LLCSNI的功能19幫二節(jié)植物光信號(hào)傳遞選釋研究進(jìn)展。21、概述一2L_二、COP/DEF/FUS蛋白研究進(jìn)展21三、COPI結(jié)構(gòu)、分布和功能段研究進(jìn)展22第二節(jié)研究?jī)?nèi)容和意義24第二章CSNL對(duì)COPI細(xì)胞山定位的影響25引言。25第一竹材料與方法25一、材料25一、方法26一質(zhì)粒的構(gòu)建及箍定26二基凼槍法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮蜘胞,29一酵母雙雜交分析實(shí)驗(yàn)32四擬南芥萌發(fā)、雜交與GUS染色36五原核表達(dá)體系操作及PULIDOWN實(shí)驗(yàn)37第二符結(jié)果與分析一、洋慧表皮細(xì)胞中擬南撲CSN復(fù)合體的業(yè)基對(duì)COPI40業(yè)細(xì)胞定位帕影響盟生堅(jiān)赴世羔韭監(jiān)上J虹恥Ⅱ羔盟型旦韭地必岫丘世咀鞋咀盔垡盟D_塹噬坳監(jiān)蛆韭必摘要?jiǎng)hY22㈣27㈣595CL】P9信號(hào)復(fù)合體CSN是一個(gè)保守的蛋白復(fù)合件由8個(gè)下硎的皿_II組成依次命名為CSNICSN8。CSN復(fù)合體最初足在對(duì)擬南莽光形態(tài)發(fā)生的遺傳學(xué)研究TJ被發(fā)現(xiàn)的,R被變體幼苗都呈現(xiàn)組成型光形態(tài)建成的表型。CSN、COPI以及COPIODDBL一DETICDD復(fù)合體都是調(diào)節(jié)植物光反應(yīng)和發(fā)育的關(guān)鍵因子。COPL受到光信號(hào)影響會(huì)改變其在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)巾的丹布比例,早期擬南芥遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)COPI的細(xì)胞核定位需要CSN復(fù)合體的存在但CSN復(fù)合體影響COPI的細(xì)胞內(nèi)定位的分子機(jī)制還沒(méi)有報(bào)道。為了探討COPI在細(xì)胞內(nèi)定位的分子機(jī)制利用洋蔥表皮細(xì)胞瞬間表達(dá)系統(tǒng),我們發(fā)現(xiàn)批表達(dá)的CSNI能夠促進(jìn)GUSCOPI的細(xì)胞核定位,且CSNI的N一術(shù)端是促進(jìn)GUSCOPL細(xì)胞核定位的關(guān)鍵。同時(shí)利用擬卣井CSN/突變體,證實(shí)CSNI的N一末端是COPL實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核定位不可缺少的蛋白片段。進(jìn)而利用酵母積雜交系統(tǒng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)CSNL通過(guò)其N一末端結(jié)構(gòu)域直接和COPL的COILEDCOII結(jié)構(gòu)域發(fā)生相互作用并且通過(guò)免疫JT沉淀實(shí)驗(yàn)證實(shí)COPL乖LCSN復(fù)合體在擬南芥體內(nèi)存在豐F『互作J目。此外TCSNIXJ『COPL細(xì)胞棱定位的促進(jìn)作用需要COPL自身細(xì)胞核定位信號(hào)的參與,同時(shí)也與COP|的COILEDCOLL結(jié)構(gòu)域有關(guān)。COPI的COILEDCOIL結(jié)構(gòu)域不僅是CSNI的結(jié)合區(qū)。還包含了COPL細(xì)胞質(zhì)定位信號(hào)的一部分。這些發(fā)現(xiàn)使我FLCSN復(fù)臺(tái)體影響COPL的細(xì)胞定位的機(jī)制有了進(jìn)一步的了解為々后深入研究CSN復(fù)臺(tái)體調(diào)控植物光形態(tài)發(fā)生的分予機(jī)制提供了一定的儆據(jù)。CSN復(fù)合體最初被定義為擬南芥光形態(tài)發(fā)生的抑制因子,隨著研究的深入人們發(fā)£ECSN復(fù)合體參與真核生物的各種生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程以及細(xì)胞周期等細(xì)胞變化進(jìn)程。CSNI業(yè)基的卜末端包含一個(gè)PCI結(jié)構(gòu)域該結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)蛋白業(yè)基與亞基的相互作JIJ以及CSN復(fù)臺(tái)體的形成。CSNL的N一末端小參與CSN復(fù)合體的彤成,但是對(duì)CSN復(fù)合體的功能起著重要作刷,為了深入R解CSN復(fù)合體如何通過(guò)CSNL調(diào)控植物的生K發(fā)育等過(guò)程奉研究利用酵母取雜交文庫(kù)篩選技術(shù)尋找CSNL的卜未端相互作用蛋白扶得了5個(gè)候選蛋白分別是PAD2、TSAL、ELF_2家族蛋白、核糖體60S業(yè)基蛋E3L35以及個(gè)含C2結(jié)構(gòu)域的蛋向,州對(duì)其中的PAD2、TSAI的相關(guān)功能進(jìn)行了初步研究。PAD2是26S蛋白酶體的棱心組分20S蛋白酶體N勺Ⅱ亞基之一。已有證據(jù)揭示擬南芥中CSN復(fù)合體、26S蛋白酶體和SCF型黜連接酶能夠相互站臺(tái)形成更大的復(fù)臺(tái)體而日擬南芥SCF型E3可以通過(guò)SKPL亞基SNRK一蛋白激酶的直接相互作用錨定到PADL上。但日前關(guān)于CSN復(fù)合體通過(guò)何種方式參與其中還不是清楚,通過(guò)酵母雙雜交文庫(kù)篩選,我們發(fā)現(xiàn)PAD2的C一末端片段與CSNI的N很末
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