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簡介：單位代碼10222學號09863026分類號佳木斯大學臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文論文題目替比夫定對HEPG2腫瘤干細胞標記分子CD133、AFP的影響及其生物學意義的研究研究生姓名王立巍學科、專業(yè)內(nèi)科學導(dǎo)師姓名、職稱艾迎春教授論文答辯日期2012年6月9日學術(shù)誠信承諾本人鄭重聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，也不包含為獲得佳木斯大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。簽名___________日期____________關(guān)于論文使用授權(quán)的說明關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解佳木斯大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學校可以公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。（保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定）（保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定）簽名___________導(dǎo)師簽名___________日期____________目錄

簡介：該課題致力于從損傷后的成體肝臟中分離并長期培養(yǎng)具有雙向分化潛能的肝干細胞并對其生物學特性進行研究最近GDONGJ等報道了一種新的肝臟再生反應(yīng)他們首先用倒千里光堿RETRSINE抑制大鼠成熟肝細胞的再生能力然后通過肝23切除施以肝臟強大的再生刺激肝臟再生過程中肝實質(zhì)中會產(chǎn)生一種集落樣增殖的小肝細胞樣原始細胞SMALLHEPATOCYTELIKEPROGENITCELLSSHPCS并通過這種細胞的增殖和分化完成肝臟的再生該研究采用類似的方法損傷小鼠的肝臟發(fā)現(xiàn)小鼠的肝再生反應(yīng)與大鼠不同在小鼠再生肝中并沒有觀察到從形態(tài)學上可以分辨的小肝細胞樣原始細胞但是有明顯的膽管反應(yīng)和卵圓細胞增殖采用兩步膠原酶消化法從損傷后的再生肝中分離細胞經(jīng)過長期的培養(yǎng)和不斷的純化最終在體外建立了形態(tài)均一的連續(xù)細胞系該細胞系是典型的上皮樣細胞體外生長時成鋪路石樣排布在電鏡下觀察細胞核質(zhì)比大胞漿中除一些線粒體和核糖體外缺管乏其他細胞器在體外培養(yǎng)時細胞可以保持不分化狀態(tài)表達卵圓膽管細胞的分子標志如CK14、CK19OV6OC10CMET等還表達造血干細胞的分子標志如THY1CKITCD45等這表明該細胞具有肝干細胞的分子表型并因此將其命名為肝上皮樣原始細胞LIVEREPITHELIALPROGENITCELLSLEPCSDMSO和丁酸鈉是兩種最常用的小分子細胞分化細胞分化誘導(dǎo)劑在丁酸鈉作用下LEPCS的生長受到強烈抑制細胞體積增大核質(zhì)比減小誘導(dǎo)后第四天有雙核細胞產(chǎn)生電鏡下觀察胞漿中的細胞器較誘導(dǎo)前明顯增多有線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基本以及大量的核糖體和糖原顆粒在細胞與細胞之間還觀察到了肝細胞特征性的細胞間膽管結(jié)構(gòu)免疫細胞化學實驗表明誘導(dǎo)后的細胞表達成熟肝細胞功能性的分子標志如白蛋白、ALDOLASEB、APOA4、APOB、ADH等這有力的證明了在丁酸鈉作用下LEPCS可以被誘導(dǎo)分化為成熟肝細胞胞外基質(zhì)對細胞的生物學行為有著巨大的影響MATEIGEL基質(zhì)膠被廣泛的應(yīng)用于多種細胞類型的體外分化將培養(yǎng)的LEPCS接種于鋪有MATEIGEL基質(zhì)膠的培養(yǎng)皿后細胞很快聚集成團并向四周放射狀生長出許多管狀結(jié)構(gòu)在電鏡下可觀察到細胞團中包括膽管樣結(jié)構(gòu)肝干細胞量本質(zhì)的特征在于具有向成熟肝細胞和膽管上皮細胞分化的雙向潛能以上實驗結(jié)果表明LEPCS可以分化為成熟肝細胞和膽管上皮細胞分化的雙向潛能以上實驗結(jié)果表明LEPCS可以分為成熟肝細胞和膽管上皮細胞具有肝干細胞的特征采用逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染手段將LEPCS標記LACZ、EGFP和DSRED作為報告基因?qū)擞浐蟮募毎浦驳叫∈髶p傷后的肝臟中研究了LEPCS在體內(nèi)的分化走向發(fā)現(xiàn)LEPCS可以在肝臟的微環(huán)境中分化為成熟的肝細胞并嵌和進入肝實質(zhì)在形態(tài)學上與臨近肝細胞不可區(qū)分這進一不證明了LEPCS是一種來自小鼠損傷肝臟的肝干細胞系同時也展示了肝干細胞在肝損傷性疾病治療方面的潛在應(yīng)用價值我們首次從倒千里光堿損傷的小鼠肝臟中建立了肝干細胞系目前尚未見到從小鼠損傷肝臟中建立類似細胞系的報道該細胞系已經(jīng)在體外培養(yǎng)了一年以上傳代超過30代細胞保持了正常的核型和增殖能力裸鼠移植實驗證明細胞不具有致瘤性LEPCS的建立為研究肝臟的發(fā)育、肝臟損傷后的修復(fù)、肝臟腫瘤發(fā)生以及肝臟疾病的細胞治療的重大生物學和醫(yī)學問題提供了理想的細胞模型和材料

簡介：分類號R7337R7305密級單位代碼10422學號200712865◎∥茹只孥碩士學位論文SHANDONGUNIVERSITYMASTER’STHESIS論文題目CD44基因沉默對K562／A02細胞逆轉(zhuǎn)耐藥及生物學活性的研究EFFECTOFCD44GENESILENCEONMULTIDRUGRESISTANCEREVERSALANDBIOLOGICACTIVITYINK562／A02CELLLINE作專導(dǎo)合作導(dǎo)師2010年5月6日么山東大學碩士學位論文目錄中文摘要1英文摘要3符號說明5正文前言6朗看’第一部分CD44基因的SIRNA真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定材料與方法9結(jié)果17討論L8結(jié)論20附圖21‘第二部分抑FL型JCD44基因的表達對K562／A02細胞耐藥性的影響及作用機理的研究材料與方法22結(jié)果30討論31結(jié)論37附表38附圖39參考文獻42致謝47碩士研究生期間發(fā)表的文章48

簡介：上海交通大學碩士學位論文上海交通大學碩士學位論文環(huán)腺苷酸擬似物對骨髓瘤細胞環(huán)腺苷酸擬似物對骨髓瘤細胞生物學行為的影響及其機制研究生物學行為的影響及其機制研究研究生杭海芳學號9117009070學科專業(yè)學科專業(yè)內(nèi)科學（血液?。?dǎo)師朱琦教授導(dǎo)師組成員導(dǎo)師組成員吳英理研究員鄒麗芳副主任醫(yī)師姚一蕓副主任醫(yī)師研究方向研究方向多發(fā)性骨髓瘤靶向治療申請學位級別申請學位級別碩士資助基金項目資助基金項目上海市自然科學基金（面上項目12ZR1416800）上海市自然科學基金（面上項目13ZR1423800）培養(yǎng)單位培養(yǎng)單位上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院答辯日期答辯日期2015年4月上海交通大學上海交通大學學位論文原創(chuàng)性聲明學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者簽名日期年月日

簡介：目的基于目前各種血管內(nèi)皮細胞VULARENDOTHELIALCELLSVECS的培養(yǎng)方法還存在一些問題如取材困難、操作復(fù)雜、周期長、細胞量小、不能反復(fù)傳代、經(jīng)濟成本高等。本研究通過對傳統(tǒng)酶消化法獲取血管內(nèi)皮細胞的方法進行改良探討此方法可以解決傳統(tǒng)方法的部分問題并初步研究VECS的生物學特性還對與VECS具有協(xié)同作用的脂肪來源干細胞ADIPOSEDERIVEDSTEMCELLSADSCS進行了基礎(chǔ)研究為后續(xù)脂肪移植血管化與脂肪組織工程血管化研究篩選性能良好的種子細胞奠定一定的細胞基礎(chǔ)。方法1脂肪來源血管內(nèi)皮細胞的初步提取采用膠原酶消化SD大鼠睪丸囊脂肪組織以改良式方法去除脂肪筋膜組織、保留微血管、減少膠原酶消化時間初步獲取脂肪來源血管內(nèi)皮細胞。2細胞的純化與擴增通過酶消化法人工純化、擴增血管內(nèi)皮細胞。3生物學特性檢測通過倒置顯微鏡觀察凍存前與復(fù)蘇后凍存于液氮中12個月的P3及P15代VECS細胞后觀察細胞形態(tài)及貼壁時間有無明顯差異采用MTT比色法檢測細胞的增殖狀況。4鑒定流式細胞儀FCM檢測細胞表面標志物CD31、CD29及第Ⅷ因子相關(guān)抗原以明確分離培養(yǎng)的細胞為VECS。5活體移植將血管內(nèi)皮細胞混懸液局部皮內(nèi)注射移植入大鼠皮膚創(chuàng)面與對照組比較創(chuàng)面愈合率。6脂肪來源干細胞的培養(yǎng)依據(jù)傳統(tǒng)方法分離、純化、擴增ADSCS通過流式細胞儀檢測細胞表面標志物CD29、CD31及CD44體外誘導(dǎo)ADSCS向成骨細胞及成脂細胞分化采用茜素紅及油紅O染色鑒定證實ADSCS具有成骨和成脂的多向分化能力。7脂肪來源干細胞的體內(nèi)示蹤體外觀察CMDII標記后ADSCS的細胞形態(tài)檢測體內(nèi)移植CMDII標記的ADSCS后24H及5D的示蹤效果。結(jié)果1采用改良式分離VECS的方法成功獲取大鼠VECS。2觀察原代及傳代VECS細胞形態(tài)及生長情況無明顯差異MTT比色法檢測細胞的增殖率長期凍存復(fù)蘇后仍能夠保持良好的生物學特性。3流式細胞儀FCM檢測CD31及第Ⅷ因子相關(guān)抗原均較高表達初步明確分離培養(yǎng)的細胞為VECS。4將VECS移植入大鼠皮膚創(chuàng)面與對照組相比無明顯促愈和作用。5依據(jù)傳統(tǒng)方法分離培養(yǎng)的ADSCS細胞生長良好經(jīng)成骨和成脂誘導(dǎo)后具有定向分化為骨細胞及脂肪細胞能力CMDII能標記體外培養(yǎng)的ADSCS標記的細胞形態(tài)良好對細胞無毒性作用標記率偏低體內(nèi)示蹤效果不好。結(jié)論1改良式分離VECS方法的優(yōu)點與傳統(tǒng)培養(yǎng)方法比較本方法取材容易、培養(yǎng)條件簡單、無需添加多種細胞因子、細胞增殖力強、重復(fù)性較好。2VECS深低溫凍存12月余后仍能夠保持良好的細胞生物學特性。

簡介：廣州醫(yī)學院碩士學位論文白血病兒童骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及其生物學特性和免疫調(diào)節(jié)功能的初步研究姓名吳麗萍申請學位級別碩士專業(yè)兒科學指導(dǎo)教師陳福雄20090520白血病兒童骨髓間充質(zhì)下細胞的分離、培養(yǎng)及其生物學特性和免疫調(diào)節(jié)功能的初步研究HLADR、CDL4。在相應(yīng)的誘導(dǎo)條件下，可以向脂肪及骨細胞分化，油紅0染色及茜素紅染色呈陽性。在MSCS與MNCS細胞相互接觸共培養(yǎng)體系中，當MSCSMNCSI100時，MSCS能抑制PHA和IL2刺激的MNCS的增殖，隨MSCS數(shù)量增加，抑制作用更加明顯；隨MSCS數(shù)量減少，MSCS對PHA和IL一2刺激的MNCS的增殖抑制作用減弱，當MSCSMNCS≤L100時，MSCS在一定程度上可促進MNCS的增殖；而TRANSWELL非接觸性共培養(yǎng)體系中發(fā)現(xiàn)，MSCS能夠促進MNCS的增殖。MSCS與MNCS不同比例共接觸培養(yǎng)后檢測IFNY及PERFORIN的分泌，MSCSMNCSL10時對細胞因子的分泌與受IL2PHA刺激后單獨MNCS培養(yǎng)相比明顯下降。檢測接觸共培養(yǎng)體系中淋巴細胞亞群比例改變結(jié)果顯示，各組CD3CD4比例無明顯改變；當MSCSMNCSI100時，CD3CD8比例減少，CD4CD25HI比例升高；而當MSCSMNCSL1000時，CD3CD4，CD3CD8，CD4CD25HI比例與單獨MNCS培養(yǎng)時比例無明顯差異。結(jié)論①白血病患兒骨髓培養(yǎng)出的貼壁細胞是MSCS，骨髓含量在LML以上且方法得當可以培養(yǎng)出MSCS。②初診的白血病患兒的骨髓相對容易培養(yǎng)出骨髓MSCS，且在體外擴增速度較快。③白血病兒童來源的MSCS具有MSCS的共同生物學特性。MSCS在體外對MNCS增殖的影響具有兩面性，而且呈劑量依賴性。在一定比例內(nèi)本研究MSCSMNCSI100時，MSCS對MNCS增殖的抑制作用隨著MSCS加入的濃度升高而增強；當MSCS與MNCS小于一定比例本研究MSCSMNCS≤1100時，MSCS的抑制作用減少，有可能促進MNCS的增殖。⑤在MNCS與MSCS的接觸共培養(yǎng)體系中，MSCS可以抑制PHA作用下MNCS中免疫效應(yīng)細胞分泌IFNY、PERFORINP005，當MSCS與MNCS的比例小到一定程度時，抑制作用消失。MSCS可以影響與MSCS接觸共培養(yǎng)的MNCS中的淋巴細胞亞群比例，下調(diào)CD8細胞的比例而上調(diào)CD4CD25HIT細胞比例，呈劑量依賴性的。關(guān)鍵詞自血病兒童骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性免疫調(diào)節(jié)功能一3一

簡介：分類號R781密級單位代碼10422學號201113930⑧厶菇辦I碩士學位論文論文題目結(jié)締組織生長因子CTGF對人牙周膜成纖維細胞生物學活性的影響B(tài)IOLOGICALEFFECTSOFCONNECTIVETISSUEGROWTHFACTORONCULTUREDHUMANPERIODONTALLIGAMENTFIBROBLASTSINVITRO合作導(dǎo)師2014年4月20EL目錄中文摘要1英文摘要5中英文縮略詞表11實驗一人牙周膜成纖維細胞的分離和培養(yǎng)材料與方法16結(jié)果22討論23實驗二結(jié)締組織生長因子CTGF對入牙周膜成纖維細胞生物學活性的影響材料與方法26結(jié)果36討念39結(jié)論45附表46附圖48參考文獻57致謝63攻讀碩士學位期間發(fā)表的文章目錄64

簡介：第一軍醫(yī)大學碩士學位論文人骨髓間充質(zhì)干細胞集落培養(yǎng)及其生物學特性的研究姓名陳偉申請學位級別碩士專業(yè)血液病學指導(dǎo)教師李江琪20040515序言骨髓組織除含有造血干細胞以外，還含有骨髓間充質(zhì)干細胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS。早期分離培養(yǎng)時，發(fā)現(xiàn)其形狀呈成纖維細胞樣而稱其為“成纖維細胞集落形成單位”或“骨髓基質(zhì)成纖維細胞”。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)其對骨髓血系細胞起支持誘導(dǎo)作用，又因其來自于骨髓基質(zhì)，因而稱其為“骨髓基質(zhì)細胞”。近來因其在不同的誘導(dǎo)條件下，具有向中胚層組織細胞分化的能力，如向成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞、成纖維細胞等分化的能力，又稱其為“間充質(zhì)干細胞”、“間充質(zhì)祖細胞”或“骨源性干細胞”。MSCS因其獨特的優(yōu)勢易于分離和體外培養(yǎng)擴增、易于外源基因轉(zhuǎn)染和表達、向多種組織和細胞類型分化的潛能、并因與造血干細胞共同移植加快造血恢復(fù)作用及降低GVHD的作用，受到多領(lǐng)域科研者的青睞，認為其在組織工程和基因治療等生物醫(yī)學領(lǐng)域具有非常廣闊的應(yīng)用前景，將迎來未來醫(yī)學變革的新時代。但其目前存在的幾個基礎(chǔ)問題仍未完全得到解決L、骨髓中MSCS含量極微在1106個骨髓單個核細胞中僅有2～5個MSCS體外需要擴增。2、分離方法貼壁法、密度梯度離心法分離雖然簡單，花費較少，但細胞含有多種細胞成分。流式細胞儀分離得到較為純凈、均一的MSCS，但其活性則完全喪失。3、由于目前尚無MSCS的特異性標志，對MSCS的特征描述及其分離方法都是以一個細胞群體的形式進行的，并且骨髓基質(zhì)細胞的判斷還是以其生物學行為做回顧性判斷，現(xiàn)在似乎更多的是通過干細胞實驗結(jié)果來反推所培養(yǎng)的細胞是干細胞。4、它的生物學特性還遠未完全了解清楚。不同的培養(yǎng)方法生物學特性也會存在差異?；谝陨蠁栴}，本實驗研究圍繞以下幾個方面進行。1、擬建立一條體外培養(yǎng)技術(shù)路線，設(shè)法獲得較為純凈、均～的間充質(zhì)干細胞，并且便于培養(yǎng)和擴增，為廣泛深入研究HBMSCS及其在臨床的開展和應(yīng)用提供依據(jù)。2、檢測臨床相關(guān)的生物學特性，探討臨床應(yīng)用的可能性。3、向神經(jīng)干細胞定向誘導(dǎo)分化，作回顧性的判斷，進一步來驗證間充質(zhì)干細胞。

簡介：第一軍醫(yī)大學碩士學位論文補腎中藥對成骨細胞生物學功能的影響及骨橋蛋白基因表達調(diào)控的研究姓名吳賀勇申請學位級別碩士專業(yè)中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師李娟20050530中文摘要T要有鹿茸、鹿角膠、菟絲予、骨碎補等補L腎陽、強筋骨中藥組成。經(jīng)過動物實驗及多年的臨床應(yīng)用證實骨靈丸具有良好的抗骨質(zhì)疏松作用，但骨靈丸抗骨質(zhì)疏松具體機制尚未清楚。鑒于OB、OPN在骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的重要作用，因此，從骨靈丸對OB的生物學功能的影響及對OPN基因表達調(diào)控來研究其抗骨質(zhì)疏松機理。研究目的1、建立分離和培養(yǎng)OB的最優(yōu)方法2、探討補腎中藥血清對體外培養(yǎng)的0B生物學作用的影響及OPN基因表達的調(diào)控；3、在0BOC共同培養(yǎng)體系中探討骨靈丸對OB部分生物學功能的影響及OPN基因表達的調(diào)控，以探討補腎中藥在不同培養(yǎng)體系中對OPND基因表達的調(diào)控與礦化結(jié)節(jié)形成之間的關(guān)系。方法1選擇新生的SD乳鼠頭顱骨，應(yīng)用改良的胰酶一膠原酶消化法分離OB，并結(jié)合骨片貼塊法培養(yǎng)OB，采用細胞的形態(tài)學、細胞酶化學方法鑒定培養(yǎng)的OB；2、運用血清藥理學的方法對補腎中藥血清在細胞水平上抗骨質(zhì)疏松機制的研究；3在不同的培養(yǎng)體系探討含補腎中藥血清血清對OB的生物學作用及OPN基因表達調(diào)控的研究；4實驗分五組補腎中藥血清高劑量組HIGHDOSES，LID、補腎中藥血清中劑量組MIDDLEDOSES，MD、補腎中藥血清低劑量組LOWDOSES，LD、空白血清對照組CONTR01、陽性對照組17，B雌二醇組，ESTROL，E2；5應(yīng)用對硝基苯酚法、流式細胞技術(shù)、四唑鹽比色法MTT和茜素紅染色法對含骨靈丸血清作用0B后的堿性磷酸酶ALKALINEPHOSPHATASE，ALP活性、細胞周期及細胞凋亡、增殖及礦化功能進行測定；6運用免疫印跡WESTERNBLOT檢測OPN表達，應(yīng)用半定量RTPCR方法對OPN的基因表達進行分析；

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簡介：趔熊江熬￡△墾量塞達盤應(yīng)膣痘△塑細胞生塹堂塹邊煎顯嚙⑧論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名論文評閱人1評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5答辯委員會主席罷明圭堡醫(yī)痘浙婆太堂醫(yī)堂院隘屬篚三醫(yī)瞳委員1迕盎連童焦醫(yī)短浙江盆厶民醫(yī)院委員2揚鋈漁副圭堡醫(yī)瘟浙江太堂醫(yī)堂陡隘厘筮二醫(yī)睦委員3委員4委員5浙江大學碩士學位論文致謝致謝首先，我要感謝我的導(dǎo)師胡堅教授在學習和科研中給予我的悉心指導(dǎo)和諄諄教誨在寶貴的三年碩士研究生學J階段，胡老師言傳身教，身體力行，嚴格要求，悉心栽培，令我收獲頗豐。導(dǎo)師給了我大師級的思想啟迪，讓我受益非淺在整個課題完成過程中給我提供了優(yōu)越的科研條件，使我的碩士課題得以順利完成。不僅在學J和工作上，而且在生活上導(dǎo)師亦給了我家人般無微不至的關(guān)懷，感恩之情無以言表導(dǎo)師精湛的外科技術(shù)、嚴謹?shù)闹螌W作風、誠信的處世風范以及嚴于律己的精神，是我一生的榜樣，將永遠激勵我向前我要特別感謝杭州師范大學孫鸝老師以給我具體的實驗技術(shù)支持她嚴謹?shù)闹螌W作風和高屋建瓴的學科理念為我們建立了一個寬松、富于創(chuàng)造性的學J和科研環(huán)境，深深的感激著我。我還要感謝王志田、包飛潮師兄和泮輝老師在本課題實施和論文撰寫過程中給予的無私幫助和鼓勵感謝浙一醫(yī)院胸外科肺移植實驗室呂望、曾理平、洪譽鵬、阿布、袁小帥、孫奉昊、盛景慧、許挺輝、傅林海、韓佳、勵逑元、孟迪、曹隆想、周振宇等各位同學。一路上有你們陪伴，在肺移植實驗室這個激情科研，快樂成長的大家庭里，原來平淡的日子成了我生命力美好的回憶。我還要特別感謝我的父母，感謝他們的養(yǎng)育之恩及對我多年學業(yè)的默默支持；衷心感謝我身邊的親人和朋友，有了他們的理解和支持，才使我能夠順利完成學業(yè)。在此表示誠摯的謝意最后，對參加本文評議、評閱和答辯的所有專家和老師表示真誠的謝意

簡介：中國醫(yī)科大學博士學位論文血管內(nèi)皮細胞蛋白激酶C與錨蛋白、CD44分子生物學特性之間關(guān)系的研究姓名郝一文申請學位級別博士專業(yè)影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導(dǎo)教師李亞明20050301臣垂囊晤血管內(nèi)皮細胞蛋白激酶C與錨蛋白、CD44分子生物學特性之間關(guān)系的研究前言CD44分子是廣泛分布于血管內(nèi)皮細胞、血細胞、淋巴細胞、成纖維細胞等細胞的重要粘附分子，與配體透明質(zhì)酸、膠原蛋白、纖維連接素等結(jié)合后介導(dǎo)了淋巴細胞“歸巢”和轉(zhuǎn)化、腫瘤轉(zhuǎn)移、信號傳導(dǎo)等生理或病理過程。其分子胞漿側(cè)與細胞骨架蛋白錨蛋白相連接，并存在一個高度特異性結(jié)合區(qū)域，此區(qū)域內(nèi)含有PKC磷酸化位點。研究證實PKC對此位點的磷酸化能顯著增強二者結(jié)合力。研究還發(fā)現(xiàn)，PKC活化對CD44變構(gòu)體及ICAML、VCAM一1等粘附分子的表達有調(diào)節(jié)作用。因此，我們利用PMA活化HUVECSPKC來觀察PKC活性對血管內(nèi)皮細胞CD44的表達及粘附性有無影響。錨蛋白是連接CD44跨膜糖蛋白與細胞內(nèi)骨架網(wǎng)絡(luò)的橋梁。在淋巴細胞上，研究發(fā)現(xiàn)PKC活化可引起細胞內(nèi)錨蛋白的重新分布。那么，在血管內(nèi)皮細胞上會不會也出現(xiàn)這種情況呢并由此改變細胞骨架網(wǎng)絡(luò)的立體結(jié)構(gòu)而造成細胞的形態(tài)及細胞之間連接關(guān)系的變化，從而影響內(nèi)皮細胞通透性呢由于錨蛋白與CD44相連，如果有錨蛋白的移位，會不會同時牽動CD44的移位我們利用免疫熒光標記法觀察PKC活化后HUVECSCD44、錨蛋白的分布情況。PKC是一種信使傳遞酶，CD44分子與配體結(jié)合后胞內(nèi)CA2升高，而PKC是第二信使CA2及DAG的靶蛋白，CA“升高必然會引發(fā)PKC活化，通過其磷酸化作用將刺激信號傳遞下去。那么，信號傳導(dǎo)的實際途徑如何呢RAF一1激酶是細胞內(nèi)許多生物學信號傳導(dǎo)第一步，可以接受酪氨酸激酶家族或PKC的活化，并進而引起酶鏈反應(yīng)RAF一1一MEKERK。我們利用PKC激活劑及抑制劑來觀察HUVECSCD44基因的表達及CD44分子磷酸化情況，對RAF一1激酶活性進行分析，并比較了RAF一1激酶、MEK、ERK抑制劑對HUVECSCD44基因表達的影響，觀察PKC能否直接活化上述途徑，據(jù)此探討PKC對CD44分子表達的信號調(diào)控1

簡介：山東大學碩士學位論文保存液對再植脫位牙牙周膜成纖維細胞生物學活性的影響姓名林青申請學位級別碩士專業(yè)口腔內(nèi)科學指導(dǎo)教師楊丕山20050418山東大學碩士學位論文保存液對再植脫位牙牙周膜成纖維細胞生物學活性的影響研究生林青導(dǎo)師楊丕山教授專業(yè)口腔內(nèi)科學摘要耳的脫位牙即時、有效的保存以防止牙周膜的干燥非常重要，這能直接影響再植牙的成功率。下列四種因素對牙周膜的愈合有明顯的影響強弱的次序為牙根發(fā)育的階段、口外保存時間的長短、立即再植、濕保存時間的長科”。應(yīng)盡快將其浸泡在生理性平衡介質(zhì)中，牙周膜細胞的生物學活性就可維持較長時間。保存劑的篩選是牙再植研究中的一項重要內(nèi)容，國內(nèi)對于脫位牙保存劑選擇方面的研究非常少見，而對于體外測定再植牙的牙周膜細胞的活性來評價選擇脫位牙保存劑的報道更少見。本研究在體外培養(yǎng)人牙周膜細胞的基礎(chǔ)上，用MTT四唑鹽比色實驗法，比較脫位牙牙周膜細胞在六種不同的保存液DMEM培養(yǎng)液、HBSS液、O．9％生理鹽水、唾液、牛奶、自來水浸泡半小時、4,時、一個半小時、兩小時四個時間段后對細胞生物學活性的影響。方法L、人牙周膜細胞的體外培養(yǎng)取自臨床上13～19歲因正畸需要拔除的無齲病、無齦炎的前磨牙，拔除該牙后，刮下根中L，3部位的牙周膜組織。按組織塊貼壁法，用含10％FCS的DMEM培養(yǎng)液，在37“2，5％C02條件下培養(yǎng)．細胞生長達匯合點后，用2．5G／L胰蛋白酶消化進行傳代，取第8代細胞用于實驗。2、細胞增殖活性的研究取生長良好的第8代人牙周膜細胞，將細胞常規(guī)消化，調(diào)整細胞濃度以2X105／MI的濃度接種于四個96孔板內(nèi)，每孔100‘I1．細胞在含10％FCS的

簡介：本文探討骨髓間充質(zhì)干細胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMSCS的生物學特性，地塞米松DEXAMETHASONE，DEX對BMSCS向成骨細胞誘導(dǎo)分化的最佳作用濃度，評價以BMSCS為種子細胞，10％珊瑚羥基磷灰石CALHYDROXYAPATITE，CHA為支架材料構(gòu)建的組織工程骨自體皮下的成骨能力。1兔骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學特性和向成骨細胞誘導(dǎo)分化的研究結(jié)論1骨髓是良好的間充質(zhì)干細胞來源，通過密度梯度離心法能從兔骨髓中提取到BMSCS，具有旺盛的增殖能力和多分化潛能。2109MOLL、108MOLL濃度的DEX與10MMOLLΒ甘油磷酸鈉、50MGLL抗壞血酸聯(lián)合作用下，能夠明顯促進BMSCS向成骨細胞的分化。3DEX對BMSCS有保護促進增殖的作用。4BMSCS在低營養(yǎng)環(huán)境下，通過進入低消耗的抑制狀態(tài)，對低營養(yǎng)環(huán)境有較強的耐受能力，仍保持旺盛的增殖力。5BMSCS是組織工程良好的種子細胞來源。2兔骨髓間充質(zhì)干細胞復(fù)合珊瑚羥基磷灰石自體皮下移植的成骨研究結(jié)論110％CHA有良好的生物相容性，良好的細胞材料表面，BMSCS能在10％CHA表面很好地黏附生長。210％CHABMSCS細胞復(fù)合物在兔子體內(nèi)可見有明顯的成骨現(xiàn)象，未見明顯的免疫排斥反應(yīng)。3以BMSCS為種子細胞，CHA為支架材料構(gòu)建的組織工程骨，可能成為臨床顱骨缺損修復(fù)的自體骨來源之一。