人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過SDF-1α-CXCR4軸調(diào)控胃癌KATO-III細(xì)胞生物學(xué)特性的研究.pdf

1、目的：
　　研究人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對胃癌KATO-III細(xì)胞生物學(xué)特性的調(diào)控機(jī)制。
　　材料與方法：
　　利用Transwell小室構(gòu)建人胃癌細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的非接觸共培養(yǎng)模型，進(jìn)而將KATO-III細(xì)胞分為KATO-III細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組和KATO-III細(xì)胞與BMSCs非接觸共培養(yǎng)組，分別予以SDF-1α刺激、或/和阻滯劑(AMD3100或LY294002)阻滯。觀察SDF-1α刺激KATO-III細(xì)胞2h后的

2、刺激作用。進(jìn)而觀察AMD3100或LY294002預(yù)處理KATO-III細(xì)胞30 min后，再加入SDF-1α刺激兩小時(shí)后的效應(yīng)變化。此外，亦以無SDF-1α刺激為對照，由此分為不同亞組(表2)。所有檢測的目的細(xì)胞均為KATO-III細(xì)胞。采用CCK-8法檢測各組KATO-III細(xì)胞的增殖能力以及對氟尿嘧啶(5-FU)和順鉑的敏感性，Transwell小室法檢測其侵襲能力，半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法鑒定CD133、CXC

3、R4、凋亡相關(guān)因子及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化因子的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　與單獨(dú)培養(yǎng)相比，BMSCs可調(diào)控KATO-III細(xì)胞干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物的表達(dá)，促進(jìn)KATO-III細(xì)胞增殖能力(P<0.05)。經(jīng)5-FU或順鉑處理后，共培養(yǎng)組的KATO-III細(xì)胞較單獨(dú)培養(yǎng)組相比抑制率顯著降低(P<0.05)。經(jīng)BMSCs調(diào)控后的KATO-III細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)高于單獨(dú)培養(yǎng)組(P<0.05)。RT-PCR檢測示BMSCs調(diào)控組CD133、CXCR

4、4、抗凋亡因子Bcl-2及N-cadherin、Snail mRNA相對輝度值顯著高于單獨(dú)培養(yǎng)組(均P<0.05)，而促凋亡因子Bax及上皮粘附因子E-cadherin表達(dá)水平降低(均P<0.05)。同時(shí)，使用AMD3100或LY294002處理BMSCs調(diào)控的KATO-III細(xì)胞，與單獨(dú)培養(yǎng)組中的調(diào)控效應(yīng)類同，可顯著降低其增殖能力、耐藥能力及侵襲能力，而且CD133、CXCR4、抗凋亡因子Bcl-2、N-cadherin及Snail等