酶?jìng)鞲衅魃A(chǔ)與免疫力指標(biāo)量化研究.pdf

1、酶?jìng)鞲衅鲗⒚缸鳛槊舾性?，把酶催化反?yīng)過程中的物理或化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)以檢測(cè)被測(cè)物。由于反應(yīng)的高效性與專一性，酶在生物傳感器的研究中被應(yīng)用廣泛。
　　 本文通過對(duì)辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase，簡(jiǎn)稱HRP，EC1.11.1.7）催化過氧化氫氧化苯酚的反應(yīng)體系進(jìn)行數(shù)值模擬，研究了酶?jìng)鞲衅鳈z測(cè)的生化基礎(chǔ)。模擬得到：
　　 1）反應(yīng)方程的求解必須考慮其剛性問題，對(duì)于剛性方程，應(yīng)該使用ODE15S

2、。
　　 2）催化反應(yīng)中間復(fù)合物HRP-Ⅰ與HRP-Ⅱ隨時(shí)間變化的動(dòng)力學(xué)曲線，并能確定其存在的時(shí)間。
　　 3）多組不同濃度下的反應(yīng)過程曲線，對(duì)比了不同濃度下的反應(yīng)速率，結(jié)果表明數(shù)值模擬能有效的減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)與縮短實(shí)驗(yàn)周期。
　　 溫度和pH對(duì)酶?jìng)鞲衅鳒y(cè)量精度影響較大，為了減少酶?jìng)鞲衅髟趯?shí)際測(cè)量中的誤差，指明了當(dāng)前研究中將溫度和pH值兩個(gè)相關(guān)因素單獨(dú)考慮的局限性。準(zhǔn)確得到綜合考慮了不同溫度、pH值條件下，聚硫堇和納

3、米金固定辣根過氧化物酶?jìng)鞲衅黜憫?yīng)電流的特征，結(jié)果表明：
　　 1）單因素離散試驗(yàn)點(diǎn)分析，不能準(zhǔn)確得到酶?jìng)鞲衅鞯淖钸m工作條件。綜合考慮溫度和pH值，該酶?jìng)鞲衅髯钸m工作條件在40——45℃之間，最佳pH值在5.3——5.7之間；
　　 2）以溫度、pH值與響應(yīng)電流之間的函數(shù)關(guān)系作為傳感器校正，以及實(shí)現(xiàn)線性化處理和非線性補(bǔ)償電路的基礎(chǔ)，能夠提高酶?jìng)鞲衅鞯臏y(cè)量精度，擴(kuò)大使用范圍。
　　 復(fù)合酶?jìng)鞲衅骺梢詫?duì)同一樣品多個(gè)指標(biāo)

4、同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)各單一指標(biāo)進(jìn)行處理以獲得綜合性指標(biāo)。免疫力是由多指標(biāo)共同表達(dá)的一個(gè)綜合性指標(biāo)，通過對(duì)中華米蝦（Caridina denticulata sinensis）投喂硒含量分別為0、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75（μg/g）的飼料，研究了硒對(duì)中華米蝦體內(nèi)超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（Catalase， CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione per

5、oxidase，GPX）等抗氧化酶活性的影響，并探討了其可能的作用機(jī)制。
　　 結(jié)果表明：
　　 1）中華米蝦體內(nèi)抗氧化酶具有協(xié)同效應(yīng)，并且對(duì)硒表現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)；
　　 2）當(dāng)飼料中添加硒濃度為0.44μg/g時(shí)，蝦體內(nèi)SOD、CAT的活性均為最高；當(dāng)硒濃度為0.48μg/g時(shí)，GPX活性最高。
　　 分析了當(dāng)前甲殼動(dòng)物免疫力研究指標(biāo)，指出目前對(duì)免疫力進(jìn)行評(píng)判存在的兩個(gè)缺陷：1）不能綜合反映免疫力水平