不同時間窗介入運動訓練對腦出血大鼠恢復的影響及可能的機制.pdf

1、 目的：探討實驗性腦出血大鼠運動介入的最佳時間,為臨床腦出血患者何時運動介入提供指導意義；初步揭示運動訓練促進實驗性腦出血大鼠神經功能,運動能力恢復的可能機制。方法：將SD雄性大鼠隨機分為對照組,模型組,和實驗組,實驗組根據手術后開始運動的時間分為3個組包括,12小時運動組,4天運動組,8天運動組。模型組和實驗組大鼠用膠原酶和肝素注射到尾狀核制備腦出血模型。對照組大鼠用生理鹽水代替膠原酶和肝素。模型組大鼠和對照組大鼠不進行運動訓練。每

2、組大鼠根據手術后處死大鼠的時間又分為3天,7天,14天,21天四個亞組,每組大鼠在手術麻醉蘇醒后立即采用神經功能評分,評分達到一定分數的大鼠才能納入實驗數據；應用HE染色觀察各組大鼠血腫周圍組織形態(tài)學變化；采用免疫組織化學法測定各組大鼠血腫周圍NGF和Caspase-3的表達。結果：(1)3天時, 12小時運動組,神經功能評分大于模型組,(P﹤0.05),差異有統(tǒng)計學意義. 7天時,12小時運動組神經功能評分大于模型組,(P﹤0.05)

3、,差異有統(tǒng)計學意義。而 4 天運動組與模型組比較無統(tǒng)計學意義；14天時,12小時運動組神經功能評分大于模型組,(P﹤0.05),差異有統(tǒng)計學意義。而4天運動組, 8天運動組與模型組比較均(P﹤0.05),差異有統(tǒng)計學意義；21天時,12小時運動組與模型組比較無統(tǒng)計學意義。4天運動組與模型組比較,(P﹤0.01),差異有統(tǒng)計學意義,8 天運動組與模型組比較,P﹤0.01,差異有統(tǒng)計學意義。(2)模型組大鼠有不同程度的神經細胞核固縮、濃染和

4、神經元變性壞死,細胞間隙出現大小不等的空泡,增寬,病灶周圍組織疏松水腫,炎癥細胞浸潤,灶周圍組織水腫及炎癥細胞浸潤增多；膠質細胞和血管增生為主。12 小時運動組 3-7 時時天腦組織水腫程度和神經細胞壞死程度,炎性細胞浸潤的強度均強于模型組,而 14 天-21 天時神經膠質細胞和血管增生均強于模型組。4天運動組和8天運動組各時間點神經細胞壞死程度,炎性細胞浸潤的強度低于模型組,而神經膠質細胞和血管增生均強于模型組。(3)3天-7天時,模

5、型組與對照組比較NGF表達明顯上升,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),至 14 天時,模型組的NGF 下降了很多,但仍高于對照組 NGF 水平,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。21天時模型組NGF水平降至對照組的水平；至3天時, 12小時運動組的NGF表達明顯上升,但與模型組比較無統(tǒng)計學意義；7天時,12小時運動組,4天運動組NGF表達仍高于對照組,但與模型組比較無統(tǒng)計學意義；14天時,12小時運動組,4天運動組,8天運動組 NGF

6、較模型組仍處于高水平表達。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。21天時,12小時運動組,4天運動組,8天運動組NGF平均水平下降了很多,但仍高于模型組。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01). (4)3天時,模型組Caspase-3表達高于對照組(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義。7 天時模型組 Caspase-3 表達進一步升高。與對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。至14天時,模型組大鼠Caspase-3平均水平仍高于對照組,差異仍有統(tǒng)

7、計學意義；21天時模型組Caspase-3 水平降至對照組的水平；3天時12小時運動組Caspase-3表達水平高于模型組。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。7 天時,12 小時運動組Caspase-3水平高于模型組水平,差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。而4天運動組Caspase-3表達低于模型組(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義；14天時,12小時運動組Caspase-3水平仍高于模型組水平,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)

8、,4 天運動組和 8 天運動組 Caspase-3表達都明顯低于模型組。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；21 天時各組Caspase-3表達水平差異無統(tǒng)計學意義。結論：(1)大鼠腦出血后過早的運動訓練介入加重了大鼠神經功能受損的程度。(2)適時的介入運動訓練對腦出血大鼠的神經功能的恢復起著積級的作用。(3)運動訓練廷長NGF的表達時間和抑制Caspase-3的表達水平可能是促進腦出血恢復的機制之一。(4) Ⅳ型膠原酶加入肝素鈉是制作腦