甘青鐵線蓮的生物活性成分研究.pdf

1、甘青鐵線蓮(Clematistangutica)是毛茛科鐵線蓮屬(ClematisL.)植物,主要分布于我國西部地區(qū),全草入藥,在藏醫(yī)藥中用于活血通瘀和消化不良等癥的治療。該植物的全草是具有顯著治療心腦血管疾病效果的復方成藥益心康泰膠囊的主要組分。目前有關其化學成分的報道較少。
　　本課題對采自青海省黃南藏族自治州的甘青鐵線蓮全草采用反復硅膠柱色譜、凝膠(SephadexLH-20)柱色譜及HPLC制備等方法進行了系統(tǒng)的化學成分研

2、究。從75％乙醇提取物中獲得31個成分,并運用理化常數(shù)測定、波譜數(shù)據(jù)分析和化學分析等手段鑒定了所有化合物的結(jié)構(gòu)。這些化合物包括6個黃酮苷:芹菜素-7-O-β-D-(-6''-p-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(1),槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),異葒草素(3),槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(4),木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)和芹黃春(6);24個皂苷:hederacholich

3、isideF(7),3-O-{-β-D-吡喃木糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖}-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡糖糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖

4、苷(9),3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖3β,21α,23-三羥基-齊墩果-12-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),leontoside(11),3-O-β-D-吡喃半乳糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-

5、D-吡喃葡萄糖苷(12),常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13),kizutasaponinK12(15),clematibetosideC(16),紅毛七皂苷D(17),皂苷PJ3(18),hederacholichisideE(19),3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯

6、糖-3β,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(20),3-O-β-D-吡喃木糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(21),cussonosideA(22),刺五加皂苷C3(23),3-O-β-D-吡喃核糖-齊墩果酸-28-O-α-L-

7、吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(24),續(xù)斷皂苷VI(25),3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-絲石竹皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(26),齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(27),cussonosideB(28),常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃

8、葡萄糖苷(29),HN-皂苷F(30)和CP1(31);以及1個酯類成分:鄰苯二甲酸丁酯(14)。其中,化合物8–10,13,20,21和24為未見報道的新化合物;化合物1,7,11,12,19,23和25–30為首次從鐵線蓮屬植物中分離;除化合物15和18外,均為首次從該植物中獲得。
　　以地爾硫?為陽性對照藥,采用缺氧復氧模型對甘青鐵線蓮中分離獲得的皂苷類化合物7,9-11,13,15-17,20和25進行抗心肌缺血活性測試。

9、實驗結(jié)果表明:化合物9,10,13,17和25顯示中等的心肌保護活性,它們對LDH和CK-MB兩種酶的ED50分別為77.31,114.26,92.44,127.22,120.33和75.77,110.51,87.39,121.92,109.48mM?；衔?,11,15,16和20無心肌保護活性。
　　首次采用腦中動脈栓塞模型(MCAO)評價化合物1對缺血性腦損傷的保護作用,結(jié)果顯示其在25mg/kg,50mg/kg和100mg

10、/kg時均能縮小經(jīng)MCAO處理后的大鼠(小鼠)腦梗塞面積,改善神經(jīng)行為學評分,并且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。
　　課題創(chuàng)新性及研究意義:
　　1.本文對甘青鐵線蓮全草的醇提物進行系統(tǒng)的化學成分研究,分離鑒定31個化合物,其中包括7個新化合物和12個首次從鐵線蓮屬中獲得的化合物,基本明確了該藥材的化學成分。
　　2.本課題分離鑒定的化合物10的苷元3β,21α,23-三羥基-齊墩果-12-烯-28-酸為首次從天然界中獲得的新

11、苷元;化合物20的苷元3β,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸在天然界中比較少見;而化合物21具有的3位糖鏈“Xyl(1→2)Ara-”在齊墩果烷型三萜皂苷中未見有報道。這與本屬其他植物所分離到的皂苷類化合物有明顯的區(qū)別,可能與其生長在寒冷缺氧的特殊環(huán)境有關。這些研究結(jié)果對鐵線蓮屬植物的化學分類學可能具有意義。
　　3.對部分皂苷類化合物開展了初步的抗心肌缺血活性測試,5個化合物具有心肌保護作用,并初步探討了該類成分的構(gòu)效關