第一部分：骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)心肌化過(guò)程中細(xì)胞電生理特征的研究;第二部分：家兔短期快速心房起搏所致心房肌電重構(gòu)及甲狀腺素干預(yù)機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分：骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)心肌化過(guò)程中細(xì)胞電生理特征的研究 本研究取大鼠的骨髓，經(jīng)梯度離心和貼壁培養(yǎng)獲得骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，再以3μmol/L的5-氮雜胞嘧啶(5-aza)孵育誘導(dǎo)。以心室肌細(xì)胞為對(duì)照研究了骨髓基質(zhì)干細(xì)胞心肌化過(guò)程中細(xì)胞電生理時(shí)空特征，為今后的進(jìn)一步研究和臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究的主要結(jié)果：(1)誘導(dǎo)后干細(xì)胞表達(dá)心肌特異性標(biāo)志物ANP。 (2)5-aza誘導(dǎo)前的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞不能誘發(fā)出

2、動(dòng)作電位，誘導(dǎo)后三周，可誘發(fā)出不同形態(tài)的細(xì)胞動(dòng)作電位，與正常大鼠心室肌細(xì)胞相比，動(dòng)作電位的最大除極電壓為低、動(dòng)作電位時(shí)程為短、缺乏2、3相的平臺(tái)期。 (3)誘導(dǎo)前大約50％的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞可以記錄到外向電流，包括瞬間外向鉀電流和延遲外向整流鉀電流，但不同細(xì)胞間電流密度差別較大，與心肌細(xì)胞相比有顯著差異(p＜0.05)。經(jīng)5-aza誘導(dǎo)后此電流的密度有明顯增加，在可誘發(fā)動(dòng)作電位的骨髓干細(xì)胞，其瞬間外向鉀電流和延遲外向整流鉀電流電流

3、密度與心室肌細(xì)胞無(wú)顯著差異(p＞0.05)。 (4)誘導(dǎo)前的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞幾乎記錄不到內(nèi)向電流，誘導(dǎo)后的細(xì)胞內(nèi)向電流成分呈增大趨勢(shì)，在極少數(shù)細(xì)胞可以記錄到鈉電流、鈣電流，其密度較心室肌細(xì)胞有較大差別(p＜0.01)。 (5)在超極化狀態(tài)下，誘導(dǎo)后的干細(xì)胞可以記錄到緩慢激活內(nèi)向電流，并可被特異性阻斷劑CsCl阻斷，證實(shí)為起搏電流。 結(jié)論：骨髓基質(zhì)干細(xì)胞可以在體外經(jīng)5-aza誘導(dǎo)后可誘發(fā)出動(dòng)作電位，并且可記錄到與心肌

4、細(xì)胞電興奮相關(guān)的多種離子流，但與心室肌細(xì)胞相比，主要的外向電流密度相似，內(nèi)向電流電流密度有差異較大。 第二部分：家兔短期快速心房起搏所致心房肌電重構(gòu)及甲狀腺素干預(yù)機(jī)制的研究 甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)是心房顫動(dòng)的常見(jiàn)病因，而長(zhǎng)期和短期的快速心房起搏可以導(dǎo)致心房肌電重構(gòu)，引起L型鈣電流和瞬間外向鉀電流的變化。然而，甲亢動(dòng)物由快速心房起搏所致的早期電重構(gòu)的離子通道的變化尚部清楚，本研究利用前期工作建立的家兔快速心房起搏的模型，對(duì)這一機(jī)制

5、進(jìn)行了研究。 研究的主要結(jié)果：(1)快速心房起搏前后體表心電圖各參數(shù)的變化：RR間期逐漸延長(zhǎng)，同時(shí)PR間期、P波寬度、QRS間期也相應(yīng)延長(zhǎng)；快速心房起搏使AERP縮短，甲亢家兔AERP的變化更加明顯；正常家兔未能誘發(fā)持續(xù)性AF，而甲亢家兔可以Burst刺激頻繁誘發(fā)AF且AF頻率較快。 (2)正常家兔起搏4h后L型鈣電流密度下調(diào)(8.45±1.52pA/pF，Vs9.29±2.33pA/pF)，但兩組間無(wú)顯著性差異，甲亢家

6、兔心房起搏4h后L型鈣電流明顯下調(diào)，與前兩組有顯著差異(3.98±2.73pA/pFVs8.45±1.52pA/pF，9.29±2.33pA/pF)。 (3)正常家兔經(jīng)快速心房起搏4h后瞬間外向鉀電流及持續(xù)外向鉀電流的密度與正常家兔相比無(wú)明顯變化(5.36±2.33pA/pF，2.17±1.35pA/pFVs6.06±2.62pA/pF，2.18±0.96pA/pF)，而甲亢家兔快速起搏后兩者皆明顯增加(8.04±2.81pA/