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1、目的:研究糖尿病是否會(huì)導(dǎo)致在體外培養(yǎng)條件下自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖、分泌和抗凋亡能力的改變。
方法:利用鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)制作成年大鼠糖尿病模型(n=15),正常大鼠作為對(duì)照組(n=15),分別體外利用用全骨髓貼壁法來(lái)擴(kuò)增和純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后,取生長(zhǎng)良好的第2代細(xì)胞作為本實(shí)驗(yàn)的研究對(duì)象。采用Cell Count kit-8(CCK-8)分別繪制兩組細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線來(lái)評(píng)價(jià)增殖能力,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)
2、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)的分泌量和應(yīng)用Hoechst33342染色和膜聯(lián)蛋白Ⅴ/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞在缺氧無(wú)血清條件下的抗凋亡能力。
結(jié)果:來(lái)源于糖尿病大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖較正常的大鼠顯著性減慢(P<0.01),在形態(tài)學(xué)上則表現(xiàn)為較正常的細(xì)胞更扁平,并且VEGF和IGF-1的分泌量較正常大鼠來(lái)源的明顯的降低,其中VEGF的分泌量為(80.7±13.1)pg/ml和(67.9
3、±12.3) pg/ml(P=0.02),IGF-1的分泌量分別為(374.8±41.2) pg/ml和(281.8±26.8) pg/ml(P<0.01)。在缺氧無(wú)血清條件下,糖尿病來(lái)源的干細(xì)胞抗凋亡能力顯著性降低,兩組早期細(xì)胞凋亡指數(shù)分別為(28.7±3.4)和(37.1±2.42)(P<0.01)。
結(jié)論:糖尿病大鼠來(lái)源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以成功的在體外進(jìn)行增殖培養(yǎng),但是其在增殖能力、分泌、抗凋亡能力等一系列生物性狀上有
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