薏苡及其近緣種的分子細(xì)胞遺傳學(xué)研究.pdf

1、本研究對8份薏苡(Coix Lacryma-jobi L.)不同類型種質(zhì)進(jìn)行了同工酶分析，從分子水平比較它們的親緣關(guān)系。利用基因組原位雜交技術(shù)探討了栽培薏苡，野生薏苡及水生薏苡基因組間重復(fù)DNA序列的同源程度和在染色體上的分布特征。利用熒光原位雜交技術(shù)對薏苡近緣種玉米和類玉米及其雜交后代的異染色質(zhì)紐重復(fù)序列進(jìn)行了遺傳穩(wěn)定性研究。對類玉米雜交后代“8493”的花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂行為進(jìn)行了觀察，并對其親本的親緣關(guān)系進(jìn)行了探討。主要結(jié)果如下：

2、 1 同工酶分析采用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）結(jié)合同工酶染色，比較分析了栽培薏苡，野生薏苡和水生薏苡幾個(gè)不同種質(zhì)過氧化物酶（POD）和多酚氧化酶（PPO）同工酶的分布和活性度。結(jié)果表明，過氧化物酶（POD）和多酚氧化酶（PPO）同工酶含量豐富，活性強(qiáng)，酶譜復(fù)雜，酶帶清晰，穩(wěn)定，種間差異明顯；過氧化物酶同工酶酶譜聚類分析表明，供試的8份種質(zhì)薏苡大致可以聚為四類：1和3 歸為一類；4、5、6 歸為一類；7和8歸為一類；2 號(hào)種質(zhì)

3、單獨(dú)成一類。結(jié)果可以作為研究薏苡種內(nèi)分類及種質(zhì)親緣關(guān)系的基礎(chǔ)依據(jù)。 2 用四倍體栽培薏苡（Coix lacryma-jobi,2n=20，）總基因組DNA為探針，對栽培薏苡自身，野生薏苡和水生薏苡的有絲分裂中期染色體進(jìn)行基因組熒光原位雜交，雜交結(jié)果顯示栽培薏苡和野生薏苡染色體都被強(qiáng)烈而密集的雜交信號(hào)所標(biāo)記，說明野生薏苡與栽培薏苡在基因組染色體水平上的同源程度很高，保守重復(fù)序列占很大比重；水生薏苡的基因組中有二十條染色體被強(qiáng)烈標(biāo)記

4、，有十條染色體雜交信號(hào)很弱，說明其基因組中有二十條染色體DNA 成分與栽培薏苡的基因組DNA 高度同源，推斷供試的水生薏苡種屬廣西六倍體水生薏苡居群。 3 利用組成玉米異染色質(zhì)紐的180-bp 重復(fù)序列和TR-1 元件對二倍體多年生類玉米(Zeadiploperennis,DP)、玉米自交系330 及其遠(yuǎn)緣雜交后代異源種質(zhì)純系540的有絲分裂中期染色體進(jìn)行了熒光原位雜交，結(jié)果證實(shí)了玉米自交系330 異染色質(zhì)紐位于染色體近末端，D

5、P 異染色質(zhì)紐位于末端，雜交后代540的紐全部位于近末端，而且數(shù)目比親本要少。所有的隨體都含有紐的成分。4 利用改良的苯酚品紅壓片技術(shù)對二倍體多年生類玉米與墨西哥類玉米的雜交種“8493”花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂行為進(jìn)行了觀察，結(jié)果表明，減數(shù)分裂過程基本正常，花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂中期I和中期II 少數(shù)細(xì)胞可見赤道板外染色體，后期I和后期II 部分細(xì)胞出現(xiàn)染色體橋及落后染色體，減數(shù)分裂過程中染色體行為異常的花粉母細(xì)胞約占11.1％，但由于發(fā)生頻率