M001雄性不育滅鼠劑的生殖毒性研究及其在農(nóng)業(yè)鼠害防治方面的應(yīng)用.pdf

1、鼠害對國民經(jīng)濟的各個方面都有很大的危害，不僅對農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、工業(yè)等造成巨大損失，而且還傳染許多疾病，危害人類健康。目前，人類對鼠害一般采用藥物毒殺的方法，隨著急性化學(xué)劇毒滅鼠劑的逐漸被淘汰，慢性抗凝血滅鼠劑被廣泛推廣應(yīng)用，成為我國目前最常用的滅鼠藥物，但是這種滅鼠劑污染生態(tài)環(huán)境，易發(fā)生二次中毒，危害人、畜健康，而且由于鼠類具有較靈敏的嗅覺、味覺和一定的辯偽智能，部分鼠類出血抽搐的死亡情況，常常引起鼠群的驚疑與拒食，因此這種滅鼠劑的實際滅

2、鼠效果較差，甚至導(dǎo)致鼠害更加嚴(yán)重，不能很好的解決防治和滅殺的結(jié)合問題，也不能從根本上解決鼠害這一全世界面臨的重大難題。傳統(tǒng)的毒殺方法不可避免的出現(xiàn)抗藥性、適口性及滅鼠后鼠類種群迅速反彈等問題。另外人們環(huán)保意識和滅鼠觀念的發(fā)生轉(zhuǎn)變，從殺滅鼠類向控制鼠害及降低種群密度轉(zhuǎn)化，為此探索一種行之有效的控制鼠害發(fā)生的新方法，即不育劑在控制鼠害中的應(yīng)用研究，被越來越多的學(xué)者所關(guān)注。張知彬(1995)基于Logistic模型．比較了滅殺和不育對控制鼠類

3、數(shù)量效果的差別．發(fā)現(xiàn)在不考慮競爭性繁殖干擾的情況下，使同樣比例的個體不育能夠達(dá)到一樣的滅殺效果；若考慮競爭性繁殖干擾的作用，對于單配制和一雄多雌制的鼠類，不育比滅殺的效果要更好。 在以往對膦氧氮丙啶(MAPO)進行了大量的抗生育效果和機理的實驗室研究的基礎(chǔ)上，我們首次提出將MAPO應(yīng)用于鼠類防制上，并研究成功M001雄性不育滅鼠劑。本課題研究的目的在于提供一種以雄性不育劑MAPO為主要成分通過破壞鼠群生殖繁育能力，以達(dá)到長期徹底

4、滅除鼠害目的的抗生育滅鼠劑，并提供配方和制備方法；同時進一步探討和評價這類雄性抗生育劑對鼠類雄性生殖的毒性作用，對鼠類種群數(shù)量的控制效果及其對非嚙齒類動物的不良影響。 我們采用雄性不育劑膦氧氮丙啶為M001雄性不育滅鼠劑的主要有效成份，此外還添加誘餌劑、糧食類輔料和防腐防霉劑。各組分占M001雄性不育滅鼠劑總重量的含量百分比范圍分別是：MAPO0.2％—2％、誘餌劑10％—15％、糧食類輔料85％—95％和防腐防霉劑0.1％—0

5、.3％。其中糧食類輔料的各組份含量百分比范圍是：豆餅粉和／或花生餅粉10-25％、玉米粉和／或大麥粉和／或面粉10-15％、麩皮40-60％。誘餌劑的各組份重量百分比范圍是：魚粉為10-15％，油脂類0.1-0.2％。防腐防霉劑可采用雙乙酸鈉或尼泊金乙酯。誘餌劑中的油脂類可采用植物油和／或動物油脂。 首先進行M001雄性不育滅鼠劑的生殖毒性研究，這項研究包括六個具體試驗：(1)小鼠適口性實驗；(2)小鼠生育力試驗；(3)小鼠精子

6、計數(shù)及活動度檢測；(4)小鼠精子畸形試驗；(5)小鼠大體解剖和病理學(xué)檢查；(6)小鼠多代繁殖實驗。在小鼠適口性實驗中，M001給藥組小鼠7天內(nèi)平均攝食M00128.23g，平均攝食系數(shù)為0.90；在小鼠生育力試驗中，M001雄性不育劑對雄性小鼠的生育力有明顯的抑制作用，雄鼠低、中、高劑量組中均有雄性小鼠出現(xiàn)不育，交配后的受孕雌鼠的數(shù)量減少，說明攝入M001雄性不育劑后雄性小鼠生育能力明顯下降。子宮剖查，受孕雌鼠的活胎數(shù)有所下降，受孕雌鼠

7、的吸收胎數(shù)增加，而且出現(xiàn)吸收胎的雌鼠數(shù)量也上升；在小鼠精子計數(shù)及活動度檢測實驗中，雄鼠給予M001雄性不育劑后，附睪精子計數(shù)顯著減少，與對照組比較精子計數(shù)與攝入M001的多少呈劑量一效應(yīng)關(guān)系。并且這種差異一直持續(xù)到第四次精子計數(shù)檢查，即給藥后的第42天，說明M001雄性不育劑對小鼠的精子發(fā)生和釋放產(chǎn)生顯著而不可逆的影響。M001給藥組與空白對照組精子活動度比較有顯著性差別，主要是死精子數(shù)明顯上升。在小鼠精子畸形試驗中，空白對照組畸形精子

8、百分比為為0.68％，低劑量組畸形精子為8.68％，中劑量組畸形精子為16.63％，高劑量組畸形精子為19.56％。M001雄性不育劑引起的精子形態(tài)改變主要發(fā)生在精子頭部，以無定形頭部居多數(shù)，其次分別是無鉤頭部畸形和尾折疊畸形。小鼠大體解剖和病理學(xué)檢查中，比較對照組動物的組織病理學(xué)變化，M001給藥結(jié)束后小鼠的肝、腎、腦等臟器均未見到毒性組織病理學(xué)改變。光鏡下觀察睪丸組織切片，可見對照組睪丸曲細(xì)精管外觀飽滿，生精上皮細(xì)胞層排列整齊，管腔

9、內(nèi)充滿精子和各級精母細(xì)胞，而各M001給藥組睪丸曲細(xì)精管均有不同程度的萎縮，管間隙增大，生精上皮細(xì)胞層次減少，排列松散，管內(nèi)空腔增大，精子層稀疏。對照組附睪腔內(nèi)可見大量成熟的精子，M001給藥組鏡下可見精子密度下降，數(shù)量明顯減少，一些管腔內(nèi)無精子，附睪上皮未見明顯變化。M001給藥組前列腺腺體內(nèi)分泌物明顯少于對照組，提示M001雄性不育劑可能影響前列腺的內(nèi)分泌功能。 小鼠多代繁殖實驗中，繁殖三代后，對比對照組和給予M001雄性不

10、育劑試驗組鼠種群數(shù)量的變化，M001試驗組鼠群數(shù)量增長速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對照組。經(jīng)計算，對照組三代小鼠平均繁殖率為90％，而M001雄性不育劑組平均繁殖率僅為35％。選擇在農(nóng)田、農(nóng)戶環(huán)境，于投餌后檢查鼠類對該雄性不育劑的消耗水平，用不育劑處理后7個月測定鼠密度，解剖觀察成年鼠生殖能力(懷孕率、雄性精子存活)，測定繁殖率。M001在1區(qū)和2區(qū)農(nóng)田的拖食率分別為33.33％和35.56％，投放后7個月的鼠密度與自然對照區(qū)比較，相關(guān)密度指數(shù)(RPI

11、)值為0和33.3％。有較好的控制鼠類種群密度效果。1區(qū)和2區(qū)滅效分別為100％和70％。對鼠類生殖功能有比較明顯的影響，投藥區(qū)繁殖率可達(dá)到0％。未發(fā)生家禽、家畜以及野生禽類的中毒事故。我們以鴿子為實驗動物研究M001雄性不育劑對禽類的不良影響，實驗主要包括：(1)適口性試驗；(2)血液生化學(xué)檢查；(3)鴿子器官大體解剖和病理學(xué)檢查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)鴿子在實驗室內(nèi)對M001雄性不育顆粒劑的取食量在12天內(nèi)均低于玉米粒，12天內(nèi)平均攝食M001雄

12、性不育劑13.9g，平均攝食玉米粒55.8g，經(jīng)計算，攝食系數(shù)為O.24，低于毒餌適口性標(biāo)準(zhǔn)。在給藥結(jié)束的血液生化檢查中，給藥組血中BUN值與對照組比較增高，有一定的統(tǒng)計學(xué)意義，其余各項生化指標(biāo)未見統(tǒng)計學(xué)差異。給藥組和對照組體重、睪丸重量、睪丸臟器重量系數(shù)無明顯差異。顯微鏡下組織病理學(xué)檢查未見病理學(xué)改變。 研究證明，M001雄性不育劑對小鼠具有良好的適口性，有實際應(yīng)用價值。實驗室研究中，其生殖毒性作用明確，能夠有效的減緩鼠群數(shù)量