應用分子細胞遺傳學技術檢測染色體數目及結構異常.pdf

1、　　目的：應用分子細胞遺傳學技術檢出人類染色體數目異常和結構異常?！　》椒ǎ?.用著絲粒特異的α衛(wèi)星DNA克隆作為染色體計數探針，通過缺口翻譯引入生物素或地高辛等標記物。以此標記片段為探針，與中期染色體或間期細胞雜交，熒光顯微鏡鏡檢，熒光信號的數目就是染色體的個數。2.CGH在全基因組水平檢測染色體拷貝數的變化：以21-三體為模型，分別提取待檢和對照標本的DNA，通過DOP-PCR擴增全基因組DNA，F(xiàn)ITC-dUTP或Thodami

2、ne-dUTP直接標記，取等量標記的DNA混合，加Cot-1DNA抑制重復序列，與正常人的中期染色體雜交，根據熒光比率的變化來判斷染色體拷貝數的變化。3.微缺失/重復綜合征：用位點特異的BACDNA為探針。通過DOP-PCR擴增及缺口翻譯間接標記探針，和中期染色體或間期細胞雜交，熒光顯微鏡下細胞中熒光信號的數目就是相應位點的個數。一個信號提示微缺失；2個信號正常；3個信號為微重復。4.染色體易位：染色體涂染探針的制備：通過激光捕獲顯微切