天然馬齒莧多糖的制備及其抗糖尿病機理的研究.pdf

1、目前全世界糖尿病患者已經(jīng)超過2億，預計到2030年超過3.66億人。盡管目前臨床上有大量的西藥能在短期內(nèi)有效地控制高血糖，但因其毒副作用大，且不能防止糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生及發(fā)展。因此，具有毒副作用小、療效穩(wěn)定等特點的天然抗糖尿病藥物已引起人們的高度關(guān)注。
　　馬齒莧(Portulaca oleracea L.)多糖是傳統(tǒng)的中草藥馬齒莧的主要活性成分之一，具有抗菌消炎、抑脂、抗氧化和抗糖尿病等生物活性。目前，國內(nèi)外學者關(guān)于馬齒莧多

2、糖降血糖作用的研究大多停留在馬齒莧粗提取液或不同部位對糖尿病動物模型階段，研究不夠系統(tǒng)和深入。為此，本研究從天然馬齒莧多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)特征、生物活性穩(wěn)定性和抗糖尿病作用機理等方面進行了研究。
　　采用水提法提取馬齒莧多糖，并用響應(yīng)曲面法對其提取工藝進行優(yōu)化，得到最佳工藝條件:提取溫度100℃，提取時間1.5 h，水料比為20∶1，提取次數(shù)3次，多糖的提取率達24.25％。用大孔樹脂AB-8和響應(yīng)曲面法對馬齒莧多糖脫色工藝進行優(yōu)

3、化，得到最佳工藝條件:AB-8樹脂用量60 g/L，脫色時間為3.5 h，脫色溫度為50℃，馬齒莧多糖的脫色率為74.25％。
　　利用高效液相色譜法、紅外色譜法和氣相色譜法等儀器法，結(jié)合水解法、高碘酸氧化法和Smith降解法等化學方法初步研究了POPⅠ、POPⅡ和POPⅢ的一級化學結(jié)構(gòu)。POPⅠ的分子量為9.36 kD，由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其組成摩爾比為1∶1.073∶1.29∶1.89∶2.3

4、9∶3.38。主要通過1→2和1→6糖苷鍵連接，并含有硫酸根。POPⅡ的分子量為9.25 kD，由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其組成摩爾比為1∶1.42∶1.73∶1.44∶1.58∶1.59，主要由1→3糖苷鍵鍵接而成，同時存在1→2、1→4和1→6糖苷鍵鍵接方式。POPⅢ的分子量為8.03 kD，由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖組成，其組成比例為1∶1.16∶1.39∶2.23∶3.19。主要由1→2

5、和1→6鍵型鍵接而成，并含有硫酸根。
　　采用比色法研究了馬齒莧多糖體外抗氧化活性。馬齒莧多糖具有清除羥基自由基和DPPH、抑制Fe2+誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化的作用。其抗氧化能力依次為:POPⅠ＞POPⅡ和POPⅢ。
　　以胰島β細胞(HIT-T15 cells)為研究對象，建立alloxan誘導氧化損傷胰島β細胞模型，通過測定細胞增殖能力，胰島素分泌水平、SOD活性、細胞內(nèi)ATP含量、細胞內(nèi)游離Ca2+水平及線粒體膜電位變化等指

6、標，探討馬齒莧多糖抗糖尿病的機理。結(jié)果顯示，馬齒莧多糖能夠促進胰島細胞的增殖、增加細胞內(nèi)ATP含量、促進胰島素的分泌、提高SOD活性，并可以抑制四氧嘧啶誘導的細胞內(nèi)Ca2+水平升高和線粒體膜電位的下降。由此推理，馬齒莧多糖抗糖尿病的作用機理與其清除氧自由基，抗氧化活性和修復胰島β細胞損傷有關(guān)。
　　研究了保存時間和保存溫度對馬齒莧多糖清除羥自由基能力影響。結(jié)果表明隨著保存時間的延長和溫度升高，馬齒莧多糖抗氧化能力下降。