馬齒莧水提取物鎮(zhèn)咳平喘作用及其平喘機(jī)制研究.pdf

1、目的：咳、痰、喘是呼吸系統(tǒng)疾病常見(jiàn)癥狀，呼吸道炎癥、過(guò)敏反應(yīng)等可致呼吸道痰液分泌過(guò)多，誘發(fā)咳嗽、喘息。研制和開(kāi)發(fā)鎮(zhèn)咳、平喘藥物具有重要的臨床意義。
　　目前臨床常用鎮(zhèn)咳藥物，根據(jù)作用機(jī)制可分為中樞性鎮(zhèn)咳藥和外周性鎮(zhèn)咳藥，可快速緩解癥狀。中醫(yī)藥在止咳平喘方面具有獨(dú)特的療效。馬齒莧(Portulaca oleracea L.)是馬齒莧科馬齒莧屬一年生草本植物，具有抗菌、松弛肌肉、松弛子宮平滑肌、抗炎以及促進(jìn)傷口愈合等作用。民間應(yīng)用馬齒

2、莧治療多種原因引起的咳嗽、喘息，有明顯的療效，且無(wú)毒副作用。本研究目的是評(píng)價(jià)馬齒莧水提取物鎮(zhèn)咳、平喘作用，探討其平喘機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　第一部分馬齒莧水提取物的鎮(zhèn)咳作用研究
　　目的：觀察馬齒莧水提取物的鎮(zhèn)咳作用
　　方法：采用超聲霧化氨水引咳法，制備小鼠(昆明種)咳嗽模型。將咳嗽次數(shù)合格的小鼠隨機(jī)分為為5組：馬齒莧水提物(Water Extract ofPortulaca oleracea L，WE

3、PO)1.25g/kg、2.5g/kg、5.0g/kg劑量組、生理鹽水(normal saline，NS)對(duì)照組、咳必清(toclase，Toc)陽(yáng)性對(duì)照組。以給藥后咳嗽次數(shù)/2min為指標(biāo)，評(píng)價(jià)WEPO的鎮(zhèn)咳作用。
　　結(jié)果：WEPO對(duì)氨水誘發(fā)小鼠咳嗽次數(shù)的影響WEPO大、中劑量組小鼠咳嗽次數(shù)9.40±2.07次/2min，11.88±3.37次/2min，顯著低于NS對(duì)照組20.32±6.48次/2min，與NS組比較差異有統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。馬齒莧中、小劑量組咳嗽次數(shù)分別為(11.88±3.37次/2min)、(13.91±3.49次/2min)，與Toc20mg/kg組(6.93±2.72次/2min)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；WEPO大劑量組咳嗽次數(shù)與Toc組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：WEPO具有明顯的鎮(zhèn)咳作用。
　　第二部分馬齒莧水提取物的平喘作用研究
　　目的：觀察WEP

5、O的平喘作用
　　方法：
　　1組胺-乙酰膽堿誘發(fā)豚鼠喘息實(shí)驗(yàn)采用超聲霧化磷酸組胺-氯化乙酰膽堿誘發(fā)豚鼠喘息模型，選取引喘潛伏期合格豚鼠隨機(jī)分為5組：WEPO5g/kg、2.5g/kg、1.25g/kg組，氨茶堿(aminophylline，Ami)20mg/kg組及NS對(duì)照組。以引喘潛伏期及因呼吸困難、窒息發(fā)生抽搐跌倒動(dòng)物比率為指標(biāo)，評(píng)價(jià)WEPO的平喘作用。
　　2離體完整豚鼠氣管毛細(xì)管試驗(yàn)離體豚鼠氣管平滑肌固定于離

6、體完整氣管描記裝置上，隨機(jī)分為5組：WEPO大、中、小劑量組，終濃度分別為300μg/ml、150μg/ml、75μg/ml；Ami陽(yáng)性對(duì)照組，終濃度為30μg/ml和組胺組，終濃度為0.01μg/ml。以毛細(xì)管內(nèi)液面的高度為指標(biāo)，觀察不同劑量WEPO對(duì)氣管平滑肌張力的影響。
　　結(jié)果：
　　1 WEPO對(duì)引喘潛伏期的影響WEPO大、中、小劑量組豚鼠引喘潛伏期226.9±41.5s、211.3±45.2s、108.2±19.

7、1s均明顯長(zhǎng)于NS對(duì)照組59.5±10.8s，與NS對(duì)照組比較差異顯著，有的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)；WEPO中、大劑量組發(fā)生抽搐跌倒動(dòng)物比率明顯低于NS對(duì)照組，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
　　2 WEPO對(duì)離體豚鼠氣管平滑肌毛細(xì)管內(nèi)液面高度的影響 WEPO大、中、小劑量組離體豚鼠氣管平滑肌液面高度分別為13.6±3.1mm、15.8±4.1mm、20.1±3.2mm明顯低于藥前23.9±4.3mm、24

8、.6±3.7mm、25.1±4.5mm。各指標(biāo)與藥前比較差異均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。
　　結(jié)論：WEPO具有明顯的平喘作用，其平喘作用與松弛氣管平滑肌有關(guān)。
　　第三部分馬齒莧水提取物的平喘作用機(jī)制研究
　　目的：探討WEPO的平喘作用機(jī)制。
　　方法：家兔離體氣管環(huán)實(shí)驗(yàn)取家兔氣管，每3個(gè)氣管軟骨為一個(gè)氣管環(huán)，連接4個(gè)氣管環(huán)，置于盛有15ml Krebs-Henseleit的離體氣管

9、浴槽中，固定到張力傳感器上，與MecLab/4e電生理儀相連，將氣管環(huán)隨機(jī)分為5組：WEPO組，普萘洛爾(propranolol，Pro)+馬齒莧水提取物(WEPO)組，乙酰膽堿(acetylcholine，Ach)組，馬齒莧水提取物+乙酰膽堿(WEPO+Ach)組及Ami組。以氣管環(huán)平滑肌張力、收縮頻率和收縮幅度為指標(biāo)，觀察WEPO松弛氣管平滑作用與β受體和M受體的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1 WEPO組藥后家兔離體氣管平滑

10、肌收縮曲線基線-0.05±0.013 mm低于藥前0.47±0.06mm，收縮頻率1.19±0.31次/min顯著低于藥前2.31±0.52次/min，收縮幅度0.15±0.07mm顯著低于藥前0.32±0.07 mm，各指標(biāo)與藥前比較差異均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示W(wǎng)EPO具有顯著的松弛氣管平滑肌作用。
　　2 WEPO對(duì)氣管平滑肌的作用與β受體的關(guān)系 Pro+WEPO組氣管平滑肌收縮曲線基線為0.47±0.09

11、mm，WEPO組為-0.05±0.013mm，二者比較差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；Pro+WEPO組收縮頻率為2.32±0.45次/min，WEPO組為1.19±0.31次/min，二者比較差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；Pro+WEPO組收縮幅度為0.21±0.11mm，WEPO組為0.15±0.07mm，二者比較差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示Pro可明顯拮抗WEPO舒張支氣管平滑肌作用。
　　

12、3 WEPO對(duì)氣管平滑肌作用與M受體的關(guān)系
　　用Ach前后氣管平滑肌收縮曲線基線分別為0.46±0.04 mm、1.57±0.09mm；收縮頻率分別為2.29±0.47次/min、4.61±0.73次/min；收縮幅度分別為0.29±0.05mm、0.45±0.09mm。用藥前后各指標(biāo)比較差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，提示Ach具有明顯收縮氣管平滑肌作用。
　　WEPO+Ach組氣管平滑肌收縮曲線基線1.53±0

13、.07mm與Ach組1.57±0.09mm比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；WEPO+Ach組氣管平滑肌收縮頻率4.31±0.69次/min與Ach組4.61±0.73次/min比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；WEPO+Ach組氣管平滑肌收縮幅度0.45±0.08mm與Ach組0.45±0.09mm比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示W(wǎng)EPO對(duì)Ach收縮氣管平滑肌作用無(wú)明顯影響。
　　結(jié)論：
　　1 WEPO