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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 1.成功建立大鼠變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)動(dòng)物模型 2.提供變應(yīng)性鼻炎模型的鼻粘膜組織形態(tài)學(xué)特征 3.確定SDF-1和CXCR4在大鼠變應(yīng)性鼻炎時(shí)鼻粘膜上的表達(dá)情況 4.觀察地塞米松及非那根對(duì)大鼠變應(yīng)性鼻炎時(shí)SDF-1和CXCR4表達(dá)的影響。 方法: 健康清潔級(jí)SD大鼠64只,體重250~300g,隨機(jī)分成空白組(C1),假處理組(C2),模型組(M),
2、干預(yù)一組(D1,D2),干預(yù)二組(HR1,HR2),模型組16只,其他每組8只。AR模型建立方法:以卵清蛋白(OVA)經(jīng)全身致敏,5天后強(qiáng)化致敏,自第14天開始以lmg/m10VA,20ul每天滴鼻,直至大鼠打噴嚏,搔鼻,鼻涕的癥狀評(píng)分達(dá)到標(biāo)準(zhǔn);干預(yù)組則在模型成功的基礎(chǔ)上給予地塞米松1mg/kg及非那根2mg/kg肌肉注射,每天一次,分別干預(yù)一周、兩周;假處理組則以生理鹽水代替OVA,其余與模型組相同;空白組不作任何處理。用組織化學(xué)方法
3、觀察變應(yīng)性鼻炎的組織形態(tài)學(xué)特征,運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法(SP法)檢測(cè)各組動(dòng)物鼻粘膜SDF-1和CXCR4的表達(dá)和變化。并與地塞米松及非那根干預(yù)后進(jìn)行比較。本實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)驗(yàn)各組間的顯著性檢驗(yàn)采用方差分析及重復(fù)測(cè)量,以P<0.05作為有顯著性差異意義。 結(jié)果: AR模型時(shí)鼻分泌物涂片顯示大量中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。粘膜中嗜酸性粒細(xì)胞在M組明顯增多,經(jīng)地塞米松或非那根作用后減少。形
4、態(tài)學(xué)改變:HE染色見正常鼻粘膜上皮為假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮和復(fù)層扁平上皮,由纖毛柱狀上皮細(xì)胞,杯狀細(xì)胞、扁平細(xì)胞等組成,粘膜下纖維結(jié)締組織很薄,血管數(shù)量很少,無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及血管改變;模型組較C1,C2組粘膜增厚顯著,小血管增生擴(kuò)張明顯,上皮分泌細(xì)胞增多,上皮下大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),粘膜下腺體數(shù)量明顯增加,腺體擴(kuò)張;經(jīng)地塞米松或非那根處理后,粘膜厚度變薄,血管擴(kuò)張及腺體增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度減輕。 免疫組化: 1.SDF-1表達(dá)
5、于鼻粘膜上皮層細(xì)胞(包括假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞纖毛面及復(fù)層扁平細(xì)胞)、固有層炎性細(xì)胞(單核細(xì)胞多見)、上皮內(nèi)腺細(xì)胞、毛細(xì)血管及血竇內(nèi)皮細(xì)胞,其表達(dá)部位主要在細(xì)胞質(zhì)。 2.CXCR4表達(dá)于鼻粘膜上皮層細(xì)胞(包括假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮纖毛面及復(fù)層扁平上皮細(xì)胞)、固有層炎性細(xì)胞(單核細(xì)胞多見)、上皮內(nèi)腺細(xì)胞。在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)均有表達(dá)。 3.AR模型時(shí),SDF-1和CXCR4表達(dá)增加(P<0.05);經(jīng)地塞米松及非那根干預(yù)1周后,S
6、DF-1和CXCR4蛋白表達(dá)較AR模型時(shí)均有減少(P<0.05);地塞米松及非那根干預(yù)2周與干預(yù)1周時(shí)比較,SDF-1和CXCR4蛋白表達(dá)減少(P<0.05)。而地塞米松與非那根的治療療效之間沒有明顯差異(P>0.05)。 結(jié)論: 通過OVA多次致敏,局部激發(fā)能夠成功的建立大鼠變應(yīng)性鼻炎的動(dòng)物模型。病理形態(tài)學(xué)上的改變:變應(yīng)性鼻炎時(shí),上皮分泌細(xì)胞明顯增多,粘膜增厚,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及嗜酸性粒細(xì)胞明顯增多,腺體擴(kuò)張?jiān)龆?,小血管?/p>
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