含馬兜鈴酸中藥關(guān)木通的安全評(píng)價(jià)研究.pdf

1、該課題是以關(guān)木通中含有的馬兜鈴酸作為劑量依據(jù),在研究中同時(shí)采用了含有相當(dāng)量的馬兜鈴酸的關(guān)木通提取物和精制馬兜鈴總酸,兩者對(duì)比進(jìn)行研究,從而進(jìn)一步確定了關(guān)木通的急性毒性、慢性毒性以及致腫瘤性均與馬兜鈴酸密切相關(guān),同時(shí)還分別研究了關(guān)木通致急性腎臟毒性、慢性腎臟毒性以及致腫瘤性過(guò)程中馬兜鈴酸攝入的量-毒、時(shí)-毒關(guān)系,以希望找出臨床應(yīng)用中的安全劑量和安全用藥時(shí)間.該研究得到國(guó)家中醫(yī)藥管理局重大課題項(xiàng)目基金資助(課題號(hào):國(guó)中醫(yī)藥科2001ZDZX

2、04).一.馬兜鈴科關(guān)木通及木通科三葉木通、五葉木通對(duì)小鼠的急性毒性研究通過(guò)比較研究關(guān)木通和關(guān)木通馬兜鈴總酸對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)給小鼠單次灌胃關(guān)木通提取物或精制的關(guān)木通馬兜鈴總酸二者所致的毒性特征一致、死亡時(shí)程相似,以馬兜鈴酸計(jì),兩者對(duì)小鼠的LD50值相近,說(shuō)明關(guān)木通提取物單次給藥的致死作用與相當(dāng)劑量的馬兜鈴總酸的致死作用相近,表明關(guān)木通急性毒性主要是由馬兜鈴酸引起,動(dòng)物死亡率與馬兜鈴酸呈明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系.二.關(guān)木通及關(guān)木通馬兜

3、鈴總酸的急性腎毒性研究給小鼠單次灌胃不同劑量的關(guān)木通,同時(shí)以精制的關(guān)木通馬兜鈴總酸作對(duì)照,觀察對(duì)小鼠的腎損害作用.三.關(guān)木通及關(guān)木通馬兜鈴酸的慢性腎損害研究采用2000版《藥典》中推薦的人日用藥劑量等倍(按體表面積折算后與《藥典》中推薦的人日用藥劑量相等)、5倍、10倍、20倍的關(guān)木通提取物,同時(shí)用與關(guān)木通20倍劑量組馬兜鈴總酸含量相當(dāng)?shù)木脐P(guān)木通馬兜鈴總酸作為對(duì)照,給大鼠灌胃,隔周給藥7天,給藥試驗(yàn)期為26周,并停藥觀察4周.檢查尿量

4、、尿比重及尿中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β<,2>-微球蛋白(β<,2>-MG)、蛋白、葡萄糖和電解質(zhì)含量,采用免疫組織化學(xué)法觀察腎臟TGF β1蛋白表達(dá)和腎小球基底膜抗原與抗體復(fù)合物,采用HE和Masson染色兩種方法觀察了腎臟組織形態(tài)學(xué)改變.四.關(guān)木通和關(guān)木通馬兜鈴總酸的致突變性和致腫瘤作用研究在小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)中,關(guān)木通提取物的劑量為1/4×、1/2×和1×LD<,50>(小鼠)三個(gè)劑量(折合成Aas