龍須菜瓊脂糖的提取技術(shù)研究.pdf

1、隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展，瓊脂糖作為一種電中性多糖越來越受到人們關(guān)注，已被廣泛用于凝膠電泳、親和層析、分子篩、免疫學(xué)研究等方面。龍須菜為江蘺屬海藻的典型代表，在福建沿海廣泛養(yǎng)殖。利用龍須菜提取瓊膠及瓊脂糖既提高了其附加值，又減少了資源浪費(fèi)。本研究以龍須菜為原料，在優(yōu)化瓊膠的提取工藝的基礎(chǔ)上，通過對(duì)瓊脂糖的不同提取方法進(jìn)行比較，選取EDTA-Na2法、DEAE-纖維素法對(duì)瓊脂糖進(jìn)行提取、純化，經(jīng)對(duì)這2種工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳技術(shù)工藝，提取出

2、優(yōu)質(zhì)的瓊脂糖產(chǎn)品，并對(duì)其進(jìn)行物理、化學(xué)性質(zhì)的測(cè)定及結(jié)構(gòu)分析。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1、瓊膠的提取工藝主要包括堿處理、酸化、漂白、煮膠、凍融、干燥等關(guān)鍵技術(shù)工序。其中，堿處理和漂白工藝對(duì)瓊膠的質(zhì)量影響較大。本研究以硫酸根含量、凝膠強(qiáng)度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以堿處理濃度、溫度、時(shí)間、漂白濃度為影響因子，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，篩選出適當(dāng)?shù)囊蛩睾退健Ｆ渲校温人徕c的濃度為0.1%（以有效氯濃度計(jì)算）。再利用 Box-Behnken響應(yīng)面法，分析堿處理

3、各因素的顯著性和交互作用，得出瓊膠提取的最佳工藝條件為：堿處理濃度5%，堿處理時(shí)間2 h，堿處理溫度75℃，在該提取條件下硫酸根含量為1.72%。
　　2、對(duì)瓊脂糖的EDTA-Na2法、DEAE-纖維素法、堿處理法、NaI法、硫酸銨法等10種不同的提取方法在提取原理、提取工藝、產(chǎn)品指標(biāo)（硫酸根含量、凝膠強(qiáng)度、白度、得率、電內(nèi)滲等）上進(jìn)行比較，選取工藝簡(jiǎn)單、硫酸根含量低、凝膠強(qiáng)度高、白度高、得率高、電內(nèi)滲低的提取方法。綜合考慮，最終

4、確定EDTA-Na2法和DEAE-纖維素法為該研究的提取、純化瓊脂糖的方法。
　　3、將瓊脂糖的制備工藝分提取、純化兩步進(jìn)行。首先利用 EDTA-Na2法從瓊膠中提取瓊脂糖粗品，通過單因素試驗(yàn)研究提取工藝中各影響因素EDTA-Na2濃度、提取溫度、提取時(shí)間對(duì)硫酸根含量及凝膠強(qiáng)度的影響，再利用響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝，確定最佳工藝參數(shù)為：EDTA-Na2濃度4.5 g/L，提取溫度65℃，提取時(shí)間3 h。按模型預(yù)測(cè)，最優(yōu)工藝提取的瓊脂糖

5、，其硫酸根含量為0.48%、凝膠強(qiáng)度為1073.09 g/cm2；再利用DEAE-纖維素法對(duì)瓊脂糖進(jìn)行純化處理，通過單因素試驗(yàn)確定：DEAE-纖維素的添加量、提取溫度、提取時(shí)間為影響瓊脂糖中硫酸根含量及凝膠強(qiáng)度的主要因素，經(jīng)響應(yīng)面法優(yōu)化得到最優(yōu)工藝參數(shù)：DEAE-纖維素添加量55 g，提取溫度80℃，提取時(shí)間2.5 h。
　　4、以最優(yōu)工藝提取出瓊脂糖產(chǎn)品，通過對(duì)其物理、化學(xué)指標(biāo)的測(cè)定及結(jié)構(gòu)分析可知：硫酸根含量0.17%，凝固溫度