龍須菜瓊膠糖的制備及其副產(chǎn)物的研究.pdf

1、該研究以龍須菜為原料制備高凝膠強(qiáng)度瓊膠,并用改良DEAE－纖維素法制備高品質(zhì)瓊膠糖；建立了瓊膠及瓊膠糖中硫酸基含量的離子色譜檢測(cè)方法；回收DEAE－纖維素,并用NaCl溶液洗脫DEAE-纖維素制備硫瓊膠,由硫瓊膠降解生成硫瓊膠寡糖并研究其體外抗氧化活性。龍須菜藻渣脫除助濾劑后制備龍須菜膳食纖維,并通過(guò)復(fù)合植物水解酶水解對(duì)膳食纖維進(jìn)行改性,以提高膳食纖維活性。該文的主要工作及結(jié)論如下:
　　 1.研究龍須菜冷堿處理?xiàng)l件與瓊膠凝膠強(qiáng)

2、度(Gel strength,GS)的關(guān)系,采用均勻設(shè)計(jì)法,研究了溫度T、堿液濃度M和處理時(shí)間t三因素與龍須菜瓊膠凝膠強(qiáng)度的定量關(guān)系。通過(guò)多元線(xiàn)性回歸擬合出回歸模型:GS=27.72×T+n19.69×M+2.75×t-488.62,P<0.0001。由回歸模型可知,3因素對(duì)龍須菜凝膠強(qiáng)度的貢獻(xiàn)大小為:T>M>t。在3因素的水平范圍內(nèi),再經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,試驗(yàn)測(cè)定值與回歸預(yù)測(cè)值均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。這表明,該回歸模型對(duì)龍須菜凝膠

3、強(qiáng)度具有較好的預(yù)測(cè)性,為龍須菜冷堿法處理的最佳工藝條件、提高龍須菜瓊膠加工質(zhì)量、降低生產(chǎn)成本提供了重要科學(xué)依據(jù)。
　　 2.以龍須菜瓊膠為原料,分別采用KMnO4-H2C2O4法漂白、乙醇處理和DEAE-纖維素純化等工藝制備生化級(jí)瓊膠糖,并對(duì)工藝參數(shù)進(jìn)行了正交優(yōu)化,對(duì)瓊膠糖的理化指標(biāo)和電泳性能進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:漂白試驗(yàn)的最佳工藝條件為:KMnO4濃度0.10％、pH6.0、漂白時(shí)間5 min、H2C2O4濃度0.30％,漂白后

4、瓊膠白度(HW值)為82.98、凝膠強(qiáng)度為1083g/cm2；乙醇處理的最佳工藝條件為:料液比1:40,乙醇濃度60％,處理時(shí)間6 h,處理后瓊膠透明度(透光率)為50.2％。制備的瓊膠糖灰分含量為0.25％、凝膠強(qiáng)度為1127g/cm2、硫酸基含量為0.24％；結(jié)晶紫電泳、電內(nèi)滲測(cè)定和基因組DNA電泳試驗(yàn)表明:改良DEAE-纖維素法制備的瓊膠糖具有優(yōu)異的電泳性能,適用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)的凝膠電泳研究。
　　 3.以瓊膠糖為

5、原料,樣品用干法灰化法處理后分別以超純水和1.0mol/L鹽酸溶解定容,利用離子色譜法和硫酸鋇比濁法測(cè)定其硫酸基含量(以SO42-計(jì))。結(jié)果表明,離子色譜法SO42-在1.0～15.0 mg/L范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好(R2=0.9996),硫酸鋇比濁法SO42-在6.0～30.0 mg/L范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好(R2=0.9991)；對(duì)同種瓊膠糖樣品進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定,離子色譜法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.40％(n=6),具有較高的精密度,硫酸鋇比

6、濁法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=3.51％(n=6)；對(duì)2種不同的瓊膠糖樣品分別進(jìn)行兩個(gè)水平的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn),離子色譜法回收率為86.33％～97.40％,硫酸鋇比濁法回收率為84.17％～96.67％。因此,離子色譜法和硫酸鋇比濁法均能準(zhǔn)確測(cè)定樣品中硫酸基含量。
　　 4.用NaCl溶液沈脫龍須菜瓊膠糖制備過(guò)程中的DEAE-纖維素上吸附的硫瓊膠,對(duì)硫瓊膠和瓊膠進(jìn)行紅外光譜分析,并水解制備龍須菜硫瓊膠寡糖,對(duì)硫瓊膠寡糖進(jìn)行體外抗氧化活性

7、評(píng)價(jià),結(jié)果證明龍須菜瓊膠寡糖和硫瓊膠寡糖對(duì)·O2-和DPPH均有較明顯的清除作用,硫瓊膠寡糖抑制率大于瓊膠寡糖而低于抗壞血酸,硫瓊膠寡糖對(duì)·O2-清除作用的IC50大于0.5 mg/ml,對(duì)DPPH清除作用的IC50為7 mg/L,是兩種優(yōu)良的體外抗氧化劑,對(duì)維持機(jī)體健康有重要意義；硫瓊膠紅外光譜分析結(jié)果如下:851.3 cm-1附近有特征吸收,表明D－半乳糖C4上有直鍵硫酸基,O-S(直立鍵)；932.2cm-1和1075.6 cm-

8、1處有較弱特征吸收,表明樣品中含有3,6－內(nèi)醚半乳糖(3,6－AG)；另外932.2 cm-1處特征吸收也表示有6－硫酸基的存在,1255.2 cm-1處為總硫酸基特征吸收,為強(qiáng)吸收,因此表明硫瓊膠中含有較大量的硫酸基。
　　 5.采用離心的方法除去龍須菜瓊膠加工過(guò)程中生成的藻渣中的助濾劑后制備龍須菜藻渣膳食纖維,粗纖維得率為21.4％,所得藻渣膳食纖維膨脹力為3.37 ml/g、持水力為285％,采用復(fù)合植物水解酶水解的方法對(duì)